fa بررسی بیان ژن‌های حفاظت سلولی TXNRD1 و GCLC پس از افزایش بیان Nrf2 در سلول‌های بنیادی مزانشیمی مشتق از بند ناف سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p align="right">  چکید ه </p><p align="right"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="right"> <strong> سلول‎های بنیادی مزانشیمی( </strong><strong>MSCs </strong><strong>) به علت خصوصیات منحصر به فرد، سلول‌هایی ایده </strong><strong>‎ </strong><strong>آل در زمینه </strong><strong>‎ </strong><strong>های سلول </strong><strong>‎ </strong><strong>درمانی و ژن </strong><strong>‎ </strong><strong>درمانی می‎باشند. </strong><strong></strong><strong>اما بقای کم آن‎ها پس از پیوند، استفاده از آن </strong><strong>‎ </strong><strong>ها را محدود کرده است. </strong><strong></strong><strong>هدف این مطالعه، بررسی بیان ژن‎های حفاظت سلولی شامل </strong><strong><i>NQO1 </i></strong><strong>، </strong><strong><i>TXNRD1 </i></strong><strong>، </strong><strong><i>HO-1 </i></strong><strong>، </strong><strong><i>GCLC </i></strong><strong>پس از افزایش بیان </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>در سلول‎های بنیادی مزانشیمی بود. </strong></p><p align="right"> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> در این مطالعه تجربی، </strong><strong>MSCs </strong><strong>بند ناف کشت داده شدند و پلاسمید نوترکیب حاوی ژن </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>و پلاسمید فاقد ژن </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>با استفاده از ماده </strong><strong>FuGENE HD </strong><strong>به داخل این سلول </strong><strong>‎ </strong><strong>ها ترانسفکت شدند. پس از اعمال استرس به سلول‎ها، </strong><strong>RNA </strong><strong>استخراج شده و </strong><strong>cDNA </strong><strong>ساخته شد. آغازگرهای اختصاصی برای ژن </strong><strong>‎ </strong><strong>های </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong><i>NQO1 </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong><i>TXNRD1 </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong><i>HO-1 </i></strong><strong><i>، </i></strong><strong><i>GCLC </i></strong><strong>با استفاده از نرم‌افزار 3 </strong><strong>Primer </strong><strong>طراحی و بیان این ژن‎ها با روش </strong><strong>RT-PCR </strong><strong>بررسی شد. نتایج با استفاده از نرم‎افزار </strong><strong>Image J2x </strong><strong>و </strong><strong>ANOVA </strong><strong>کمی </strong><strong>‎ </strong><strong>سازی و بررسی آماری گردید. </strong></p><p align="right"> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> بیان </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>در </strong><strong>MSCs </strong><strong>متعاقب ترانسفکشن افزایش داشت( 01/0 </strong><strong>(p < </strong><strong>. افزایش بیان ژن </strong><strong>‎ </strong><strong>های </strong><strong><i>TXNRD1 </i></strong><strong><i>و </i></strong><strong><i>GCLC </i></strong><strong>نیز در سلول‎های ترانسفکت شده مشاهده شد(05/0 </strong><strong>p< </strong><strong>و 01/0 </strong><strong>(p< </strong><strong>ولی بیان ژن </strong><strong>‎ </strong><strong>های </strong><strong><i>HO-1 </i></strong><strong><i>و </i></strong><strong><i>NQO1 </i></strong><strong>در این سلول‎ها نسبت به کنترل تغییری نداشت. </strong></p><p align="right"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="right"> <strong> افزایش بیان </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>موجب بیان </strong><strong><i>GCLC </i></strong><strong>و </strong><strong><i>TXNRD1 </i></strong><strong>در سلولهای بنیادی مزانشیمی شده و به نظر می </strong><strong>‎ </strong><strong>رسد بخشی از اثرات حفاظتی شناخته شده </strong><strong><i>Nrf2 </i></strong><strong>تحت تاثیر بیان این ژن </strong><strong>‎ </strong><strong>ها باشد. </strong></p><p align="right"><strong></strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Due to the unique criteria, mesenchymal stem cells (MSCs) are the ideal cells for cell therapy and gene therapy. However, the low survival of MSCs after transplantation has limited their application. This study aimed to evaluate the expression of cytoprotective genes including <i>NQO1, TXNRD1, HO-1, GCLC</i> following the overexpression of <i>Nrf2</i> in MSCs.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p>  <table><tbody><tr><td><p> In this experimental study, umbilical cord-derived MSCs were cultured and recombinant vectors containing <i>Nrf2</i> and empty vectors were transfected into MSCs using FuGENE HD. After exposure of the cells to stress, RNA extraction and cDNA generation were performed. Using Primer3 software, specific primers were designed for <i>Nrf2</i>, <i>NQO1</i> ، <i>TXNRD1</i> ، <i>HO-1 </i>and <i>GCLC </i>genes and the expression of these mentioned genes was evaluated by RT-PCR. The results were quantified and analyzed statistically utilizing Image J software and ANOVA.</p></td></tr></tbody></table></p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> The expression of <i>Nrf2</i> was up-regulated in MSCs after transfection (p< 0.01). Overexpression of <i>TXNRD1</i> and <i>GCLC</i> was observed in transfected cells (p <0.05 and p <0.01) however, the expression of <i>NQO1</i> and HO-1 did not change in the transfected group in comparison to the control (p > 0.05).</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Overexpression of <i>Nrf2</i> resulted in the overexpression of <i>TXNRD1</i> and <i>GCLC</i> in MSCs and might be explained by the fact that a part of the known <i>Nrf2</i> cytoprotective mechanisms is controlled by the expression of these genes.</p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <i> </i></p><p>  </p> سلول‎‎های بنیادی مزانشیمی, پروتئین Nrf2 انسانی, پروتئین TXNRD1 انسانی Key words : Mesenchymal Stem Cells, NRF2 protein ٬ human, TXNRD1 protein ٬ human 255 265 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-818-3&slc_lang=fa&sid=1 H. Mehrabi Habibabadi حسین مهرابی حبیب‎آبادی 9100319475328460012967 9100319475328460012967 No تهران ـ ایران F. Amiri فاطمه امیری 9100319475328460012968 9100319475328460012968 No تهران ـ ایران E. Moslemi الهام مسلمی 9100319475328460012969 9100319475328460012969 No تهران ـایران M. Habibi Roudkenar مهر حبیبی رودکنار 9100319475328460012970 9100319475328460012970 No تهران ـ ایران M.A. Jalili محمدعلی جلیلی m.jalili@ibto.ir 9100319475328460012971 9100319475328460012971 Yes تهران ـ ایران ـ صندوق پستی: 1157-14665