fa ارزیابی روش‌های تولید آنتی بادی علیه گلبول‌های قرمز گوسفند جهت به کارگیری در سنجش فعالیت سیستم کمپلمان عمومى General پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> در ارزیابی فعالیت سیستم کمپلمان و پی‌بردن به نقصان احتمالی در عملکرد این سیستم </strong><strong>، </strong><strong>غالباً از روش </strong><strong>CH50 </strong><strong>استفاده می‌شود . در این روش گلبول‌های قرمز گوسفند با آنتی‌بادی اختصاصی پوشانیده شده و قابلیت سیستم کمپلمان در تکمیل لیز این سلول‌ها </strong><strong>، </strong><strong>مورد ارزیابی قرار می‌گیرد . </strong></p><p> <strong> در این مطالعه </strong><strong>، </strong><strong>به‌دلیل نیاز به آنتی‌بادی اختصاصی گلبول‌های قرمز گوسفند </strong><strong>(SRBC) </strong><strong>برای انجام آزمایش </strong><strong>CH50 </strong><strong>، اقدام به تولید آنتی بادی پلی کلونال ویژه </strong><strong></strong><strong>SRBC </strong><strong>در حیوان خرگوش گردید و آنتی بادی‌های تولیدشده آمبوسپتور به روش‌های مختلف مورد ارزیابی قرار گرفتند. </strong><strong></strong></p><p> <strong> </strong><strong><i>مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> این مطالعه از نوع تجربی </strong><strong>(experimental) </strong><strong>بود . برای انجام این پژوهش </strong><strong>، </strong><strong>تزریق گلبول کامل گوسفند یا آنتی‌ژن‌های غشایی آن با چند الگوی متفاوت به حیوان خرگوش صورت گرفت . آنتی بادی به دست آمده </strong><strong>، </strong><strong>با استفاده از سرم پولد نرمال به عنوان منبع کمپلمان فعال (مربوط به حداقل 15 نفر از اهدا کنندگان خون) در روش </strong><strong>CH50 </strong><strong>بررسی و در نهایت مقدار جذب نوری </strong><strong></strong><strong>(OD) </strong><strong>مربوط به میزان لیزگلبول‌ها در روش‌های مختلف با یکدیگر مقایسه شد. در نهایت آنالیز داده‌ها و مقایسه میانگین مقادیر </strong><strong>OD541 </strong><strong><sub /></strong><strong>در آزمایش </strong><strong>CH50 </strong><strong>با استفاده از آزمون </strong><strong>(One-Sample) t </strong><strong>انجام گرفت . </strong><strong></strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong><strong><i /></strong></p><p> <strong> تزریق گلبول کامل گوسفند به حیوان خرگوش به دفعات متعدد با هر یک از الگوهای تزریقی و به طریق داخل صفاقی و یا وریدی </strong><strong>، </strong><strong>منجر به تشکیل تیتـر مطلوبـی از آنتی بادی در این حیوان شده، اما سبب مرگ زودهنگام آن‌ به علت شوک آنافیلاکتیک نیز می‌گردد. در حالی که استفاده از سلول‌های سونیکه شده و یا حرارت دیده در این راستا </strong><strong>، </strong><strong>منجر به تولید آنتی سرم هایـی می گردد که ضمن داشتن ویژگی مطلوب، بقای حیوان‌های مورد نظر را تهدید نمی‌نماید . </strong><strong></strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> تولید آنتی بادی پلی‌کلونال بر علیه </strong><strong>SRBC </strong><strong>با استفاده از روش‌های مختلف </strong><strong>، </strong><strong>میسر می باشد . با این حال این مطالعه نشان می‌دهد </strong><strong>، </strong><strong>چنانچه آنتی‌ژن‌های غشایی گلبول قرمز با روش سونیکاسیون و یا آنتی ژن‌های مقاوم به حرارت گلبول قرمز </strong><strong>(Forssman) </strong><strong>با به کارگیری حرارت 103 درجه سانتی‌گراد به دست آمده و جهت تزریق‌ و مصون سازی حیوان مورد استفاده قرار گیرند </strong><strong>، </strong><strong>می‌توان بدون به مخاطره انداختن بقای حیوان، اقدام به تولید آنتی سرم با تیتر مطلوب نمود. </strong><strong></strong></p><p> <strong><i> کلمات </i></strong><strong><i>کلیدی </i></strong><strong><i /></strong><strong><i>: </i></strong><strong></strong><strong>آنتی‌ژن فورسمن، </strong><strong>CH50 </strong><strong>، </strong><strong></strong><strong>SRBC </strong></p> <p> <strong> Abstract </strong></p><i><i>Background and Objectives </i><p> CH50 method is used for the evaluation of complement system. In this method, sheep red blood cells (SRBCs) are sensitized with specific antibodies. Then, the capability of the complement system in the completion of the hemolytic reaction is assessed. In this study because of need for anti-SRBC antibody in CH50 test, it was produced in rabbit. This antibody is called “Amboceptor”.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In order to perform this study, SRBCs or their membrane antigens were injected into rabbits with different methods. Produced antibodies were analyzed in CH50 method using human pooled sera (derived from at least 15 blood donors). Finally the optical densities (ODs) related to the lysis of SRBCs were compared. It is obvious that the amount of OD is correlated with the efficiency of the antibody. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Intravenous or intraperitoneal injections of SRBCs repeatedly result in the formation of high titer antibodies, but the rapid death of the animals due to the anaphylactic shock occurs. While the usage of sonicated or heat-treated antigens of SRBCs in the immunization leads to the formation of antibodies with high specificity and titer it does not threaten the life of the animals.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong><i></i></p><p> Production of anti-SRBC antibodies is applicable using different methods. This study shows that the use of the membrane or heat-stable antigens of SRBCs, which are prepared using sonication and heating (103ºC) respectively, has some advantages. These antigens are safe for rabbits and the titer of the antibody is high enough to be used in CH50 test.</p><p> <strong> </strong></p><p> <strong><i>Key words:</i> </strong>Forssman Antigen, CH50, SRBC </p></i> ,آنتی‌ژن فورسمن,CH50,SRBC Forssman Antigen, CH50, SRBC 45 51 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-65&slc_lang=fa&sid=1 F Yari دکتر فاطمه یاری fateme yari@ yahoo.com 9100319475328460010768 9100319475328460010768 Yes L Hamidpour-Zare لطیف حمیدپور زارع 9100319475328460010769 9100319475328460010769 No