The Scientific Journal of Iranian Blood Transfusion Organization
فصلنامه پژوهشی خون
Sci J Iran Blood Transfus Organ
Medical Sciences
http://bloodjournal.ir
91
journal91
1027-9520
1735-8248
fa
jalali
1394
12
1
gregorian
2016
3
1
13
1
online
1
fulltext
fa
القای آپوپتوز در سلولهای لوسمیک پرومیلوسیتی(NB4) توسط الیگونوکلئوتید ضد آنزیم تلومراز
Induction of cell death and apoptosis in NB4 promyelocytic leukemic cells using Oligonucleotide as a telomerase antagonist
هماتولوژي
Hematology
پژوهشي
Research
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt">چکیده</p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>سابقه و هدف </strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>به</strong> <strong>دلیل</strong> <strong>فعالیت بالای آنزیم</strong> <strong>تلومراز</strong> <strong>در</strong> <strong>تکثیر اغلب</strong> <strong>سرطان­ها</strong> <strong>از</strong> <strong>جمله لوسمی پرومیلوسیتیکی</strong> <strong>حاد</strong><strong><span dir="ltr">(APL)</span></strong><strong>، مهار</strong> <strong>تلومراز</strong> <strong>روش</strong> <strong>مناسبی</strong> <strong>جهت</strong> <strong>درمان</strong> <strong>میباشد.</strong> <strong>در</strong> <strong>این</strong> <strong>مطالعه</strong> <strong>به</strong> <strong>بررسی</strong> <strong>اثر</strong> <strong>الیگونوکلئوتید ضد تلومراز بر روی القای مرگ سلولی و آپوپتوز سلول­های </strong><strong><span dir="ltr">NB4</span></strong><strong> پرداختیم.</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.85pt"><strong>مواد و روشها</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>در</strong> <strong>این</strong> <strong>مطالعه</strong> <strong>تجربی،</strong> <strong>به</strong> <strong>منظور</strong> <strong>بررسی</strong> <strong>اثر الیگونوکلئوتید آنتاگونیست تلومراز، سلول­ها تحت دوزهای مختلف الیگونوکلئوتید قرار گرفتند. جهت</strong> <strong>بررسی</strong> <strong>اثر این دارو</strong> <strong>بر</strong> <strong>زند­ه­ما­نی سلول­ها، آزمایش </strong><strong><span dir="ltr">MTT</span></strong><strong> انجام شد و جهت بررسی مولکولی القای آپوپتوز، بیان ژن­های دخیل در این روند به روش </strong><strong><span dir="ltr">Real-Time PCR</span></strong><strong> ارزیابی گردید.</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>یافتهها</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>الیگونوکلئوتید قادر</strong> <strong>به</strong> <strong>کاهش</strong> <strong>درصد</strong> <strong>زندهمانی</strong> <strong>و القای مرگ سلولی</strong> <strong>میباشد</strong><strong><span dir="ltr">.</span></strong><strong> تیمار</strong> <strong>سلول­ها</strong> <strong>با</strong> <strong> الیگونوکلئوتید در غلظت­های 5، 10، 20، 30 و 40 پیکومولار، به صورت</strong> <strong>وابسته</strong> <strong>به</strong> <strong>دوز</strong> <strong>پس</strong> <strong>از</strong> <strong>طی</strong> <strong>48 ساعت باعث کاهش درصد زنده­مانی سلول­ها و مرگ سلولی گردید. شایان ذکر است میانگین درصد زنده مانی در غلظت 40 پیکومولار، 64% بود، در حالی که این درصد در تیمار سلول­ها با الیگونوکلئوتید کنترل 94% می­باشد. علاوه</strong> <strong>بر</strong> <strong>این،</strong> <strong>نتایج</strong> <strong>حاصل از این تحقیق نشان</strong> <strong>می</strong> <strong>دهد</strong> <strong>که</strong> <strong>مرگ سلولی القا شده با این الیگونوکلئوتید با افزایش بیان ژن­ </strong><strong><span dir="ltr">Bax</span></strong><strong> و کاهش بیان 2</strong><strong><span dir="ltr">Bcl-</span></strong><strong> همراه می­باشد.</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>نتیجه گیری</strong></p>
<p dir="rtl" style="margin-right: 36.25pt"><strong>با</strong> <strong>توجه</strong> <strong>به</strong> <strong>طول</strong> <strong>تلومر</strong> <strong>کوتاه</strong> <strong>و</strong> <strong>فعالیت</strong> <strong>بالای</strong> <strong>آنزیم</strong> <strong>تلومراز</strong> <strong>در</strong> <strong>بیماران </strong><strong><span dir="ltr">APL</span></strong><strong> و همچنین اثربخشی الیگونوکلئوتید در القای مرگ سلولی در سلول­های پرومیلوسیتیک </strong><strong><span dir="ltr">NB4</span></strong><strong>، می­توان</strong> <strong>درمان­های</strong> <strong>مبتنی</strong> <strong>بر</strong> <strong>استراتژی مهار آنزیم تلومراز را به عنوان راه­کار مناسب در این بیماران مدنظر قرار داد.</strong></p>
<p style="margin-left: 34.85pt"><strong>Abstract</strong></p>
<p style="margin-left: 35.1pt"><strong><em>Background and Objectives</em></strong></p>
<p style="margin-left: 34.85pt">Acute promyelocytic leukemia (APL) is characterized by a specific t(15;17), distinct morphologic picture, and a clinical coagulopathy that contributes to the morbidity and mortality of the disease. Telomerase is consistently activated in nearly all APL patients and telomerase-mediated telomere stabilization is responsible for unlimited replicative potential of the disease. This study aimed to investigate the effects of designed oligonucleotide as a telomerase inhibitor on NB4 cells.</p>
<p style="margin-left: 34.85pt"></p>
<p style="margin-left: 34.85pt"><strong><em>Materials and Methods</em></strong></p>
<p style="margin-left: 34.85pt">NB4 leukemic cells were treated with various concentrations of oligonucleotide by transfection method using lipofectamin 2000. The inhibitory effect of oligonucleotide on cell metabolic activity and cell viability was assessed by MTT assay. Quantitative real-time PCR were applied to investigate alteration of Bax and Bcl-2 mRNA levels.</p>
<p style="margin-left: 34.85pt"></p>
<p style="margin-left: 34.85pt"><strong><em>Results</em></strong></p>
<p style="margin-left: 34.85pt">Oligonucleotide decreased cell viability index and exerted cytotoxic effect against NB4 leukemic cells; we found that exposing cells with Oligonucleotide at 40 pMol for 48 h induced cell death and apoptotic effects on NB4 cells. Furthermore, transcriptional suppression of Bcl-2 and upregulation of Bax were found upon NB4 treatment by oligonucleotide.</p>
<p style="margin-left: 34.85pt"></p>
<p style="margin-left: 34.85pt"><strong><em>Conclusions</em></strong></p>
<p style="margin-left: 34.85pt">Based on the short telomere length and high terlomerase activity in APL as well as inhibitory effect of oligonucleotide against NB4 cells, anti-telomerase-based therapy might be regarded as a successful strategy in APL therapy.</p>
<p style="margin-left: 34.85pt"></p>
<p style="margin-left: 34.85pt"></p>
کلمات کلیدی: لوسمی پرومیلوسیتیک حاد, آپوپتوز, مرگ سلولی
Key words: Acute Promyelocytic Leukemia, Apoptosis, Cell Death
1
10
http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-526-3&slc_lang=fa&sid=1
L.
Asghari kia
لیلا
اصغریکیا
leilikia_1983@yahoo.com
9100319475328460013632
9100319475328460013632
No
تهران ـ ایران
D.
Bashash
داود
بشاش
9100319475328460013633
9100319475328460013633
No
تهران ـ ایران
S.H.
Ghaffari
سید حمیدا...
غفاری
shghaffari200@yahoo.com
9100319475328460013634
9100319475328460013634
Yes
کارگر شمالی ـ تهران ـ ایران ـ کدپستی: 14111
M.
Hamid poor
محسن
حمیدپور
9100319475328460013635
9100319475328460013635
No
تهرانـ ایران
A.
Ghavamzadeh
اردشیر
قوامزاده
9100319475328460013636
9100319475328460013636
No
تهران ـ ایران