fa یک روش سریع، ساده و مقرون به صرفه برای جداسازی سلول‌های بنیادی مزانشیمی ژله وارتون با استفاده از فسفات بافر سالین(PBS) سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <strong></strong><strong><p align="right">  چکید ه </p><p align="right"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="right"> <strong> جداسازی سلول‌های بنیادی مزانشیمی از ژله وارتون بدون آسیب رساندن به ساختار و گیرنده‌های سطح سلول با حفظ عملکرد، قدرت تکثیر، بقای سلول و صرف حداقل زمان برای مصارف تحقیقاتی و بالینی مهم است. در این مطالعه از روشی ساده، بدون تیمار آنزیمی و در مدت زمان کوتاه برای جداسازی این سلول‌ها از ژله وارتون استفاده گردید. </strong><strong></strong><strong></strong></p><p align="right"> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> در یک مطالعه تجربی، بند ناف هنگام زایمان جمع‌آوری و رگ‌های آن جدا گردید. قطعات بافت ژله وارتون در بافر </strong><strong>PBS </strong><strong>قرار داده شده و به مدت 2 ساعت با دستگاه همزن بر روی هم ساییده شدند. پس از دور انداختن قطعات، سوسپانسیون باقیمانده سانتریفوژ شده و در محیط </strong><strong>DMEM-LG </strong><strong>حاوی 10% سرم </strong><strong>FBS </strong><strong>به مدت 5 روزکشت داده شد. سلول‌های مزانشیمی چسبیده به ظرف، از نظر وجود مارکرهای سطحی مزانشیمی مورد بررسی قرار گرفتند. برای اثبات ماهیت مزانشیمی، از تمایز به استخوان، غضروف و چربی استفاده شد. </strong></p><p align="right"> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> 5 روز پس از کشت اولیه، جمعیت خالصی از سلول‌های مزانشیمی ظاهر شدند. زمان دو برابر شدگی جمعیت سلولی در پاساژهای دوم(6 </strong><strong>± </strong><strong>31 ساعت) و سوم (15 </strong><strong>± </strong><strong>58 ساعت) از دیگر پاساژها کمتر بود. این سلول‌ها مارکرهای مزانشیمی را بیان کرده، از نظر بیان مارکرهای خونی و آنتی‌ژن لوکوسیت انسانی منفی بودند و توانایی تمایز به هر سه رده استخوان، غضروف و چربی را نیز داشتند. </strong></p><p align="right"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="right"> <strong> این مطالعه نشان می‌دهد که با استفاده از این روش غیر آنزیمی، امکان تخلیص سلول‌های مزانشیمی از ژله وارتون با صرف حداقل زمان و هزینه وجود دارد. </strong></p><p align="right"> <strong><i> </i></strong> </p></strong> <p>  <strong>Abstract</strong> </p><p> <i><strong>Background and Objectives</strong></i></p><p> The isolation of mesenchymal stem cells (MSCs) from the Wharton jelly (WJ) without degradation of cellular surface receptors and with the protection of cellular function, proliferation, and viability is important for research and clinical applications. In this study we have established a simple and rapid protocol without enzymatic treatment taking less time for MSCs from WJ to be isolated. </p><p>  </p><p> <i><strong>Materials and Methods</strong></i></p><p> Human umbilical cords were collected after full-term deliveries and transported to the laboratory in sterile phosphate-buffered saline (PBS). After the removal of cords vessels, the WJ sectioned were transferred into PBS and put on a shaker for 2 hours. The cord segments were discarded and the suspension was centrifuged and cultured in DMEM-LG supplemented with 10% FBS for 5 days. The plastic adherent cells were investigated for surface markers. Adipogenic, osteogenic, and chondrogenic differentiations were performed to investigate the mesenchymal nature.</p><p> <i><strong> </strong></i></p><p> <i><strong>Results</strong></i></p><p> After 5 days, purified populations of spindle-shape mesenchymal stem cell appeared and the cells were then expanded until they reached subconfluence. The cell population doubling time at third (31 ± 6h) and fourth (58 ± 15h ) passages was lower than other passages. The expanded cells were positive for CD 90, CD105, CD73, and CD44 , and negative for CD34/45, CD133, and HLA-DR surface markers. WJ-MSCs showed the potential of the multilineage cell differentiation into adipogenic, osteogenic, and chondrogenic phenotypes. </p><p>  </p><p> <i><strong>Conclusions</strong></i></p><p> This study indicates that this non-enzymatic protocol can result in the efficient isolation of MSCs from Wharton jelly with less time taken. The expanded cells expressed characteristic markers and presented typical functional properties of MSCs such as the differentiation capacities. </p><p> <i><strong> </strong></i></p><p>  </p> کلمات کلیدی : سلول‌های بنیادی مزانشیمی, بند ناف, ژله وارتون Key words : Mesenchymal Stem Cells, umbilicla cord, Wharton Jelly 143 152 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-776-1&slc_lang=fa&sid=1 B. Beiki بهاره بیکی bahar_beigy58715@yahoo.com 9100319475328460012608 9100319475328460012608 Yes تهران ـ ایران ـ صندوق پستی: 1665666311 M. Zarrabi مرتضی ضرابی 9100319475328460012609 9100319475328460012609 No تهران ـ ایران M. Radmanesh مریم رادمنش 9100319475328460012610 9100319475328460012610 No تهران ـ ایران