fa تهیه ماده حد واسط مناسب برای تولید ایمونوگلوبولین تزریق وریدی از پلاسمای انسانی عمومى General پژوهشي Research <p>  چکیده<strong></strong> </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> پلاسمای انسان ماده‌ای‌حیاتی و منحصر به فرد است که حاوی پروتئین‌های مهم نظیر آلبومین، ایمونوگلوبولین، فاکتورهای انعقادی و غیره می‌باشد و مصارف دارویی دارد. فرآیند تخلیص ایمونوگلوبولین از پلاسما به روش اصلی پالایش با اتانل کوهن انجام می‌شود و محصول پایه </strong><strong>، </strong><strong>فرکشن </strong><strong>II </strong><strong>می‌باشد. جهت دستیابی به فرکشن </strong><strong>II </strong><strong>با شرایط مناسب برای استفاده به عنوان ماده اولیه در خالص‌سازی ایمونوگلوبولین تزریق وریدی، از روش تغییر یافته کوهن استفاده گردید. هدف از تهیه این ماده حد واسط، استفاده از آن برای مراحل بعدی تخلیص و ویروس‌زدایی جهت تولید ایمونوگلوبولین تزریق وریدی بوده ‌است. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی </strong><strong>(experimental) </strong><strong>بود. به منظور تولید خمیر فرکشن </strong><strong>II </strong><strong></strong><strong>، </strong><strong>پروتئین‌های مختلف پلاسما با استفاده از اتانل در غلظت‌های متفاوت و در شرایط کنترل شده همراه با تنظیم دما، </strong><strong>pH </strong><strong>و قدرت یونی رسوب داده شد. در طی مراحل مختلف </strong><strong>، </strong><strong>فرآیند پالایش نمونه‌های تولید شده به منظور ارزیابی فرآیند تولید مورد آزمایش قرار گرفت و نتایج حاصل از هر مرحله تولید با یکدیگر و نیز با پلاسما به عنوان ماده اولیه مقایسه گردید. </strong></p><p> <strong><i> یافته ها </i></strong></p><p> <strong> نتایج به دست آمده حاکی از بازده بالا ( </strong><strong>gr/kg plasma </strong><strong></strong><strong>2/5 ) و خلوص مناسب (بالای 90 درصد) فرکشن </strong><strong></strong><strong>II </strong><strong>مطابق استاندارد فارماکوپه به دست آمده بود به نحوی که سایر پروتئین‌های ضروری پلاسما که می‌تواند برای تهیه دیگر فرآورده‌های پلاسمایی مـورد استفـاده قرار گیرند نیز در شرایط مطلوب حفظ شدند. فرکشن </strong><strong>II </strong><strong>به دست آمده از نظر مقدار فعال کننده پری‌کالیکرین مطابق استاندارد فارماکوپه بود. در طی چند سری کاری انجام شده </strong><strong>، </strong><strong>ساختار پروتئین تکرار پذیری خوبی را نشان داد که با استانداردهای استفاده شده نیز مطابقت داشت. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong><strong><i></i></strong></p><strong><br clear="all" ></strong><p> <strong> فرکشن </strong><strong>II </strong><strong>به دست آمده یک ماده حد واسط مناسب برای تولید ایمونوگلوبولین تزریق وریدی می باشد که مقدار تجمعات و همچنین میزان فعال کننده پری کالیکرین آن در حد ناچیز است. از آن‌جایی که ساختار محصول به دست آمده در حد مطلوب است می‌توان از این روش برای تهیه فرکشن </strong><strong>II </strong><strong>در مقیاس نیمه صنعتی و حتی صنعتی استفاده نمود. </strong></p><strong><i>کلمات کلیدی : </i>ایمونوگلوبولین تزریق وریدی ، پالایش به روش کوهن، ساختار مولکولی </strong> <p> <strong>Abstract </strong></p><p> <i> <strong></strong></i></p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i> Background and Objectives </i></strong><i></i></p><p>  Human plasma is a valuable and unique material containing vital proteins such as albumin, immunoglobulin, and coagulation factors which have pharmaceutical applications. The most current process for purification of immunoglobulin is the Cohn fractionation procedure using ethanol. The basic material for production of immunoglobulin in this procedure is fraction II. In the present study, Cohn fractionation was modified appropriately in order to achieve fraction II with a quality suitable for production of intravenous immunoglobulin. </p><p> <strong> </strong></p><p> <strong><i> Materials and Methods </i></strong><i></i></p><p>  Various plasma proteins were precipitated using varying concentrations of ethanol under controlled physiochemical conditions such as temperature , pH and ionic strength. The fractionation products as well as the resulting fraction II were tested and analyzed. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i> Results </i></strong></p><p>  The results demonstrate that the modified procedure used can result in a pure fraction II with high yield . The procedure was also suitable for all other plasma proteins. The purified fraction II contained acceptable PKA levels according to specifications of pharmacopoeia. The protein structure was also within normal limits. The repeatability of the modified procedure reported was acceptable. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i> Conclusions </i></strong></p><p>  The fraction II obtained in the modified Cohn procedure was a suitable intermediate product to be used in production of intravenous immunoglobulin . The PKA levels as well as the protein aggregation were minimal , and the quality of fraction II was standard . The results showed that the present modified Cohn procedure can be easily scaled up to industrial and semi-industrial levels. The resulting fraction II can be used as an intermediate in production of IVIg. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i> Key words: </i></strong>Intravenous immunoglobulin, Cohn fraction, Molecular conformation </p> ,ایمونوگلوبولین تزریق وریدی,پالایش به روش کوهن,ساختار مولکولی Intravenous immunoglobulin, Cohn fraction, Molecular conformation 101 110 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-70&slc_lang=fa&sid=1 A Aghaie افسانه آقایی 9100319475328460010784 9100319475328460010784 No A.A Pourfathollah دکتر علی‌اکبر پورفتح‌اله Pourfa@modares.ac.ir 9100319475328460010785 9100319475328460010785 Yes S.Z Bathaie سیده زهرا بطحایی 9100319475328460010786 9100319475328460010786 No S.M Moazzeni دکتر سید محمد مؤذنی 9100319475328460010787 9100319475328460010787 No H Khorsand Mohamad Pour هاشم خرسند محمدپور 9100319475328460010788 9100319475328460010788 No H Rezvan دکتر حوری رضوان 9100319475328460010789 9100319475328460010789 No S Banazadeh سودابه بنازاده 9100319475328460010790 9100319475328460010790 No B Adibi بهزاد ادیبی مطلق 9100319475328460010791 9100319475328460010791 No M.K Mosavi دکتر سید کامران موسوی حسینی 9100319475328460010792 9100319475328460010792 No M.A Jalili دکتر محمد علی جلیلی 9100319475328460010793 9100319475328460010793 No