fa روند تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی انسانی به سلول‌های استئوبلاست و بررسی میزان بیان ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p> <strong> روند تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی انسانی به سلول‌های استئوبلاست </strong></p><p> <strong> و بررسی میزان بیان ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین </strong></p><p>  </p><p> <strong><i> مهری اشکی¹، ناصر امیری‌زاده²، محمد علی جلیلی³، نسیم حیاتی رودباری⁴،‌ محمد حسین محمدی⁵، مریم امانی⁵ </i></strong></p><p> <strong> </strong></p><p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> بیان ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین در طی تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی به سلول‌های استئوبلاست، دچار تغییراتی می‌شوند، هدف از این مطالعه، دست یافتن به راه‌کاری بهتر در جهت تمایز سریع‌تر این سلول‌ها به استئوبلاست بود. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه تجربی، سلول‌های تک هسته‌ای مغز استخون جدا شده و در محیط کشت </strong><strong></strong><strong>DMEM-LG </strong><strong>و 10% </strong><strong>FBS </strong><strong>کشت داده شدند. در طی روزهای معین، </strong><strong>RNA </strong><strong>سلول‌های در حال تمایز استخراج شد. در مرحله بعد، ساخت </strong><strong>cDNA </strong><strong>ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین توسط آغازگرهای اختصاصی انجام شد. سلول‌های مزانشیمی بر روی داربست سه بعدی تری کلسیم فسفات کشت داده شدند و میزان تمایز به سلول‌های استئوبلاستی با بررسی فعالیت آلکالین فسفاتاز مورد مطالعه قرار گرفت. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> در طی روند این تمایز، بیان دو ژن استئوپونتین و استئوکلسین طی نظمی تغییر نمود و حداکثر بیان استئوپونتین در روز ششم و استئوکلسین در روز هفتم و هشتم تمایز بود. تمایز استئوژنیک سلول‌های مزانشیمی با رنگ‌آمیزی رسوبات معدنی با آلیزارین رد و افزایش بیان آلکالین فسفاتاز تایید شد. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> بررسی نتایج فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز، بیانگر تمایز بهتر سلول‌های بنیادی مزانشیمی در داربست سه بعدی تری کلسیم فسفات نسبت به محیط دو بعدی است. بیان ژن‌های استئوپونتین و استئوکلسین </strong><strong></strong><strong>در روند این تمایز نقش داشته و افزایش بیان آن‌ها می‌تواند راه‌کاری جهت القای تمایز استئوبلاستی در این سلول‌ها باشد. </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> During differentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) into various cells, the expression of a variety of genes undergoes some changes in this study we decided to investigate the expression rate of some genes like osteopontin (OPN) and osteocalcin (OCN) during this process in order to find a better and faster way for these cells to be differentiated into osteoblasts . </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Material and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study, the mononuclear cells of bone marrow were separated and then cultured in DMEM-LG culture media with 10% FBS. During some definite days, the RNA of differentiating cells was extracted. Then, the effective genes in osteogenesis like OPN and OCN were amplified by speciefic primers. The mesenchymal cells were cultured on 3D calcium phosphate scaffolds, and finally the activity rate of the alkaline phosphatase was examined . </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> This research has demonstrated that in the process of differentiation, the expression of the two genes of OPN and OCN changed orderly with the maximum expression of OPN in the 6th day and the maximum expression of OCN in the 7th and 8th days of differentiation. The osteogenic differentiation of MSCs was not confirmed by the coloration of mineral sediments. The activity rate of alkaline phosphatase revealed the preference of 3D calcium phosphate scaffold to 2D environment in this differentiation. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Conclusion</i></strong> </p><p> The calcium phosphate scaffold positively affects the differentiation process. The expression of OPN and OCN genes changes during differentiation and can be used as away to a better and faster differentiation of these cells into osteoblast.</p><p> <strong><i> </i></strong></p><p>  </p> سلول‌های بنیادی مزانشیمی, استئوپونتین, استئوکلسین, استئوبلاست Mesenchymal Stem Cells, Osteopontin, Osteocalcin, Osteoblast 251 264 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-244&slc_lang=fa&sid=1 M. Ashki مهری اشکی 910031947532846009762 910031947532846009762 No N. Amirizadeh ناصر امیری‌زاده n.amirizadeh@ibto.ir 910031947532846009763 910031947532846009763 Yes استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون M.A. Jalili محمدعلی جلیلی 910031947532846009764 910031947532846009764 No N. Hayati Roudbari نسیم حیاتی رودباری 910031947532846009765 910031947532846009765 No M.H. Mohammadi محمدحسین محمدی 910031947532846009766 910031947532846009766 No M. Amani مریم امانی 910031947532846009767 910031947532846009767 No