fa توانایی تمایز سلول CD133+ خون بند ناف به سلول‌های ترشح‌کننده انسولین سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p align="right">  چکید ه </p><p align="right"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="right"> <strong> تولید سلول‌های اندوکرینی و جزایر انسولین‌ساز، از جمله اهداف درمان دیابت می‌باشد. مشخص شده است که سلول‌های </strong><strong>CD133⁺ </strong><strong>خون بند ناف قادر به بیان فاکتورهای رونویسی جنینی هم چون <i>4-</i> </strong><strong><i>SSEA </i></strong><strong>و <i>4</i> </strong><strong><i>OCT </i></strong><strong>هستند و لذا می‌توانند کاندید مناسبی برای درمان دیابت محسوب شوند. در این مطالعه سلول‌های </strong><strong>CD133⁺ </strong><strong>خون بند ناف به منظور تمایز به سلول‌های ترشح‌کننده انسولین مورد بررسی قرار گرفتند. </strong></p><p align="right"> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. سلول‌های </strong><strong>CD133⁺ </strong><strong>خون بند ناف با استفاده از روش </strong><strong>MACS </strong><strong>جدا شدند و در محیط کشت تمایزی(حاوی </strong><strong>DMEM/F12 </strong><strong>، </strong><strong>Nicotinamid </strong><strong>، </strong><strong>bFGF </strong><strong>، </strong><strong>N2 supplement B27 </strong><strong>) به مدت 9 روز قرار گرفتند. از روش ایمونوسیتوشیمی، برای بررسی بیان پروتئین‌های انسولین و پپتید- </strong><strong>C </strong><strong>، از </strong><strong>RT-PCR </strong><strong>برای بررسی بیان ژن‌های انسولین، گلوکاگون، 1 </strong><strong><i>PDX </i></strong><strong>و <i>1/6</i> </strong><strong><i>NKX </i></strong><strong>و از الایزا برای تعیین عملکرد سلول‌های تمایز یافته استفاده شد. </strong></p><p align="right"> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p align="right"> <strong> سلول‌های </strong><strong>CD133⁺ </strong><strong>مشتق از خون بند ناف در انتهای مرحله تمایزی، پروتئین انسولین و پپتید- </strong><strong>C </strong><strong>را بیان کردند. سلول‌های تمایز یافته، قادر به بیان ژن‌های <i>1/6</i> </strong><strong><i>NKX </i></strong><strong>، <i>1</i> </strong><strong><i>PDX </i></strong><strong>، انسولین و گلوکاگون نبودند و هم چنین توانایی پاسخ به تیمارهای مختلف گلوکز(5 و 27 میلی مولار) را نداشتند. </strong></p><p align="right"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="right"> <strong> سلول‌های </strong><strong>CD 133⁺ </strong><strong>قادر به تمایز به سلول‌های انسولین‌ساز در محیط آزمایشگاه می‌باشند اما توانایی لازم برای ترشح انسولین را نداشته و نیازمند سیگنال‌های مناسب از محیط زنده هستند. </strong></p><p align="right">   </p> <p>  <strong></strong></p><p>  <strong>Abstract</strong> </p><p> <i><strong>Background and Objectives</strong></i></p><p> The production of a sufficient number of pancreatic endocrine cells that function similarly to primary islets is one of the methods in treatment of diabetes. The CD133⁺ cells derived from cord blood (UCB-CD133) express some embryo specific markers such as SSEA-4 and OCT4 and so it can be a candidate for differentiation into insulin secreting cells. Therefore, here we attempt to determine the differentiation potential of UCB-CD133⁺ cells into insulin secreting cells <i>in vitro</i>.</p><p>  </p><p> <i><strong>Materials and Methods</strong></i></p><p>  UCB-CD133+ cells were isolated by MACS and differentiated into insulin secreting cells using the medium containing DMEM/F12, bFGF, Nicotinamid, and supplement B27 N2 for 9 days. The expression of insulin and c-peptide protein was detected by immonocytochemistry. The expression of insulin, Nkx6.1, Pdx1, and Glocagon genes was analyzed by RT-PCR ELISA was performed to analysis the function of differentiated cells in different glucose concentrations (5 and 27 mM). </p><p>  </p><p> <i><strong>Results</strong></i></p><p> Our results determined that UCB-CD133⁺ cells expressed insulin and c-peptide at protein level after 9 days of culture. However, the insulin, Nkx6.1, Pdx1, and Glocagon genes were not detected in differentiated cells and they could not respond to different concentrations of glucose. </p><p>  </p><p> <i><strong>Conclusions</strong></i></p><p> We suggested that UCB-CD133⁺ cells can differentiate into insulin secreting cells <i>in vitro</i> however, they are not functional and need to receive more signals <i>in vivo</i>. </p><p>  </p><p> </p> کلمات کلیدی : خون بند ناف, سلول‌های ترشح‌کننده انسولین, دیابت قندی تیپ I Key words: Umbilical Cord Blood, Insulin-Secreting Cells, Diabetes Mellitus , Type 1 53 64 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-283&slc_lang=fa&sid=1 F. Sahraneshin فاضل صحرانشین 910031947532846009486 910031947532846009486 No پژوهشکده زیست‌شناسی و فناوری سلول‌های بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان M. Ebrahimi مرضیه ابراهیمی mebrahimi@royaninstitute.org 910031947532846009487 910031947532846009487 Yes پژوهشکده زیست‌شناسی و فناوری سلول‌های بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان T. Zandiyh طاهره زندیه 910031947532846009488 910031947532846009488 No پژوهشکده زیست‌شناسی و فناوری سلول‌های بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی M. Mohammad منیره محمد 910031947532846009489 910031947532846009489 No پژوهشگاه رویان N. Aghdami ناصر اقدمی 910031947532846009490 910031947532846009490 No پژوهشگاه رویان H. Baharvand حسین بهاروند 910031947532846009491 910031947532846009491 No پژوهشکده زیست‌شناسی و فناوری سلول‌های بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان