fa بررسی مولکولی آلفا تالاسمی از نظر جهش‌های حذفی و غیر حذفی در حاملین مشکوک ایرانی هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> زوج‌های بسیاری در وضعیت نامشخص از نظر داشتن نقص در ژن‌های تالاسمی وجود دارند که تعیین قطعی این نواقص برای برنامه غربالگری قبل از ازدواج و نیز برای کمک به مشاوره ژنتیک ضروری می‌باشد. در این بررسی افراد مشکوک به آلفا تالاسمی، از نظر جهش‌های مختلف حذفی و غیر حذفی مورد بررسی مولکولی قرار گرفتند. </strong><strong></strong></p><p> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p> <strong> در این مطالعه توصیفی، نمونه‌های مشکوک به آلفا تالاسمی با </strong><strong>fL </strong><strong>80 </strong><strong>MCV< </strong><strong>، </strong><strong>pg </strong><strong>27 </strong><strong>MCH< </strong><strong>، به همراه سطح آهن و </strong><strong>HbA₂ </strong><strong>طبیعی از بین مراجعین به انستیتو پاستور ایران به طور تصادفی جدا و مورد بررسی قرار گرفتند. جهش‌های حذفی با روش </strong><strong>Multiplex gap-PCR </strong><strong>و جهش‌های غیر حذفی با روش </strong><strong>ARMS-PCR </strong><strong>و تعیین توالی( </strong><strong>Sequencing </strong><strong>) بررسی شدند. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> از میان 140 نمونه، در 126 نفر(90%) جهش در خوشه ژن آلفا گلوبین تعیین شد. در بررسی جهش‌های حذفی، وجود حداقل یک حذف در 99 نفر(71/70%) از افراد نشان داده شد. در بررسی جهش‌های غیر حذفی، حداقل یک جهش نقطه‌ای در 27 نفر(28/19%) از نمونه‌های فاقد جهش حذفی دیده شد. در مجموع 9 جهش مختلف در این افراد تعیین شد. شایع‌ترین جهش، حذف ^7/3 </strong><strong>α </strong><strong></strong><strong>– </strong><strong>در 100 آلل(71/35%) در مجموع 280 کروموزوم مورد بررسی و به دنبال آن جهش غیر حذفی </strong><strong>α </strong><strong>^5nt</strong><strong>- در 25 آلل(93/8%) بود. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> در این مطالعه به دلیل استفاده از روش تعیین توالی، جهش‌های نقطه‌ای در خوشه ژنی آلفا گلوبین فراوانی بیشتری را نسبت به سایر تحقیقات انجام شده توسط دیگر محققین کشور نشان می‌دهد. یافته‌های این مطالعه می‌تواند در برنامه کشوری مهار تالاسمی بسیار مفید باشد. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>آلفا تالاسمی، جهش‌، </strong><strong>PCR </strong><strong></strong><strong>، ایران </strong><strong></strong></p><p>  </p> <p>  <strong>Abstract </strong><strong></strong></p><p>  <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p>  There is a large number of couples who are considered potential carriers of alpha or beta-thalassemia. The exact determination of gene defect for thalassemia carriers is essential for premarital screening genetic counseling. In this study, we conducted a molecular study of those suspected of carrying alpha-thalassemia mutated genes in order to detect potential deletional and non-deletional mutations in the alpha globin gene cluster.</p><p>  </p><p>  <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p>  In this study, those suspected of having mutation in alpha-globin gene cluster with MCV < 80 fl, MCH < 27 pg, normal serum iron, and HbA₂ were selected from those referred to Pasteur Institute of Iran. Four common deletional mutations and non-deletional mutations were studied using multiplex gap-PCR, ARMS-PCR, and direct sequencing. </p><p>  </p><p>  <strong><i>Results</i></strong></p><p>  One hundred and forty samples with above criteria entered the study with 126 (90%) cases showing at least one mutation. Study of 4 common deletional mutations using multiplex gap-PCR revealed at least one deletion in 99 (70.71%) cases. Non-deletional mutations were found using ARMS-PCR or direct sequencing in 27 (19.28%) cases. Nine different mutations were found in the samples with –α^3.7 being the most common deletion in 100 (35.71%) alleles out of 280 studied chromosomes followed by -α5^nt in 25 (8.93%) alleles as the next most common.</p><p>  </p><p>  <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p>  We used direct sequencing to characterize more suspected carriers of alpha thalassemia. However, using other methods like real-time PCR and multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) for gene dosage study of alpha-globin gene cluster could help find other non-common deletions.</p><p>  <strong></strong></p><p>  <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong><strong></strong></p><p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> There is a large number of couples who are considered potential carriers of alpha or beta-thalassemia. The exact determination of gene defect for thalassemia carriers is essential for premarital screening genetic counseling. In this study, we conducted a molecular study of those suspected of carrying alpha-thalassemia mutated genes in order to detect potential deletional and non-deletional mutations in the alpha globin gene cluster.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this study, those suspected of having mutation in alpha-globin gene cluster with MCV < 80 fl, MCH < 27 pg, normal serum iron, and HbA₂ were selected from those referred to Pasteur Institute of Iran. Four common deletional mutations and non-deletional mutations were studied using multiplex gap-PCR, ARMS-PCR, and direct sequencing. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> One hundred and forty samples with above criteria entered the study with 126 (90%) cases showing at least one mutation. Study of 4 common deletional mutations using multiplex gap-PCR revealed at least one deletion in 99 (70.71%) cases. Non-deletional mutations were found using ARMS-PCR or direct sequencing in 27 (19.28%) cases. Nine different mutations were found in the samples with –α^3.7 being the most common deletion in 100 (35.71%) alleles out of 280 studied chromosomes followed by -α5^nt in 25 (8.93%) alleles as the next most common.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> We used direct sequencing to characterize more suspected carriers of alpha thalassemia. However, using other methods like real-time PCR and multiplex ligation-dependent probe amplification (MLPA) for gene dosage study of alpha-globin gene cluster could help find other non-common deletions.</p><p> <strong> </strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong><strong></strong>alpha-Thalassemia, mutation, PCR, Iran</p><p>  </p> آلفا تالاسمی, جهش‌, PCR , ایران alpha-Thalassemia, mutation, PCR, Iran 70 77 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-133-2&slc_lang=fa&sid=1 B. Zarbakhsh بهناز زربخش 910031947532846009980 910031947532846009980 No E. Farshadi الهام فرشادی 910031947532846009981 910031947532846009981 No A. Ariani Kashani آرین آریانی کاشانی 910031947532846009982 910031947532846009982 No M. Karimipoor مرتضی کریمی‌پور 910031947532846009983 910031947532846009983 No A. Azarkeivan آزیتا آذرکیوان 910031947532846009984 910031947532846009984 No R. Habibi Pourfatideh راضیه حبیبی پورفتیده 910031947532846009985 910031947532846009985 No M.S. Fallah محمد صادق فلاح 910031947532846009986 910031947532846009986 No F. Maryami فرشته مریمی 910031947532846009987 910031947532846009987 No A.R. kordafshari علیرضا کردافشاری 910031947532846009988 910031947532846009988 No Z. Kaeini Moghadam زهرا کائینی مقدم 910031947532846009989 910031947532846009989 No H. Bagherian حمیده باقریان 910031947532846009990 910031947532846009990 No S. Zeinali سیروس زینلی zeinali@kawsar.ir 910031947532846009991 910031947532846009991 Yes