فصلنامه پژوهشی خون

  چکید ه

  سابقه و هدف

  سلول‌های بنیادی خون‌ساز کیسه زرده به علت تکثیر زیاد و نداشتن آنتی‌ژن‌های وابسته به MHC برای مطالعات هماتوپویتیک مناسب‌تر هستند. با توجه به اثرات مثبت استفاده از سیستم هم کشتی در تمایز سلول‌‌های بنیادی، در این تحقیق سعی شد از رده سلول M2-10B4 به همراه اریتروپویتین برای تمایز سلول‌های بنیادی کیسه زرده استفاده شود.

  مواد وروش‌‌ها

  کیسه زرده از موش‌‌های حامله 10 روزه جدا گردید و با استفاده از سرنگ و سرسوزن‌‌های مختلف ( G 19، G 23 و G 27) و آنزیم کلاژناز 1/0% و یا تریپسین 2 5 /0% دارای EDTA 02/0% به سلول‌‌های منفرد تبدیل شدند. سپس از سلول‌های رده M2-10B4 که فعالیت میتوزی آن‌ها با میتومایسین متوقف شده بود برای هم کشتی استفاده شد و به محیط کشت حاوی ng/ml 5 0 فاکتور سلول بنیادی و U/ml 1 اریتروپویتین اضافه و در37 درجه سانتی‌گراد و فشار 5 درصد CO₂ نگهداری شد . بعد از گذشت یک هفته رشد و تمایز سلول‌‌ها ، بررسی و سنجش کلنی در محیط نیمه جامد و رنگ آ میزی بنزیدین صورت گرفت.

  یافته‌‌ها

  سلول‌‌ها برروی این رده سلولی به‌خوبی رشد و تکثیر ‌یافتند. البته درمحیط حاوی اریتروپویتین، رشد بهتری نسبت به محیط فاقدآن صورت گرفته بود وسلول‌‌های بنزیدین مثبت یا رده اریتروئیدی یبیشتری مشاهده‌ شد.

  نتیجه گیری

  می‌توان با انتخاب لایه پشتیبان مثل سلول‌‌های استرومایی مغزاستخوان و به‌کار بردن هورمون اریتروپویتین، درصد بیشتری رده اریتروئیدی به دست آورد، گرچه برای تعیین نوع خون سازی اولیه یا ثانویه نیازبه انجام تحقیقات تکمیلی است.