fa ویژگی‌های سلول‌های تکثیر شده خون بند ناف در حضور ترکیبات مختلف سیتوکاینی سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> سلول‌های بنیادی خونساز در درمان بیماری‌های خونی، نارسایی‌های متابولیک و نقص‌های سیستم ایمنی موثرند. از آن جا که سلول‌های بنیادی خونساز در خون بند ناف قابلیت پیوند به فرد بالغ را ندارند، لذا دستیابی به روش‌هایی که با صرف هزینه کم به تکثیر سلول‌های بنیادی خون بند ناف بپردازند اهمیت دارد. در این مطالعه، پتانسیل تکثیر و تمایز سلول‌های تک‌هسته‌ای خون بند ناف( </strong><strong>MNC </strong><strong>) و نیز ویژگی‌های سلول‌های تولید شده در حضور ترکیبات مختلف سیتوکاینی مورد بررسی قرار گرفت. </strong></p><p> <strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده از نوع مداخله‌ای آزمایشگاهی بود. سلول‌های تک‌هسته‌ای( </strong><strong>MNC </strong><strong>) از خون بند ناف نوزادان با دوره کامل حاملگی که مادران آن‌ها به ظاهر سالم( </strong><strong>HBs Ag^- </strong><strong>، </strong><strong>anti-HCV^- </strong><strong>، </strong><strong>anti-HBC^- </strong><strong>و </strong><strong>anti-HIV^- </strong><strong>) و فاقد دیابت و یا فشار خون بارداری بودند، جدا شد و در مقادیر 10⁶ × 5/1 سلول در حجم 2 میلی‌لیتر محیط کشت </strong><strong>IMDM </strong><strong>حاوی 10% </strong><strong>FBS </strong><strong>و 5 نوع سیتوکاین </strong><strong>IL-3 </strong><strong>، </strong><strong>TPO </strong><strong>، </strong><strong>GM-CSF </strong><strong>، </strong><strong>SCF </strong><strong>، </strong><strong>Flt-3 </strong><strong>و در سه گروه </strong><strong>FSGT3 </strong><strong>، </strong><strong>FSGT </strong><strong>و </strong><strong>FST </strong><strong>کشت شدند. به منظور بررسی ویژگی‌ سلول‌های تکثیر شده، شمارش سلولی، ایمنوفنوتیپ سلول‌ها و قدرت کلنی‌زایی آن‌ها در گروه‌های مختلف و در روزهای 0، 7، 14 و 21 مورد ارزیابی قرار گرفت. برای مقایسه درون گروهی درهر گروه از آزمایش غیر پارامتریک ویلکوکسون و برای مقایسه بین گروهی از آزمایش غیر پارامتریک من‌ویتنی استفاده شد. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> نتایج این مطالعه نشان داد تمام ترکیبات سیتوکاینی مورد مطالعه قادر به تحریک تکثیر </strong><strong>MNC </strong><strong>در خون بند ناف به میزان 5 برابر می‌باشند. اما تنها ترکیب </strong><strong>Flt3L </strong><strong>، </strong><strong>SCF </strong><strong>و </strong><strong>TPO </strong><strong>قادر به تولید بیشتر سلول‌های تک هسته، سلول‌های </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>و سلول‌های </strong><strong>CD34⁺90⁺38^- </strong><strong>طی 14 روز کشت می‌گردد. هم چنین تمام ترکیبات به کار رفته سبب تولید پیش‌سازهای میلوئیدی در کشت‌های طولانی مدت می‌شوند. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> در این مطالعه با استفاده از </strong><strong>MNC </strong><strong>خون بند ناف و سه ترکیب سیتوکاینی </strong><strong>Flt3LT </strong><strong>، </strong><strong>SCF </strong><strong>و </strong><strong>TPO </strong><strong>، روش مقرون به صرفه‌ایی برای کشت سلول‌های بنیادی خون بند ناف بدون استفاده از فرآیندهای خالص‌سازی ارایه شده است که با افزایش تولید هم زمان سلول‌های تک هسته‌، سلول‌های بنیادی </strong><strong>CD34⁺90⁺38^- </strong><strong>، پیش‌سازهای </strong><strong>CD34⁺ </strong><strong>، پیش‌سازهای میلوئیدی </strong><strong>CD34⁺133⁺ </strong><strong>و کلونی‌های گرانولوسیتی منوسیتی همراه است. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>خون جنینی، سلول‌های بنیادی خونساز، سیتوکاین‌ها، اینترکولین ـ 3، فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت ماکروفاژی، </strong><strong>TPO </strong><strong>، </strong><strong>SCF </strong><strong></strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Hematopoietic stem cells (HSCs) transplantation has been used for treating hematological disorders, immunodeficiencies, metabolic disorders and auto immune disease. In clinical application, the number of HSCs infused proved to be the major prognostic factor for engraftment and survival however, cord blood transplantation is limited in adults cause of their low number of cells. Consequently, we evaluated the potential of cell expansion and differentiation of cord blood cells in presence of different combination of cytokines. </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this interventional experimental study, umblical cord blood mononuclear cells (UCB MNC) were taken from apparently healthy mothers without any historical sign of diabetes during their pregnancy. We quantified and characterized an <i>ex vivo</i> expansion capacity of umbilical cord blood mononuclear cells (UCB MNC) in IMDM supplemented with 10% fetal bovine serum and various combination of SCF, TPO, Flt-3, GM-CSF and IL-3 as FSG3 T, FS3T, and FST for 3 weeks. Immunophenotyping and colony forming assay were performed at day 0, 7, 14 and 21 to characterize expanded cells in different groups. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Total cell number was multiplied 5 times by all groups after 14 days of culture and the group with three cytokines of SCF, TPO, Flt-3 was shown to produce the highest percentage of hematopoitic stem cells and myeloid precursor cells among all groups during 2 weeks.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> In this study, we showed an economical method for the expansion of umbilical cord blood stem cells with usage of UCB MNC and combination of SCF, TPO, and Flt-3. </p><p> <strong><i>�</i></strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong>Fetal blood, Hematopoietic Stem Cell, Cytokines, Interlukin-3, Granulocyte-macrophage Colony, Stimulating factor</p><p>  </p> خون جنینی, سلول‌های بنیادی خونساز, سیتوکاین‌ها, اینترکولین ـ 3, فاکتور محرک کلنی گرانولوسیت ماکروفاژی, TPO , SCF Fetal blood, Hematopoietic Stem Cell, Cytokines, Interlukin-3, Granulocyte-macrophage Colony, Stimulating factor 95 105 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-195&slc_lang=fa&sid=1 B. Beiki بهاره بیکی 9100319475328460010225 9100319475328460010225 No M. Ebrahimi مرضیه ابراهیمی ebrahimi@royaninstitute.org 9100319475328460010226 9100319475328460010226 Yes