fa به کارگیری روش NASBA Real-time با استفاده از Molecular Beaconبرای تشخیص ویروس HCV بيماري هاي عفوني Infectious disease پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> هپاتیت </strong><strong>C </strong><strong>، شایع‌ترین بیماری ویروسی قابل انتقال از طریق خون، در میان معتادان تزریقی می‌باشد. در مطالعه حاضر یک روش تکثیر اسید نوکلئیک هم‌دما </strong><strong>(NASBA) </strong><strong>در ترکیب با روش </strong><strong>Real-time </strong><strong>بر اساس پروب </strong><strong>Molecular Beacon </strong><strong>برای ردیابی ویروس </strong><strong>HCV </strong><strong>مورد استفاده قرار گرفت. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه تجربی، طراحی جفت آغازگر و پروب برای ناحیه حفاظت شده </strong><strong>5'NCR </strong><strong>ویروس </strong><strong>HCV </strong><strong>به طول </strong><strong>bp </strong><strong>241 با نرم‌افزارهای اختصاصی انجام شد. در مقایسه با نمونه استاندارد، حساسیت تشخیص حضور </strong><strong>RNA </strong><strong>ویروس تا </strong><strong>copies/ml </strong><strong>500 در 100% موارد قابل آشکارسازی بود. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> در مطالعه انجام شده، تنها یک نمونه مثبت سرولوژیک از نظر </strong><strong>HCV </strong><strong>با روش </strong><strong>NASBA </strong><strong>منفی شد، لذا حساسیت کلینیکی واکنش 6/96% بود. هم چنین توالی‌یابی در پایگاه </strong><strong>NCBI Nucleotide Blast </strong><strong>نشان داد اختصاصیت آنالیتیکی روش 100% بوده و با ژنوم هیچ یک از ویروس ها یا توالی ژنوم انسان تداخلی نداشته است. بررسی 10 نمونه منفی از نظر سرولوژی با روش جدید طراحی شده، نشان‌دهنده اختصاصیت کلینیکی 100% بود. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> در نهایت، روش </strong><strong>NASBA Real-time </strong><strong>به علت داشتن طبیعت هم‌دما، سرعت و تکثیر اختصاصی </strong><strong>RNA </strong><strong>، روش بسیار مناسبی بوده و می‌تواند کاربرد وسیعی در تشخیص سریع ویروس </strong><strong>HCV </strong><strong>در نمونه های پلاسما داشته باشد. </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Hepatitis C is the most common viral disease among intravenous drug users transmitted mainly through blood transfusion. In this study, we used an isothermal nucleic acid sequence-based amplification (NASBA) in combination with a molecular beacon probe-based real-time assay for detection of HCV. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study, the conserved 5’NCR region with the length of 241 bp was used for probe and primers design. In comparison with the standard, RNA virus detection sensitivity of the method was 100 percent for up to 500 copies/ ml. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> No serological positive sample was detected with this assay the clinical sensitivity of reaction was 96.6%. NCBI Nucleotide Blast showed 100% analytical specificity and no cross was observed with viruses or human genome. Investigation of 10 serological negative samples showed the clinical specificity to be 100%.</p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> In summary, due to its isothermal nature, its speed, and its use for RNA specific amplification, NASBA real-time assay will have broad applications for the rapid detection of HCV in plasma samples.<strong> </strong></p><p> <strong> </strong></p><p>   </p> کلمات کلیدی : NASBA , Real-Time PCR , ویروس‌های هپاتیت C Key words : NASBA, Real-Time PCR, Hepatitis C Viruses 19 26 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-250-3&slc_lang=fa&sid=1 M. Paryan مهدی پریان 910031947532846009521 910031947532846009521 No M. Fourozandeh Moghadam مهدی فروزنده مقدم foroz@modares.ac.ir 910031947532846009522 910031947532846009522 Yes دانشیار دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس S. Mohammadi-Yeganeh سمیرا محمدی یگانه 910031947532846009523 910031947532846009523 No