fa مهار تکثیر سلول‌های NB4 به طور وابسته به زمان تحت تاثیر مهارکننده غیر نوکلئوتیدی تلومراز از طریق کاهش رونویسی زیر واحد کاتالیتیک هماتولوژي Hematology پژوهشي Research چکیده سابقه و هدف به دلیل فعالیت تلومراز در تکثیر نامحدود اکثر سلول‌های سرطانی از جمله بدخیمی‌های خونی مانند لوسمی پرومیلوسیتیکی حاد(APL)، مهار تلومراز روش مناسبی جهت درمان می‌باشد. در این مطالعه به بررسی اثر BIBR1532 ، مهارکننده غیرنوکلئوزیدیکی، بر روی مهار تکثیر سلولی و بیان ژن hTERT که به عنوان جزء اصلی در فعالیت تلومراز نقش دارد، پرداختیم. مواد و روش‌ها در یک مطالعه تجربی، به منظور بررسی اثر BIBR1532 ، سلول‌ها در حضور غلظت‌های مختلفی از دارو کشت داده شدند و آزمون‌هایTrypan blue exclusion assay ، BrdU cell proliferation assayو Quantitative real-time PCR جهت بررسی اثر دارو بر درصد زنده‌مانی، تکثیر سلولی و بیان mRNA ژن hTERT در زمان‌های متفاوت صورت گرفت. یافته‌ها BIBR1532 قادر به کاهش درصد زنده‌مانی و مهار تکثیر سلول‌ها می‌باشد. تیمار سلول‌ها با BIBR1532 در غلظت‌های 10، 30، 60 و 90 میکرومولار پس از طی 24، 48 و 72 ساعت به صورت وابسته به دوز و زمان منجر به کاهش میزان ساخت DNA سلول‌ها گردید. علاوه بر این، نتایج نشان می‌دهد که داروی BIBR1532 همراه با افزایش غلظت دارو و زمان تیمار سلول‌ها به طور قابل توجهی منجر به کاهش میزان mRNA ژن hTERT می‌گردد. نتیجه گیری با توجه به طول تلومر کوتاه و فعالیت بالای آنزیم تلومراز در بیماران APL و هم‌چنین اثر بخشی داروی B‏IBR1532 در القای اثر آنتی پرولیفراتیو در رده سلولی NB4 ، می‌توان درمان‌های مبتنی بر استراتژی آنتی‌تلومرازی را به عنوان راه‌کار درمانی مناسب در بیماران APL مد نظر قرار داد. Abstract Background and Objectives Since stimulated telomerase activity provides nearly all of human malignancies including acute promyelocytic leukemia (APL) with unlimited proliferative potential, targeting telomerase seems to be an effective approach in cancer treatment. In this regard, BIBR1532, a small-molecule inhibitor of telomerase, has been shown to increase the therapeutic window of current chemotherapeutic regimens. This study was aimed to investigate the effects of BIBR1532 on cell proliferation as well as transcriptional alteration of hTERT (the catalytic subunit of telomerase). Materials and Methods NB4 leukemic cells were treated with various concentrations of BIBR1532 and succeeding trypan blue exclusion assay, BrdU cell proliferation assay, and quantitative real-time PCR were applied to investigate cell viability index, cell proliferation and time-dependent alteration of hTERT mRNA levels. Results BIBR1532 decreased cell viability index and exerted an antiproliferative effect against NB4 leukemic cells we found that exposing cells with BIBR1532 at 30, 60 and 90 μM for 72 h inhibited DNA synthesis rate by 24, 45 and 70%, respectively. Furthermore, transcriptional suppression of hTERT was found upon NB4 treatment by BIBR1532 in a time- and dose-dependent manner. Conclusions Based on the short telomere length and high terlomerase activity in APL as well as antiproliferative effect of BIBR1532 against NB4 cells, anti-telomerase-based therapy might be regarded as a successful strategy in APL therapy. کلمات کلیدی: لوسمی پرومیلوسیتی حاد, BIBR1532 , تلومراز Key words: Acute Promyelocytic Leukemia, BIBR1532, Telomerase 335 346 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-707-1&slc_lang=fa&sid=1 D. Bashash داود بشاش 910031947532846009249 910031947532846009249 No استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی S.H. Ghaffari سید حمیداله غفاری shghaffari@tums.ac.ir 910031947532846009250 910031947532846009250 Yes دانشیار مرکز تحقیقات خـون، انکولوژی و پیونـد سلول‌های بنیادی بیمارستان شریعتی و دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران M. Kazerani مریم کازرانی 910031947532846009251 910031947532846009251 No دانشگاه علوم پزشکی تهران K. Hazaveh کبریا هزاوه 910031947532846009252 910031947532846009252 No استاد مرکز تحقیقات خون، انکولوژی و پیوند سلول‌های بنیادی بیمارستان شریعتی و دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تهران K. Alimoghaddam کامران علی مقدم 910031947532846009253 910031947532846009253 No استاد مرکز تحقیقات خون، انکولوژی و پیوند سلول‌های بنیادی بیمارستان شریعتی و دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی‌ تهران ‌ـ تهران ـ ایران A. Ghavamzadeh اردشیر قوام زاده 910031947532846009254 910031947532846009254 No استاد مرکز تحقیقات خون، انکولوژی و پیوند سلول‌های بنیادی بیمارستان شریعتی و دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی‌ تهران ‌ـ تهران ـ ایران