fa اثر سلول‌های بنیادی خونساز انسانی بر تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی به سلول‌های استئوبلاست سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> ارتباط سلول‌های بنیادی خونساز( </strong><strong>HSCs </strong><strong>) با سلول‌های موجود در ریز محیط مغز استخوان(نیچ) به ویژه سلول‌های استئوبلاست، جهت حفظ فعالیت‌های آن‌ها بسیار ضروری می‌باشد. البته مدارکی که به صورت مستقیـم </strong><strong>HSC </strong><strong>ها را در توسعه نیچ دخیل کنند، اندک هستند ولی در صورت اثبات، روشن می‌شود که چرا نقص‌های هماتوپوئتیک بسیاری با تغییر در ساختار استخوانی همراه بوده و لذا اهداف درمانی هماتوپوئتیک و اهداف درمانی جدیدی را برای تنظیم ساختار و تشکیل استخوان فراهم می‌آورند. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه تجربی، سلول‌های بنیادی مزانشیمال( </strong><strong>MSC </strong><strong>) مغز استخوان را در محیط </strong><strong>Stem Span </strong><strong>به مدت 3 روز تحت همکشتی با </strong><strong>HSC </strong><strong>های خون بند ناف قرار دادیم. سپس </strong><strong>MSC </strong><strong>ها با استفاده از کیت استئوژنزیس به استئوبلاست تمایز داده شدند و در روزهای مختلف تمایزی مورد ارزیابی قرار گرفتند که شامل بیان ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین در روزهای 4 و 6 تمایزی( </strong><strong>RT-PCR </strong><strong>)، بیان مارکر </strong><strong>CD90 </strong><strong>(فلوسیتومتری)، بیان آنزیم آلکالین فسفاتاز(رنگ‌آمیزی آلکالین فسفاتاز) و مینرالیزه شدن(رنگ‌آمیزی آلیزارین رد) در روز دهم تمایزی بود. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> نتایج، بیان زود هنگام ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین را در همکشتی </strong><strong>MSC </strong><strong>با </strong><strong>HSC </strong><strong>نمایان ساخت. این یافته‌ها از نقش </strong><strong>HSC </strong><strong>ها در القای تمایز استئوبلاستی </strong><strong>MSC </strong><strong>ها حمایت می‌نمایند. هم چنین کاهش بیان </strong><strong>CD90 </strong><strong>و افزایش فعالیت آلکالین فسفاتاز و مینرالیزاسیون سلولی، این نتایج را تایید نمودند. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> نتایج این تحقیق در ارتباط با سلول‌های بنیادی انسانی در </strong><strong><i>ex vivo </i></strong><strong>، اثبات نمود که </strong><strong>HSC </strong><strong>ها قادرند سبب افزایش تمایز </strong><strong>MSC </strong><strong>ها به استئوبلاست شده و بدین وسیله در تشکیل نیچ خود سهیم باشند. </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> The correlation between hematopoietic stem cells (HSCs) and the cells comprising the niche especially osteoblast cells is critical for maintaining stem cell activities. Yet little evidence supports the concept that HSCs regulate development of the niche. If true, it may explain why many hematopoietic defects are accompanied by changes in the osseous architecture and provide new therapeutic targets for regulating bone formation.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this exprimental study, we cocultured bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) with umbilical cord blood HSCs in stem span media for 3 days. Then MSCs were differentiated to osteoblast cells by using osteogenesis kit. Evaluation of osteogenic differentiation of MSCs in different days came out to be: expression of osteopontin and osteocalsin (RT-PCR on days 4 and 6), expression of CD90 (flow cytometry on day 6), expression of alkaline phosphatase enzyme (alkaline phosphatase staining) and mineralization of MSCs (alizarin red staining on day 10). </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Our results showed early expression of osteopontin and osteocalsin in HSCs coculture with MSCs. These findings support the role of HSCs in induction of osteoblastic differentiation of MSCs. Decrease in the expression of CD90, higher activation in cell alkaline phosphatase enzyme, and mineralization confirmed the results.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> In the field of human stem cells, our <i>ex vivo</i> findings demonstrated that HSCs can enhance differentiation of MSCs toward osteoblast cells thereby participating in formation of their niche. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p>   </p> کلمات کلیدی: سلول‌های بنیادی خونساز, سلول‌های بنیادی مزانشیمی, همکشتی, استخوان‌سازی, استئوبلاست‌ها Key words : Hematopoietic Stem Cells, Mesenchymal Stem Cell, Coculture, Osteogenesis, Osteoblasts 226 238 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-265&slc_lang=fa&sid=1 R. Fadaei راضیه فدایی 910031947532846009614 910031947532846009614 No مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران N. Amirizadeh ناصر امیری زاده n.amirizadeh@ibto.ir 910031947532846009615 910031947532846009615 Yes استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون M. Nikougoftar مهین نیکوگفتار ظریف 910031947532846009616 910031947532846009616 No مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران M. Habibi Roudkenar مهریار حبیبی رودکنار 910031947532846009617 910031947532846009617 No دانشیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران