fa اثر سلول‌های بنیادی مزانشیمی استرومال کشت داده شده در داربست بر روی تکثیر سلول‌های CD34+ خون بند ناف سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> پیوند سلول‌های بنیادی طی دهه‌های اخیر، به موفقیت‌های درمانی بالایی رسیده اما از محدودیت‌های استفاده از این منبع در بزرگسالان، تعداد کم سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>می‌باشد. هدف از این تحقیق، بررسی تاثیر سلول‌های مزانشیمی بر میزان تکثیر سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>خون بند ناف بود. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه تجربی، سلول‌های چسبنده مزانشیمی از سلول‌های تک هسته‌ای مغز استخوان جدا شدند. سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>موجود در خون بند ناف، با استفاده از آنتی‌بادی‌های نشاندار شده با </strong><strong>Microbead </strong><strong>جدا شده و بر روی سلول‌های مزانشیمی کشت داده شدند. تاثیر سلول‌های مزانشیمی در شرایط دو بعدی, سه بعدی و شرایط بدون استفاده از سلول‌های مزانشیمی در تکثیر و حفظ پتانسیل ابتدایی سلول‌ها با شمارش سلولی, تعیین درصد سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>به روش فلوسیتومتری و روش سنجش کلونی مورد مقایسه قرار گرفت. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> تکثیر سلول‌ها در سه محیط و در زمان‌های مختلف مورد بررسی قرار گرفت. در محیط فاقد سلول‌های مزانشیمی، میانگین میزان چند برابر شدن </strong><strong>TNC </strong><strong>ها، </strong><strong>CFC </strong><strong>ها و سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>در روز دهم به ترتیب 6 ± 87, 8 ± 84 و 3 ± 11، در محیط دارای سلول‌های استرومال مزانشیمی در شرایط دو بعدی به ترتیب، 8 ± 103, 9 ± 111 و 3 ± 14 و در محیط دارای مزانشیم در شرایط سه بعدی به ترتیب، 10 ± 127, 14 ±170 و 4± 20 بود. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> نتایج نشان می‌دهد که می‌توان از سلول‌های مزانشیمی به خصوص در شرایط 3 بعدی، جهت افزایش تعداد سلول‌های بنیادی خونساز و حفظ پتانسیل کلونی‌زایی آن‌ها به طور طولانی مدت در محیط کشت استفاده کرد. </strong></p><p> <strong><i> </i></strong>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Stem cell transplantation has achieved high success for treatment but the use of this source has some limitation. Cord blood transplantation is clinically limited by its low progenitor cell contents such as CD34⁺. The aim of this study was to evaluate the effect of mesenchymal stem cells (MSCs) on replication of CD34⁺ in cord blood.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study MSCs were isolated and cultured from BM mononuclear cells. MSCs were used for co-culture in two systems of 2D and 3D cultures. After isolation, umbilical cord blood CD34⁺ cells were cultured in two different systems. The level of expansion in these systems was evaluated by cell count, analysis of CD34⁺ expression by flowcytometery, and CFU assay .</p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Expansion of cord blood HSCs was evaluated at three different culture systems at three different times (day3, day 7 and day 10): the medium with cytokine, 2D medium with cytokine + MSCs, and 3D medium with cytokine + MSCs on scaffold. The fold increase of TNC, CFU, and CD34⁺ cells at day 10 for the former medium was 87 ± 6, 84 ± 8, 11 ± 3, for the second 103 ± 8, 111 ± 9, 14 ± 3, and for the latter 127 ± 10, 170 ± 14, 20 ± 4, respectively. The highest expansion was observed in the 3D co-culture with MSCs after 10 days. </p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> The results have demonstrated that the co-culture of CB HSCs with mesenchymal cells could increase the rate of expansion especially in the 3D system.<strong> </strong></p><p>  </p> کلمات کلیدی: سلول‌های بنیادی مزانشیمی, خون بند ناف, آنتی‌ژن CD34 , سلول‌های بنیادی Key words : Mesenchymal Stem Cells, Umbilical Cord Blood, CD34 Antigen, Stem Cells 177 185 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-262&slc_lang=fa&sid=1 R. Ranjbaran رضا رنجبران 910031947532846009586 910031947532846009586 No مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران H. Abolghasemi حسن ابوالقاسمی 910031947532846009587 910031947532846009587 No استاد دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی و بقیه‌اله ـ تهران ـ ایران N. Nasiri ناهید نصیری 910031947532846009588 910031947532846009588 No دانشگاه علوم پزشکی تهران ـ ایران A. Oodi آرزو اودی 910031947532846009589 910031947532846009589 No مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـتهران ـ ایران M. Nikougoftar مهین نیکوگفتار 910031947532846009590 910031947532846009590 No مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران N. Amirizadeh ناصر امیری‌زاده n.amirizadeh@ibto.ir 910031947532846009591 910031947532846009591 Yes استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران