fa ارزیابی جهش JAK2 V617F در بیماران ایرانی مبتلا به نئوپلاسم‌های میلوپرولیفراتیو کلاسیک غیر CML ژنتيك Genetis پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> جهش سوماتیک نقطه‌ای در ژن پروتئین تیروزین کیناز </strong><strong>JAK2 </strong><strong>( </strong><strong>JAK2 V617F </strong><strong>) باعث جابجایی </strong><strong>G </strong><strong>با </strong><strong>T </strong><strong>در اگزون 12 ژن </strong><strong>JAK2 </strong><strong>می‌شود که منجر به فعالیت خودبخودی پروتئین </strong><strong>JAK2 </strong><strong>و انتقال پیام غیر وابسته به سیتوکاین می‌گردد و در نتیجه باعث تکثیر کلونال پیش‌سازهای خونساز در </strong><strong>MPNs </strong><strong>می‌شود. با توجه به این که تاکنون در ایران، هیچ گزارشی از جهش </strong><strong>JAK2 V617F </strong><strong>و اهمیت آن در تشخیص بیماران مبتلا به نئوپلاسم‌های میلوپرولیفراتیو ارایه نشده است، مطالعه حاضر به منظور تعیین این جهش انجام شد. </strong></p><p> <strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. در این مطالعه جهش </strong><strong>JAK2 </strong><strong>با روش نمونه‌گیری تصادفی ساده، در 100 بیمار با تشخیص جدید و یا در حال درمان مبتلا به بدخیمی‌های میلوپرولیفراتیو مورد ارزیابی قرار گرفت. گروه مورد مطالعه شامل بیماران مبتلا به پلی‌سیتمی ورا(44 نفر)، بیماران مبتلا به میلوفیبروز اولیه(31 نفر) و بیماران مبتلا به ترومبوسیتمی اولیه(25 نفر) بودند. برای تعیین جهش، ابتدا </strong><strong>DNA </strong><strong>ژنومیک از بافی‌کوت تهیه شده از خون محیطی استخراج شد و تعیین جهش به روش واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز با آلل اختصاصی( </strong><strong>Allele Specific PCR </strong><strong>) انجام شد. برای تایید نتایج، واکنش هضم آنزیمی( </strong><strong>RFLP </strong><strong>) به وسیله آنزیم محدودالاثر </strong><strong>BsaXI </strong><strong>صورت گرفت. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> 72%(83-61= 95% </strong><strong>CI: </strong><strong>) بیماران مبتلا به نئوپلاسم‌های میلوئیدی مورد بررسی، دارای جهش بودند. با استفاده از واکنـش زنجیره‌ای پلی‌مراز با آلل اختصاصی و واکنش هضم آنزیمی، جهش </strong><strong>JAK2 </strong><strong>در 89%(100-78 = 95% </strong><strong>CI: </strong><strong>) بیماران پلی‌سیتمی ورا، 61%(100-22= 95% </strong><strong>CI: </strong><strong>) بیماران میلوفیبــروز اولیـه و 56%(100-12= 95% </strong><strong>CI: </strong><strong>) بیماران ترومبوسیتمی اولیه وجود داشت. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> میزان جهش ژن </strong><strong>JAK2 </strong><strong>در گروه مطالعه، قابل مقایسه با نتایج گزارش شده قبلی می‌باشد. بنابراین می‌توان بر اساس معیارهای تشخیصی سازمان بهداشت جهانی از واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز با آلل اختصاصی برای شناسایی این جهش در بیماران ایرانی مشکوک به نئوپلاسم‌های میلوپرولیفراتیو </strong><strong>Bcr-Abl </strong><strong>منفی( </strong><strong>MPNs </strong><strong>) استفاده نمود. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>جهش </strong><strong>JAK2 </strong><strong>، پروتئین تیروزین کیناز، واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز، موتاسیون، نئوپلاسم‌ها </strong><strong></strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Somatic point mutation in JAK2 gene is characterized by G to T transversion at nucleotide 1849 in exon 12 in the JAK2 gene and results in autonomous activation of JAK2 protein. JAK2 mutation leads to independent cytokine signaling and clonal proliferation of hematopoietic cells in MPNs. Due to absence of any reports for JAK2 V617F mutation in Iranian MPNs patients and its important role in diagnosis, we decided to carry out this study. </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> In this experimental study, we evaluated JAK2 mutation in 100 MPNs patients with diagnosis of PV (n=44), PMF (n=31) and ET(n=25) by simple randomized sampling. After extraction of genomic DNA from whole blood buffy coat, detection of mutation was done using allele specific PCR. Agarose gel electrophoresis was used for observation of PCR products. For confirmation of results, PCR-RFLP using BsaXI was applied. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Using allele specific PCR and PCR-RFLP, frequency of JAK2 V617F mutation was evaluated to be 89%, 61%, and 56% in PV, PMF and ET, respectively.</p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Frequency of JAK2 mutation in our study is compatible with previous reports. According to WHO criteria, allele specific PCR can be applied for detection of JAK2 mutation in Iranian patients with diagnosis of MPNs. </p><p>  </p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong>JAK2, Protein Tyrosine Kinase, Polymerase Chain Reaction, Mutation, Neoplasms</p><p>  </p> جهش JAK2 , پروتئین تیروزین کیناز, واکنش زنجیره‌ای پلی‌مراز, موتاسیون, نئوپلاسم‌ها JAK2, Protein Tyrosine Kinase, Polymerase Chain Reaction, Mutation, Neoplasms 237 245 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-34-6&slc_lang=fa&sid=1 B. Poopak بهزاد پوپک bpoopak@yahoo.com 9100319475328460010348 9100319475328460010348 Yes H. Mirmongereh هاجر میرمنگره 9100319475328460010349 9100319475328460010349 No A.A. Pourfathollah علی‌اکبر پورفتح‌اله 9100319475328460010350 9100319475328460010350 No R.A. Sharifian رمضانعلی شریفیان 9100319475328460010351 9100319475328460010351 No H. Rezvani حمید رضوانی 9100319475328460010352 9100319475328460010352 No F. Elahi فاضل الهی 9100319475328460010353 9100319475328460010353 No M. Keyhani منوچهر کیهانی 9100319475328460010354 9100319475328460010354 No M. Ghedyani مجتبی قدیانی 9100319475328460010355 9100319475328460010355 No S. Kaviani سعید کاویانی 9100319475328460010356 9100319475328460010356 No K. Farahani کبری فراهانی 9100319475328460010357 9100319475328460010357 No A. Yousefian ابوالفضل یوسفیان 9100319475328460010358 9100319475328460010358 No M.A. Jahangir pour محمد علی جهانگیرپور 9100319475328460010359 9100319475328460010359 No M.A. Shamsian محمد علی شمسیان 9100319475328460010360 9100319475328460010360 No