fa استفاده از روش فلوسایتومتری در تعیین میزان HbF جنینی متعاقب خونریزی جنینی ـ مادری در محیط آزمایشگاهی با دو روش دو رنگی HbF و تک رنگی آنتی‌ژن D ايمونولوژي Imunology پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> فلوسایتومتری روشی مناسب، سریع، دقیق و قابل اعتماد جهت ارزیابی میزان خونریزی‌های جنینی ـ مادری ( </strong><strong>FMH </strong><strong>) می‌باشد. هدف از این مطالعه، بررسی میزان </strong><strong>FMH </strong><strong>با استفاده از شاخص آنتی‌ژنیک </strong><strong>RhD </strong><strong>وهموگلوبین جنینی( </strong><strong>HbF </strong><strong>) به روش فلوسایتومتری است. </strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در یک مطالعه تجربی، 34 نمونه خون بند ناف نوزاد </strong><strong>Rh </strong><strong>مثبت با خون فرد بالغ </strong><strong>RhD </strong><strong>منفی به صورت‌رقیق‌سازی سریالی در 6 رقت(125/0، 25/0، 5/0، 1، 5 و 10 درصد) که بیانگر 9 </strong><strong>/ </strong><strong>99 درصد احتمال </strong><strong>FMH </strong><strong>بود، شبیه‌سازی شد و به روش فلوسایتومتری دو رنگی </strong><strong>HbF </strong><strong>‏‏و کربونیک انهیدراز </strong><strong>(CA) </strong><strong>وتک رنگی </strong><strong>RhD </strong><strong>مورد مطالعه قرار گرفت. از آزمون‌های آماری </strong><strong>T test </strong><strong>، آنالیز واریانس و رگرسیون </strong><strong></strong><strong>جهت تحلیل نتایج استفاده شد. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> همبستگی قابل قبولی بین نتایج </strong><strong>HbF </strong><strong>و </strong><strong>RhD </strong><strong>به روش فلوسایتومتری مشاهده شد(897/0 </strong><strong>r= </strong><strong>). میزان خونریزی محاسبه شده توسط هر دو پارامتر </strong><strong>HbF </strong><strong>و </strong><strong>RhD </strong><strong>در مقایسه با مقادیر خونریزی مورد انتظار، نشان داد که آنالیز دو رنگی </strong><strong>HbF </strong><strong>و </strong><strong>CA </strong><strong>ازحساسیت بالاتری نسبت به آنالیز تک رنگی </strong><strong>RhD </strong><strong>در تعیین مقادیر اندک خونریزی برخوردار می‌باشد. نتایج روش </strong><strong>RhD </strong><strong>با وجود همبستگی بالا(984/0 </strong><strong>r= </strong><strong>)، در تعیین مقادیر پایین </strong><strong>FMH </strong><strong>در مقایسه با میزان خونریزی به دست آمده از روش </strong><strong>HbF/CA </strong><strong>، افزایش کاذبی را نشان ‌داد ولی توانایی آن درتعیین مقادیر بالاتر خونریزی در مقایسه با </strong><strong>HbF/CA </strong><strong>قابل توجه بود. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه‌گیری </i></strong></p><p> <strong> استفاده از مونوکلونال آنتی‌بادی‌های اختصاصی در روش فلوسایتومتری، امکان ارزیابی دقیق میزان خونریزی و به تبع آن تعیین دقیق دوز ایمونوگلبولین </strong><strong>Rh </strong><strong>جهت محافظت مادران از آلو ایمونیزاسیون بر علیه آنتی ژن </strong><strong>D </strong><strong>را ایجاد می‌کند. </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> The quantification of fetal cells in the maternal circulation is an important goal to determine the amount of anti-D for prevention of active immunization of a D-negative mother giving birth to a D-positive baby. The aim of this study was to evaluate two flowcytometric staining technics for determination of fetal erythrocytes in maternal blood and to recognize the best.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study, 34 adult D-negative blood samples were spiked with six serial dilutions of D-positive cord blood (0.125, 0.25, 0.5, 1, 5 and 10%) which was representative of 99.9% of the clinical fetomaternal hemorrhage (FMH) they were stained for flow cytometric analysis. The Fetal Cell Count Kit was used for HbF dual staining and monoclonal anti-D for RhD single staining.</p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> A comparison between RhD and HbF percentages and FMH volume in spiking samples was performed. A significant correlation between two different parameters in flowcytometric percentages was observed (anti-HbF versus anti-D, r= 0.897, p<0.05). FMH volume was calculated and a significant correlation between expected and observed FMHs in RhD and HbF was obtained (p<0.05, r=0.984, r=0.874). The anti-HbF flowcytometric dual staining allowed better distinction between fetal RBCs (HbF+,CA-), F cells (HbF+,CA+), and adult RBCs (HbF-,CA+). Although Rh-D showed better correlation, but higher values with the RhD in suspensions lower than 10% were noted.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Data showed that anti-HbF labeling is significantly much more accurate than RhD labeling. Quantification of FMH using these two techniques described allows precise dosage of RhD immunoglobulin for protection against anti-D allo-immunization.</p><p>  </p> خونریزی, انتقال خون جنینی ـ مادری, فلوسایتومتری Hemorrhage, Fetomaternal Transfusion, Flow Cytometry 104 114 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-43-1&slc_lang=fa&sid=1 F. Khoshnaghsh فهیمه خوش‌نقش 910031947532846009850 910031947532846009850 No M. Kheirandish مریم خیراندیش kheira_m2001@yahoo.co.uk 910031947532846009851 910031947532846009851 Yes استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران M.R. Deyhim محمدرضا دیهیم 910031947532846009852 910031947532846009852 No