fa تعیین ژنوتیپ گروه‌های خونی با روش مولکولی در بیماران مبتلا به تالاسمی مراجعه کننده به درمانگاه بزرگسالان تهران هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <p>&nbsp; چکید ه</p> <p>&nbsp;<strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p> <p>&nbsp;<strong> پس از مصرف خون، تعیین سرولوژیک گروه خونی گیرنده به علت جمعیت مختلط گلبول‌های قرمز مشکل می‌باشد. با توجه به اهمیت تعیین فنوتیپ صحیح گلبول‌های قرمز در بیماران وابسته به تزریق خون(نظیر بیماران تالاسمیک و کم خونی داسی شکل)، هدف این مطالعه راه‌اندازی روش مولکولی و سپس ارزیابی مقایسه‌ای با روش مولکولی هماگلوتیناسیون در تعیین گروه‌های خونی در بیماران تالاسمی دریافت کننده واحدهای متعدد بود. </strong></p> <p>&nbsp;<strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p> <p>&nbsp;<strong> مطالعه انجام شده از نوع تشخیصی بود. </strong><strong>DNA </strong><strong>از خون محیطی 20 فرد ظاهراًَ سالم فاقد سوابق خانوادگی تالاسمی و 44 بیمار شامل 35 بیمار مبتلا به تالاسمی ماژور(19 نفر با عارضه همولیتیک انتقال خون و 16 نفر فاقد این عارضه)، 8 نفر مبتلا به تالاسمی اینترمدیا(2 نفر با عارضه همولیتیک و 6 نفر فاقد عارضه همولیتیک) و 1 نفر مبتلا به تالاسمی سیکل سل با عارضه همولیتیک، جداسازی شد. آلل‌های </strong><strong>RHD / RHC / RHc / RHE / RHe / JKA / JKB / FYA / FYB / KELL1 / KELL2 </strong><strong>با آغازگرهای دست‌ساز به صورت موازی مورد بررسی قرار گرفتند. هم چنین بررسی فنوتیپی با روش هماگلوتیناسیون نیز بر روی نمونه خون محیطی انجام و با روش مولکولی مقایسه شدند. </strong></p> <p>&nbsp;<strong><i> یافته‌ها </i></strong></p> <p>&nbsp;<strong> تعیین فنوتیپ و ژنوتیپ در همه افراد کنترل مشابه بود. اما در مجموع 53 مورد ناسازگاری بین دو روش مولکولی و آگلوتیناسیون در 26 بیمار مشاهده شد که بیشترین ناسازگاری(19 مورد) در گروه خونی </strong><strong>Rh </strong><strong>و پس از آن در گروه‌های خونی دافی(15 مورد) و کید(15 مورد) بود. </strong></p> <p>&nbsp;<strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p> <p>&nbsp;<strong> در این تحقیق روش سرولوژی قادر به تعیین صحیح آنتی‌ژن‌های گروه خونی در بیماران تحت بررسی نبود ولی تعیین ژنوتیپ در تعیین گروه خون واقعی بیماران دریافت کننده واحدهای خون موفق بوده و می‌تواند به انتخاب گلبول‌های قرمز فاقد آنتی‌ژن‌هایی که هدف آلوایمونیزاسیون واقع شده‌اند، در تزریق‌های بعدی کمک نماید. حساسیت/اختصاصیت و ارزش‌های اخباری مثبت و منفی روش آگلوتیناسیون در مقایسه با روش مولکولی برای آنتی‌ژن </strong><strong>D </strong><strong>، نتایج نسبتاًَ خوبی حاصل نمود، شاید بدان علت که این آنتی‌ژن قبل از شروع تزریق خون به بیماران تعیین می‌شود و در صورت تزریق خون نیز این سازگاری رعایت می‌شود. لذا به نظر می‌رسد اتخاذ چنین تصمیمی در مورد تعیین گروه‌های فرعی در بدو شروع به تزریق خون حداقل برای زیر گروه‌های </strong><strong>Rh </strong><strong>و </strong><strong>Kell </strong><strong>، که بیشترین سهم را در ایجاد عوارض همولیتیک دارند، با توجه به هزینه بالاتر روش مولکولی، بسیار مقرون به صرفه باشد. هم چنین تعیین این آنتی‌ژن‌ها در تعداد محدودی از اهداکنندگان مستمر نیز می‌تواند به تعیین اهداکننده با گروه خونی مناسب برای این بیماران کمک ‌کننده باشد. </strong></p> <p>&nbsp;<strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong>تالاسمی، </strong><strong>PCR </strong><strong>، آنتی‌ژن‌های گروه‌ خونی </strong></p> <p>&nbsp;</p> <p>&nbsp;<strong> Abstract </strong></p> <p>&nbsp;<strong><i>Background and Objectives</i></strong></p> <p>&nbsp;Blood typing by serologic methods after transfusion has limitations due to presence of donor red cells in recipients. Accurate determination of red blood cells (RBCs) antigens is very important in multitransfused patients including beta-thalassemics and sickle cell anemics. So, the aim of this study was to evaluate DNA- based methods as supplement to the hemagglutination technique to determine the red blood cell (RBC) antigen profile of multitransfused patients with beta- thalassemia.</p> <p>&nbsp;</p> <p>&nbsp;<strong><i>Materials and Methods</i></strong></p> <p>&nbsp;DNA was extracted from peripheral blood of 20 apparently normal people and 44 patients including 35 with beta- thalassemia (out of whom 19 had clinical evidence of delayed hemolytic transfusion reaction) , 8 with thalassemia intermedia (out of whom 2 had hemolytic reaction), and one with sickle cell thalassemia. RHD/ RHC/ RHc/ RHE/ RHe/ JKA/ JKB/ FYA/ FYB/ KELL1/ KELL2 alleles were determined by PCR and were then compared with the hemagglutination method.</p> <p>&nbsp;</p> <p>&nbsp;<strong><i>Results</i></strong></p> <p>&nbsp;Phenotype and genotype results were the same in all controls. The phenotypes and genotypes of 53 blood antigens of 26 patients were incompatible. Most of the discrepancies (19 cases) occurred in the Rh system, and fifteen in the Duffy and Kidd systems.</p> <p>&nbsp;</p> <p>&nbsp;<strong><i>Conclusions</i></strong></p> <p>&nbsp;The results show that screening platelet concentrates for bacterial contamination is necessary for blood transfusion centers and hospital blood banks. Blood typing by serologic method was not accurate in this study but genotyping could determine true blood groups in multitransfused patients and help in selection of RBCs without alloimmunized antigens in future transfusion attempts. Specificity, sensitivity, positive and negative predictive values of hemagglutination method for RhD antigen had good values in comparison to the molecular method. This might be due to pre- transfusion determination of RhD for thalassemic patients so as to receive Rh- matched blood units. It seems pre-transfusion blood typing of Rh and Kell antigens, which are the cause of hemolytic reactions, in comparison to the molecular method could be cost effective. In addition, typing of Rh and Kell antigens in some regular blood donors could be helpdul for selecting antigen-negative RBCs for transfusion dependent patients</p> <p>&nbsp;<strong><i>�</i></strong></p> <p>&nbsp;<strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong>Thalassemia, Polymerase Chain Reaction, Blood group antigens</p> <p>&nbsp;</p> تالاسمی, PCR , آنتی‌ژن‌های گروه‌ خونی Thalassemia, Polymerase Chain Reaction, Blood group antigens 107 115 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-46-5&slc_lang=fa&sid=1 M. Shaiegan مژگان شایگان m.shaiegan@ibto.ir 9100319475328460025236 9100319475328460025236 Yes Sh. Samiee شهرام سمیعی 9100319475328460025237 9100319475328460025237 No A. Azarkeivan آزیتا آذرکیوان 9100319475328460025238 9100319475328460025238 No J. Daneils جف دانیلز 9100319475328460025239 9100319475328460025239 No P. Martin پیتر مارتین 9100319475328460025240 9100319475328460025240 No Z. Ataiee زهرا عطایی 9100319475328460025241 9100319475328460025241 No P. Lotfy پروین لطفی 9100319475328460025242 9100319475328460025242 No M. kavari مهناز کواری 9100319475328460025243 9100319475328460025243 No H. Lotfy حسین لطفی 9100319475328460025244 9100319475328460025244 No L. Kasraian لیلا کسراییان 9100319475328460025245 9100319475328460025245 No