fa آنالیز مولکولی ژن فاکتور IX انعقادی در بیماران هموفیلی B خراسان رضوی هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <p align="justify">  چکید ه </p><p align="justify"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="justify"> <strong> هموفیلی </strong><strong>B </strong><strong>یا بیماری کریسمس، یک اختلال خونریزی‌دهنده وابسته به جنس مغلوب است که به علت کاهش مقدار یا نقص عملکرد فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong>انعقادی ایجاد می‌شود. بیماری ناشی از جهش‌های مختلف در ژن فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong>است. هدف از این تحقیق، آنالیز مولکولی ژن فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong>جهت ارزیابی طیف جهش‌ها و یافتن ارتباط بین ژنوتیپ و فنوتیپ در بیماران هموفیلی </strong><strong>B </strong><strong>خراسان رضوی بود. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> مواد و روش‌ها </i></strong></p><p align="justify"> <strong> در یک مطالعه تجربی، به روش غیر تصادفی آسان 14 بیمار هموفیل </strong><strong>B </strong><strong>از خراسان رضوی بررسی شدند. </strong><strong>DNA </strong><strong>ژنومیک بیماران به وسیله روش </strong><strong>salting out </strong><strong>از خون محیطی استخراج گردید. </strong><strong>PCR </strong><strong>برای کلیه اگزون‌ها و نواحی مهم ژن فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong>بیماران انجام و بر روی محصولات </strong><strong>PCR </strong><strong>، آزمایش </strong><strong>SSCP </strong><strong>انجام شد. نمونه‌هایی که در </strong><strong>SSCP </strong><strong>، حرکت آن‌ها روی ژل اکریل‌آمید در مقایسه با کنترل نرمال متفاوت بود انتخاب و به روش ختم زنجیره، تعیین توالی شدند. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p align="justify"> <strong> از لحاظ توزیع انواع مختلف جهش، 2/69 درصد جهش‌ها از نوع بد معنی( </strong><strong>Missense </strong><strong>)، 1/23 در صد جهش‌ها از نوع بی‌معنی( </strong><strong>Nonsense </strong><strong>) و 7/7 درصد جهش‌ها از نوع </strong><strong></strong><strong>جایگذاری( </strong><strong>Insertion </strong><strong>) بودند که با نتایج موجود در بانک اطلاعاتی بیماران هموفیلی </strong><strong>B </strong><strong>مطابقت داشت. 2 مورد از جهش‌های به دست آمده جدید بودند و تاکنون در بانک اطلاعاتی هموفیلی </strong><strong>B </strong><strong>گزارش نشده بودند. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="justify"> <strong> این مطالعه، ناهمگونی قابل توجه جهش‌های ژن فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong>را در جمعیت شمال شرق کشور تایید می‌کند. از اطلاعات به دست آمده، در ردیابی ناقلین مؤنث در خانواده‌های این بیماران و تشخیص قبل از تولد می‌توان استفاده کرد. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>هموفیلی </strong><strong>B </strong><strong>، </strong><strong>SSCP </strong><strong>، موتاسیون، فاکتور </strong><strong>IX </strong><strong></strong></p><p align="justify">  </p> <p>  <strong></strong></p><p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Hemophilia B, Christmas disease, is an X-linked recessive bleeding disorder caused by the functional deficiency of blood coagulation factor IX (FIX). The disease is caused by heterogeneous mutations in the factor IX gene (factor IX). FIX is a vitamin K-dependent glycoprotein that plays a key role in the coagulation cascade. The aim of this study was to make molecular analysis of factor IX gene and evaluate genotype-phenotype correlation in 14 hemophilia B patients from Khorasan Razavi province.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> Fourteen unrelated hemophilia B patients were included in the study. The patients had high PTT, normal PT, low factor IX activity (less than 30%), and normal FVIII activity. After obtaining informed consent, genomic DNA was extracted from the peripheral blood leukocytes by standard methods. Polymerase chain reaction (PCR) and single strand conformation polymorphism (SSCP) were performed to obtain a full scan of all functionally important regions of the FIX gene. DNA sequencing was done on samples with a definite band shift in SSCP. In addition, Haplotypes were constructed using four markers (DdeI, TaqI, MnlI and HhaI).</p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> The sequencing results showed 9 missenes mutations, 3 stop codons, and 1 insertion. Two of the mutations not having been reported in the database so far were novel. Malmo polymorphism (Ala148Thr) was found in two patients. </p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> This study confirms the heterogeneity of factor IX gene mutations in northeast hemophilia B patients. The obtained data could be used both in tracking female carriers in families and in making decisions about prenatal diagnosis.</p><p> <strong>�</strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong>Hemophilia B, SSCP, Mutation, Factor IX </p><p>  </p> هموفیلی B , SSCP , موتاسیون, فاکتور IX Hemophilia B, SSCP, Mutation, Factor IX 17 26 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-212&slc_lang=fa&sid=1 N. Kh. Karimi نرگس خاتون کریمی 910031947532846009922 910031947532846009922 No L. Kokabee لیلا کوکبی 910031947532846009923 910031947532846009923 No Z. Badiee زهرا بدیعی 910031947532846009924 910031947532846009924 No M. Shahabi مجید شهابی 910031947532846009925 910031947532846009925 No S.A. Banihashem سید عبداله بنی هاشم 910031947532846009926 910031947532846009926 No S. Zeinali سیروس زینلی 910031947532846009927 910031947532846009927 No K. Parivar کاظم پریور 910031947532846009928 910031947532846009928 No M. Karimipoor مرتضی کریمی‌پور mortezakarimi@yahoo.com 910031947532846009929 910031947532846009929 Yes