fa بررسی فراوانی آنتی‌ژن‌های سازگاری بافتی اصلی یک و دو (HLA-I,II) در قوم بومی همدان و مقایسه روش مولکولی و سرولوژیک در آنتی‌ژن‌های کلاس دو (لکوس DR) عمومى General پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p>  <strong><i>سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> ‌ هدف از این مطالعه تعیین فراوانی آنتی‌ژن‌های HLA در جمعیت بومی شهر همدان می‌باشد که علاوه بر استفاده در مطالعات مردم‌شناسی و بیماری‌های مرتبط با HLA ، کاربرد وسیعی در بانک پیوند اعضا دارد. به‌منظور راه‌اندازی روش DNA-based HLA Typing در سازمان انتقال خون تهران، با انجام آزمون PCR به روش SSP ، مقایسه‌ای بین دو روش مولکولی و سرولوژیک انجام شد. </strong></p><p> <strong> </strong><strong><i>مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده توصیفی می‌باشد و جامعه مورد مطالعه تمام افراد بومی شهر همدان درنظر گرفته شده است. از 100 نفر به‌روش تصادفی نمونه‌گیری انجام شد و افراد موردنظر از بین اهداکنندگان سازمان انتقال خون شهر همدان و از طریق پرسشنامه برگزیده شدند. به‌منظور تعیین آنتی‌ژن‌های </strong><strong>HLA </strong><strong>کلاس یک و دو و انجام آزمون </strong><strong>PCR </strong><strong>، به ترتیب 10 میلی‌لیتر خون هپارینه و 3 میلی‌لیتر خون حاوی </strong><strong>EDTA </strong><strong>جمع‌آوری شد و نمونه‌های </strong><strong>PCR </strong><strong>بلافاصله فریز شدند. جداسازی لنفوسیت‌های </strong><strong>B </strong><strong>و </strong><strong>T </strong><strong>به روش </strong><strong>Nylon Wool adherence </strong><strong>صورت گرفت. در این مطالعه از روش آمار توصیفی (فراوانی، درصد) و برای مقایسه نتایج حاصل از دو روش سرولوژیک و مولکولی از آزمون کای‌دو </strong><strong>(Chi-square) </strong><strong>استفاده شد. </strong></p><p>  <strong><i>یافته‌ها</i></strong> </p><p> <strong> فراوانی آنتی‌ژن‌های HLA کلاس یک و دو در 100 فرد مورد مطالعه به ترتیب زیر به‌دست آمد؛ در گروه آنتی‌ژن‌های کلاس یک لکوس A : A25 و HLA-A29 کمترین فراوانی (2%)، HLA-A9 بیشترین فراوانی (21%) را داشتند. درلکوس B : کمترین فراوانی برای HLA-B16 (1%) و بیشترین فراوانی برای HLA-B51 (33%) گزارش شد. در لکوس C : کمترین فراوانی برای HLA-CW5 (3%) و بیشترین فراوانی برای HLA-CW4 (33%) به‌دست آمد. در گروه آنتی‌ژن‌های کلاس دو، لکوس DR : کمترین فراوانی مربوط به HLA-DR8 (3%) و بیشترین فراوانی مربوط به HLA-DR11 (47%) گزارش شد. </strong></p><p> <strong> </strong></p><p>  <strong><i>نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> در نتایج مقایسه‌ای بر روی 40 نمونه به‌علت این‌که کیت مصرفی Biotest DRB/SSP دارای سطح تفکیک پایینی بود، اختلاف معنی‌داری بین نتایج به‌دست آمده از دو روش در آنتی‌ژن‌های کلاس دو لکوس DR دیده نشد، البته با این حال به علت نداشتن محدودیت‌های موجود در روش سرولوژیک، استفاده از این روش ترجیح داده می‌شود. می‌توان درمرحله بعدی برای تفکیک برخی ازآنتی‌ژن‌ها درمواردی نظیر واکنش متقاطع وسطح تفکیک بیشتر آللی، ازسطوح تفکیک بالاتراستفاده نمود. </strong></p><p> <strong> مشخص بودن فراوانی آنتی‌ژن‌های </strong><strong>HLA </strong><strong>در اقوام مختلف در مطالعات مردم‌شناسی، مهاجرت‌های هر جمعیت و نیز یافتن اهداکننده سازگار در مراکز مغزاستخوان لازم است و استفاده از روش‌های مولکولی با سطح تفکیک متوسط یا بالا در مراکز اهدای مغزاستخوان موجب تعیین دقیق‌تر و کاهش سازگاری بین دهنده و گیرنده پیوند و در نتیجه بهتر شدن عواقب کلینیکی پیوند خواهد شد. </strong></p><p> <strong><i> کلمات </i></strong><strong><i>کلیدی: </i></strong><strong></strong><strong></strong><strong>HLA </strong><strong>، قوم بومی، واکنش زنجیره‌ای پلیمراز، لکوس </strong><strong>DR </strong><strong></strong></p> <p> <strong> Abstract </strong></p><p> <strong> </strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p>  In this study our aim was to determine HLA-Class I and II antigens freguencies of Hamedani ethnic group. In addition to demographic studies and disease association, it has wide application in bone marrow donor registeries. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i> Materials and Methods</i></strong><strong> </strong></p><p>  In order to establish DNA-based HLA typing in central Laboratory of Iranian Blood Transfusion Organization, a comparison of serological and molecular (sequence specific primers “SSP”) methods for HLA-DRB has been performed. The study was descriptive and the population under study were selected out of the native people of Hamedan 100 healthy volunteer blood donors were chosen by questionnaire. 10ml heparinized and 3ml EDTA blood were collected from each selected donor. EDTA (PCR) samples were then frozen. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p>  N.I.H standard microlymphocytotoxicity and Nylon wool T and B cells separation was used for serological I and II typing. HLA-Class I plates were prepared from Iranian Blood Fractionation and Research Company and for Class II we used Biotest DR/DQ Typing Trays. PCR was done using “Roche high pure DNA extraction” Kit and HLA-DRBSSP (Biotest). The most and least frequent HLA-B antigens were B5 group (B51/B52) and B16 (38,39) respectively. Because of low resolution of HLA-DRB Kit, no significant difference was observed between serological and PCR methods. Although some blanks have been determined by PCR. </p><p> <strong><i> </i></strong></p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p>  The HLA-DRB determination by PCR is mandatory for donor/recipient pairs (even sibling) for bone marrow transplantation for donors it should be done by high resolution kits. </p><p> <strong> </strong></p><p> <strong> </strong></p><strong><i>Key words </i></strong><i>: </i>HLA, Ethnic, DRB, PCR ,HLA,قوم بومی,واکنش زنجیره‌ای پلیمراز ,لکوس DR HLA, Ethnic, DRB, PCR 43 52 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-24&slc_lang=fa&sid=1 R. Amini راضیه امینی ramini2001ca@yahoo.com 9100319475328460011095 9100319475328460011095 Yes A.A. Pourfathollah دکتر علی‌اکبر پورفتح‌اله 9100319475328460011096 9100319475328460011096 No M. Kamgooyan ملیحه کم گویان 9100319475328460011097 9100319475328460011097 No Sh. Samiee شهرام سمیعی 9100319475328460011098 9100319475328460011098 No