fa تعیین ژنوتیپ RHD جنین در مادران RhD منفی با استفاده از Real Time PCR هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <div align="justify" style="direction: rtl"> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"></p> <div> <div></div> </div> </div> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;">چکیده</p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>سابقه و هدف </em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong>آنتی‌ژن </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> ، نقش مهمی را در ایجاد بیماری همولیتیک جنین و نوزاد ایفا می‌کند. هدف از انجام این مطالعه، تعیین ژنوتیپ </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> جنین در پلاسمای مادران </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> منفی و هم چنین تعیین جنسیت جنین در هفته‌های نخست بارداری با استفاده از روش </strong><strong><span dir="LTR">Real Time PCR</span></strong><strong> بود.</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.85pt;"><strong><em>مواد و روش‌ها</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong>در این مطالعه توصیفی، 21 نمونه </strong><strong><span dir="LTR">DNA</span></strong><strong> ، از پلاسمای مادران باردار</strong><strong><span dir="LTR">RhD </span></strong><strong>&nbsp;منفی که در سنین بارداری بین 8 تا 39 هفته قرار داشتند استخراج و در مورد هر یک از آن‌ها، ژن‌های بتا گلوبین، </strong><strong><span dir="LTR">SRY</span></strong><strong> و اگزون‌های 5، 7 و 10 از ژن </strong><strong><em><span dir="LTR">RHD</span></em></strong><strong> با استفاده از روش </strong><strong><span dir="LTR">RT-PCR</span></strong><strong> مورد بررسی قرار گرفت و نتایج حاصل از آن با نتایج فنوتیپی نوزاد مقایسه گردید. یافته‌ها توسط آزمون‌های کای‌دو و کوهن و نرم‌افزار 22 </strong><strong><span dir="LTR">SPSS</span></strong><strong> تجزیه و تحلیل شدند.</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>یافته‌ها</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><a><strong>11 مورد(4/52%) از نوزادان جنس مذکر داشتند که در10 مورد(91%) از آن‌ها فنوتیپ </strong></a><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> مثبت و در یک مورد(9%) منفی گزارش شد. هم چنین 10 مورد(6/47%) از نوزادان جنس مؤنث داشتند که 9 مورد(90%) فنوتیپ </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> مثبت و یک مورد(10%) </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> منفی گزارش گردید. این نتایج با نتایج ژنوتیپی به دست آمده از اگزون‌های</strong><strong><span dir="LTR">RHD </span></strong><strong>&nbsp;و </strong><strong><span dir="LTR">SRY</span></strong><strong> مطابقت کامل داشت.</strong><strong><a href="#_msocom_1" id="_anchor_1" name="_msoanchor_1" uage="JavaScript"><span dir="RTL">[Okhovat1]</span></a>&nbsp;</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>&nbsp;نتیجه گیری</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong>نتایج نشان داد که بررسی ژنوتیپ </strong><strong><span dir="LTR">RHD</span></strong><strong> جنین را می‌توان با استفاده از پلاسمای مادر و به کارگیری روش </strong><strong><span dir="LTR">RT-PCR</span></strong><strong> با حساسیت و اختصاصیت بالا انجام داد. این روش کمک شایانی به مادران باردار </strong><strong><span dir="LTR">RhD</span></strong><strong> منفی در مورد به کارگیری صحیح از ایمونوگلوبولین </strong><strong><span dir="LTR">D</span></strong><strong> و هم چنین در مورد مدیریت و جلوگیری از بروز بیماری همولیتیک جنین و نوزاد می‌کند.</strong></p> <div> <hr align="left" size="1" width="33%" > <div> <div id="_com_1" uage="JavaScript"><a name="_msocom_1"></a> <p dir="RTL"><span dir="LTR">&nbsp;<a href="#_msoanchor_1">[Okhovat1]</a></span>مورد دوازدهم: فراوانی ها به صورت درصد ذکر گردیدند.</p> </div> </div> </div> <p>&nbsp;</p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong>Abstract</strong></p> <p style="margin-left:35.1pt;"><strong><em>Background and Objectives</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">The RhD antigens play a significant role in Hemolytic Disease of the Fetus and Newborn (HDFN). The intention of this study is to determine the RHD fetal genotype in the maternal plasma of RhD negative pregnant women and sex determination of the fetus in the initial weeks of pregnancy by Real-time PCR technique.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Materials and Methods</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">In this descriptive study, we used 21 plasma samples from RhD negative pregnant women. DNA was extracted from samples by Cinnapure DNA Kit. Real time PCR reactions were done with specific primers for RHD gene exons 5, 7 and 10, and beta-globin and SRY genes. The sex and Rh phenotype of children were obtained after delivery.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Results</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><a>Among the pregnant women, 11 (52.4%) were carrying male and 10 (47.6%) were carrying female fetuses. Out of 11 male fetuses, 10 (91%) were RhD-positive and one (9%) was RhD-negative. Out of 10 female fetuses, 9 (90%) were RhD-positive and one (10%) was RhD-negative. All prenatal genotype testing results were in concordance with postnatal RhD status and fetal sex without any false- positive or -negative results.</a><span dir="RTL"><a href="#_msocom_1" id="_anchor_1" name="_msoanchor_1" uage="JavaScript">[Okhovat1]</a>&nbsp;</span></p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Conclusions</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">Performing Real-time PCR on CffDNA showed accurate, efficient and reliable results, allowing rapid and high throughput noninvasive prenatal diagnosis and determination of fetal sex and RhD status in clinical samples. This method helps RhD negative pregnant women with the proper use of immunoglobulin D and on the management and prevention of Hemolytic Disease of the Fetus and Newborn (HDFN).</p> <div> <hr align="left" size="1" width="33%" > <div> <div id="_com_1" uage="JavaScript"><a name="_msocom_1"></a> <p dir="RTL"><span dir="LTR">&nbsp;<a href="#_msoanchor_1">[Okhovat1]</a></span>مورد دوازدهم: فراوانی ها به صورت درصد ذکر گردیدند.</p> </div> </div> </div> کلمات کلیدی: غربالگری قبل از تولد, سیستم گروه خونی Rh , بررسی تعیین جنسیت, روش‌های تعیین ژنوتیپ Real-Time PCR Key words: Prenatal Screening, Rh-Hr Blood-Group System, Sex Determination Analysis, Genotyping Techniques, Real-Time PCR 19 28 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-907-1&slc_lang=fa&sid=1 M.H. Ahmadi محمد حسین احمدی 9100319475328460013649 9100319475328460013649 No تهران ـ ایران N. Amirizadeh ناصر امیری‌زاده 9100319475328460013650 9100319475328460013650 No تهران ـ ایران S. Hantushzadeh صدیقه حنطوش‌زاده 9100319475328460013651 9100319475328460013651 No بیمارستان ولیعصر، دانشگاه علوم پزشکی تهران ـ تهران ـ ایران M.A. Okhovat محمد علی اخوت 9100319475328460013652 9100319475328460013652 No تهران ـ ایران M. Sayyadi محمد صیادی 9100319475328460013653 9100319475328460013653 No تهران ـ ایران A. Valikhani امیر ولی‌خانی 9100319475328460013654 9100319475328460013654 No تهران ـ ایران A. Azarkeivan آزیتا آذرکیوان 9100319475328460013655 9100319475328460013655 Yes تهران ـ ایران ـ صندوق پستی: 1157-14665