fa افزایش جمعیت سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف CD34+ با استفاده از افزایش بیان ژن HOXB4 در طی کشت ازدیادی این سلول‌ها سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف، یکی از ارزشمندترین منابع سلول‌های بنیادی خونساز به حساب می‌آیند، اما متاسفانه تعداد ناکافی‌ این سلول‌ها، بهره‌گیری از آن‌ها را در موارد پیوند مغز استخوان بزرگسالان با مشکل مواجه می‌سازد. یکی از رویکردهای موجود برای غلبه بر این مشکل، ازدیاد این سلول‌ها در محیط آزمایشگاه است. مطالعه‌های فراوان در مدل‌های موشی، حاکی از اثرات قوی پروتئین </strong><strong>HOXB4 </strong><strong>در القای فعالیت خود تکثیری سلول‌های بنیادی خونساز موش است. در این مطالعه سعی شده است تا با افزایش بیان این پروتئین در سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف، بر مشکل تعداد اندک سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف غلبه شود. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه بنیادی ـ کاربردی، سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف به وسیله ویروس‌های لنتی حاوی ژن </strong><strong>HOXB4 </strong><strong>، ترانس داکت شدند. سپس این سلول‌ها به مدت 8 روز در محیط آزمایشگاه کشت داده شدند، در طول دوران کشت این سلول‌ها، بیان ژن </strong><strong>HOXB4 </strong><strong>توسط </strong><strong>RT-PCR </strong><strong>مورد ارزیابی قرار گرفت و پس از آن با بهره‌گیری از آزمون فلوسیتومتری به بررسی مارکر سطحی </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>که یک شاخص سلول‌های بنیادی خونساز است پرداخته شد. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> بررسی‌های فنوتیپی در سلول‌های بنیادی خونساز، نشان‌دهنده تاثیر فزونی بیان ژن </strong><strong>HOXB4 </strong><strong>در افزایش جمعیت سلول‌های بنیادی خونساز </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>، طی ازدیاد این سلول‌ها در محیط آزمایشگاه بود. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> افزایش بیان ژن </strong><strong>HOXB4 </strong><strong>در سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف، موجب افزایش قابل توجه تعداد سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>می‌شود و بنابراین می‌تواند در غلبه بر تعداد کم سلول‌های بنیادی خونساز بند ناف در رویکردهای درمانی بسیار مؤثر باشد. </strong></p><p> <strong><i> </i></strong>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Nowadays, cord blood hematopoietic stem cells (HSCs) are well known as a very valuable source of cells for cell therapy purposes. But unfortunately, the insufficient number of them is a limiting factor for their employment in adult bone marrow transplantation. Cord blood HSCs expansion is an approach for alleviating this problem. It has been shown by several studies during <i>in vivo</i> investigations in mouse models that HOXB4 is one of the most effective tools for inducing HSCs self-renewal and thus HSCs expansion. In this study, we tried to enhance self-renewal of cord blood HSCs by HOXB4 overexpression during <i>ex vivo</i> expansion period. </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this fundamental-applied research, HSCs were transducted by lentiviral vectors containing HOXB4. HSCs were then cultured in IMDM medium containing 10% FBS and early acting cytokines (Flt3L, SCF, Tpo) for 8 days. Thereafter, we evaluated HOXB4 expression by RT-PCR. The CD34+ subpopulation were also examined by flow cytometry. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> We detected a high level of HOXB4 gene expression in HOXB4 transducted HSCs relative to the control. We observed that HOXB4 over-expression dramatically increases CD34+ subpopulation of HSCs. The increase in the number of CD34+ HSCs is an indicator of HSCs self-renewal during <i>ex vivo</i> expansion period.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> All in all, in this survey we observed that HOXB4 overexpression markedly increases CD34+ HSCs during <i>ex vivo</i> expansion period. This approach can be very effective for overcoming the limited number of cord blood HSCs for cell therapy purposes. </p><p> <strong><i> </i></strong></p> کلمات کلیدی: سلول‌های بنیادی خونساز، پروتئین HOXB4 انسانی، لنتی‌ویروس Key words: Hematopoietic Stem Cells, HOXB4 protein، human, Lentivirus 239 250 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-250-5&slc_lang=fa&sid=1 M. Allahbakhshian Farsani مهدی اله‌بخشیان فارسانی 910031947532846007450 910031947532846007450 No دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس ـ تهران ـ ایران M. Forozandeh Moghadam مهدی فروزنده مقدم foroz@modares.ac.ir 910031947532846007451 910031947532846007451 Yes دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس N. Amirizadeh ناصر امیری‌زاده 910031947532846007452 910031947532846007452 No استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران M. Soleimani مسعود سلیمانی 910031947532846007453 910031947532846007453 No دانشیار دانشکده پزشکی دانشگاه تربیت مدرس ـ تهران ـ ایران A.A. Pourfatholah علی‌اکبر پورفتح‌اله 910031947532846007454 910031947532846007454 No استاد دانشکده پزشکی دانشگاه تربیت مدرس ـ تهران ـ ایران