fa جداسازی، تکثیر و تمایز سلول‌های استرومال مزانشیمی خون بند ناف انسانی به سلول‌های پروژنیتور عصبی در محیط آزمایشگاهی سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p align="right">  چکید ه </p><p align="right"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="right"> <strong> خون بند ناف دارای مزایای فراوانی نسبت به سایر منابع سلول‌های استرومال مزانشیمی است. این مطالعه با هدف فراهم کردن یک دستورالعمل جدید جهت تمایز عصبی سلول‌های استرومال مزانشیمی خون بند ناف انسانی در محیط آزمایشگاه انجام گرفت. </strong></p><p align="right"> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> در این مطالعه تجربی، سلول‌های بنیادی مزانشیمی خون بند ناف انسانی پس از جداسازی و تایید مورفولوژیکی، تمایز به رده چربی و استخوان و ایمنوفنوتایپ، با رتینوئیک اسید، فاکتور رشد فیبروبلاستی، فاکتور رشد عصبی، فاکتور رشد اپیدرمال، اسید اسکوربیک، ایزوبوتیل گزانتین و محیط کشت نوروبازال جهت القای تمایز عصبی تیمار گردید. بیان نسبی ژن‌های اختصاصی عصبی </strong><strong></strong><strong>با </strong><strong>Real-Time PCR </strong><strong>، نرم‌افزار 2009 </strong><strong>REST </strong><strong>و 5/11 </strong><strong>SPSS </strong><strong>مورد بررسی قرارگرفت. </strong></p><p align="right"> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> نتایج نشان داد که سلول‌های استرومال مزانشیمی، دوکی بوده و پتانسیل تمایز به رده چربی و استخوان را دارند. فلوسیتومتری برای(78%) </strong><strong>CD73 </strong><strong>، (78%) </strong><strong>CD105 </strong><strong>مثبت و برای </strong><strong>CD45 </strong><strong>(2%) و (5/2%) </strong><strong>HLA-DR </strong><strong>منفی بود. پس از تمایز عصبی و تغییر شکل قابل توجه سلول‌های استرومال مزانشیمی به سلول‌های عصبی، نتایج تجزیه و تحلیل </strong><strong>Real-Time PCR </strong><strong>نشان داد که بیان ژن‌هایی نظیر </strong><strong><i>MBP </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong></strong><strong><i>nestin </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong><i>MAP-2 </i></strong><strong><i /></strong><strong>و </strong><strong><i>GFAP </i></strong><strong>به طور معناداری در مقایسه با سلول‌های تمایز نیافته(کنترل) افزایش یافته است(05/0 </strong><strong>p < </strong><strong>). </strong></p><p align="right"> <strong><i> نتیجه‌گیری </i></strong></p><p align="right"> <strong> مطالعه حاضر نشان داد، تیمار سلول‌های استرومال مزانشیمی با ترکیبی از فاکتورهای رشد و مواد شیمیایی باعث القای تمایز عصبی شده و می‌تواند باعث افزایش کارآیی سلول درمانی بیماری‌های نورودژنراتیو براساس سلول‌های بنیادی در آینده گردد. هر چند که عملکرد سلول‌های پروژنیتور عصبی به دست آمده قبل از کاربرد بالینی باید در مدل‌های حیوانی ارزیابی شود. </strong></p><p>  </p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Umbilical cord blood, as a source of mesenchymal stromal cells, has many advantages compared to other sources. This study aimed to provide a new method for the <i>in vitro</i> neural differentiation of human umbilical cord blood derived mesenchymal stromal cells (MSCs hUCB). </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study, MSCs hUCBs were isolated and characterized by morphologic, adipogenic, and osteogenic differentiation and immunophenotypical analysis. Then, neural induction of MSCs hUCB was performed by using RA, bFGF, NGF, EGF, AsA , IBMX, and neurobasal medium. Then, the relative expression of neural-specific genes was investigated by quantitative real-time PCR assays, REST 2009, and SPSS 11.5 software.</p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Our results showed the osteocytic and adipocytic differentiation capacity and fibroblast-like morphology of MSCs hUCB. Flow cytometry analysis of MSCs hUCB revealed that the cells are positive for CD105 (78%), CD73 (78%), and negative for CD45 (2%), HLA-DR (2.5%). The cells showed the remarkable transition from fibroblast-like morphology to nueral progenitor cells. The results showed that the expression of <i>GFAP</i>, <i>MBP</i>, <i>nestin</i>, <i>MAP-2</i> genes after neural induction significantly increased in comparison with that of the control as measured by quantitative real-time PCR assays (p < 0.05).<strong> </strong></p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Treatment of MSCs hUCB with a set of growth factors and chemical materials induces neural differentiation and increases the efficiency of cell-based therapy for neurodegenerative diseases in the future. Although, the functionality of neural progenitor cells must be carefully assessed in animal models prior to use in clinical application. </p><p> <strong> </strong></p><p>   </p> کلمات کلیدی : سلول‌های استرومال مزانشیمی, سلول درمانی, تمایز سلولی Key words : Mesenchymal Stromal Cells, Cell- and Tissue-Based Therapy, Cell Differentiation 266 276 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-865-1&slc_lang=fa&sid=1 H. Rafieemehr حسن رفیعی مهر 9100319475328460012918 9100319475328460012918 No همدان ـ ایران M. Kheirandish مریم خیراندیش m.kheirandish@ibto.ir 9100319475328460012919 9100319475328460012919 Yes تهران‌ ـ ایران ت صندوق پستی: 1157-14665 M. Soleimani مسعود سلیمانی 9100319475328460012920 9100319475328460012920 No تهران‌ت ایران