چکید ه

  سابقه و هدف

  سلول‌های بنیادی CD133⁺ بند ناف، زیر گروهی از سلول‌های خونساز را تشکیل می‌دهند. ثابت شده که این سلول‌ها از توانایی تمایز خوبی به سمت سلول‌های عصبی برخوردار هستند. ژن PAX6 جزیی از خانواده­ چند ژنی PAX و از فاکتور­های رونویسی است. ژن PAX6 ژن کنترل­کننده اصلی تکامل چشم و اندام­های حسی بافت­های اپیدرمی و عصبی می‌باشد. هدف از این مطالعه، بررسی روند تمایزی سلول‌های CD133⁺ به دست آمده از بند ناف که ژن PAX6(5a) به آن‌ها انتقال یافته است بود.

  مواد و روش‌ها

  در یک مطالعه تجربی، ابتدا سلول‌های تک هسته‌ای خون بند ناف به وسیله فایکول جدا شدند، سپس سلول‌های CD133⁺ موجود در آن با روش MACS جدا‏‏‏‏‏ ‎ ‏‏ ‎ ‏ ‎ ‏‏‏ ‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏‏ ‎ْ و در محیط کشت Stem Span کشت داده شدند. سپس به منظور ساخت ویروس، وکتور ناقل ژن PAX6 و وکتورهای کمکی( pMD2G ، psPAX2 ) به سلول‌های HEK293T ترانسفکت شدند. پس از تغلیظ ویروس و تیتر کردن آن، سلول‌های CD133⁺ با تیتر مطلوب ویروس آلوده شدند. سلول‌های حاوی ویروس مورد نظر، از نظر وجود پروتئین‌های PAX6 ، Rhodopsin ، Chx10 ، Thy1 و Nestin توسط روش ایمنوسایتوشیمی ارزیابی شدند.

  یافته‌ها

  پس از دو هفته پروتئین‌های Thy-1 ، Chx10 ، Nestin و PAX6 در سلول‌های آلوده شده بیان شدند. هم چنین بیان مارکرهای Rhodopsin و Nestin در سلول‌های کنترل مشاهده شد.

  نتیجه‌گیری

  نتایج حاصل از این مطالعه بیانگر تمایز سلول‌های CD133⁺ به سلول‌های پروژنیتوری عصبی و سلول‌های شبه عصبی شبکیه از جمله سلول‌های گانگلیونی می‌باشد.