fa تخلیص ایمونوگلوبولین داخل وریدی از خمیر فرکشن II ايمونولوژي Imunology پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> فرآورده‌های ایمونوگلوبولین داخل وریدی( </strong><strong>IVIG </strong><strong>) در درمان اختلالاتی هم چون نقص‌های ایمنی اولیه و ثانویه، اتوایمیون، سیستماتیک التهابی و نیز در بیماری‌های عفونی به صورت موثر کاربرد دارد و حال حاضر از پرمصرف‌ترین اجزای پلاسمایی در جهان محسوب می شود. افزودن مراحل متعدد به فرآیند تولید </strong><strong>IVIG </strong><strong>که به منظور تخلیص بیشتر صورت می‌گیرد، باعث کاهش بازدهی و افزایش هزینه‌های ساخت می‌شود. لذا تولیدکنندگان همواره در صدد ارایه روش‌های مقرون به صرفه با در نظر گرفتن حفظ کیفیت و ایمنی مصرف هستند. در این مطالعه نه تنها مسیر تهیه فرآورده نهایی با حفظ کیفیت کوتاه‌تر شده، بلکه ایمنی محصول نیز با انجام پاستوریزاسیون به عنوان روش ویروس‌زدایی تامین گردیده است. </strong></p><p> <strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> بررسی انجام شده از نوع تجربی بود. از پلاسمای تازه منجمد شده( </strong><strong>FFP </strong><strong>) به عنوان ماده اولیه و با روش رسوب دادن با اتانل در سرما(روش </strong><strong>Cohn </strong><strong>)، خمیر فراکشن </strong><strong>II </strong><strong>(غنی از </strong><strong>IgG </strong><strong>) تهیه گردید. جهت تخلیص و با استفاده از فیلتراسیون، ناخالصی‌های غیر محلول حذف شد. قبل از انجام ویروس‌زدایی، محلول پروتئینی دیافیلتر و پس از افزودن پایدار کننده پاستوریزاسیون گردید. محلول پاستوریزه شده مجدداًَ دیافیلتر و سپس اولترافیلتر گردید و پس از فیلتراسیون در شرایط استریل فرآورده </strong><strong>IgG </strong><strong>نهایی تهیه شد. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> کنترل کیفی محصول نهایی نشان داد که فرآورده </strong><strong>IVIG </strong><strong>به دست آمده با روش پیشنهادی، از خلوص 100% برخوردار می‌باشد. میزان پلیمر پس از انجام پاستوریزاسیون و در محصول نهایی کمتر از یک درصد تعیین گردید. هم چنین با انجام آزمایش طیف‌سنجی دو رنگ نمایی، ساختار دوم و سوم مولکول </strong><strong>IgG </strong><strong>روش پیشنهادی در مقایسه با محصولات تجاری </strong><strong>IVIG </strong><strong>بررسی شد که نتایج مشابه و قابل قبولی را ارایه نمود. بازده محصول با انجام آزمایش نفلومتری محاسبه شد، که محصول 1/39% </strong><strong>IgG </strong><strong>از پلاسمای اولیه به دست آمد. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> نتایج آزمایش‌ها بر روی محصول نهایی از نظر خلوص نشان داد که روش تخلیصی به کارگرفته شده علیرغم کوتاه شدن فرآیند در مقایسه با روش‌های رایج، بسیار مطلوب می‌باشد. روش پیشنهادی پتانسیل‌های لازم برای هر دو مقوله مربوط به تولید مقرون به صرفه با حفظ کیفیت و ایمنی مصرف را از خود نشان داد که با انجام آزمایش‌های تکمیلی این روش، امکان به اجرا در آوردن آن در مقیاس صنعتی وجود دارد. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>پلاسما، تخلیص، ایمونوگلوبولین داخل وریدی </strong><strong>، فراکشن </strong><strong>II </strong><strong>کوهن </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Intravenous immunoglobulin (IVIG) preparations are used in several disorders including primary and secondary immunodeficiencies, autoimmune and systemic inflammatory diseases it is also applied in effective therapy of infectious diseases. IVIG is currently the most widely used plasma component in the world . The addition of multiple steps to the manufacturing process of IVIG lowers the yield of IgG and raises the manufacturing costs. Therefore, manufacturers attempt to employ a cost effective method with respect to safety and quality of the product. In this study we proposed a method which not only reduced the manufacturing steps but also raised product safety by the treatment of pasteurization as a virus inactivation method. </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> For this experimental study, the fraction II paste (rich in IgG) was obtained from fresh frozen plasma (FFP) by the modified cold ethanol fractionation method (Cohn’s method). For further purification, filtration was used to remove impurities. Before performing virus inactivation by pasteurization, protein solution was diafiltered and then the stabilizer was added. Pasteurized solution was diafiltered again and final product was prepared after sterile filtration.</p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> The quality control results of the finished product obtained by the proposed method revealed that the purity was 100% (determined by cellulose acetate electrophoresis) and the polymer amount was less than 1% (evaluated by HPLC chromatography). The secondary and tertiary structures of IgG molecule were also examined by circular dichroism spectroscopy technique and were then compared to the commercial IVIG products bringing about approximately similar and satisfactory results. The yield calculated for the initial amount of IgG of plasma was 39.1% as measured by nephelometery.</p><p> <strong><i>�</i></strong></p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> The high purity of the finished product confirmed that the proposed purification process was satisfactory in despite of fewer steps when compared to the current methods. Indeed, the cost- effective preparation together with quatily and safety are taken into account in the proposed method. If the complementary experiments are carried out, the proposed method can escalate at the industry scale. </p><p> <strong><i>�</i></strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong><strong></strong>Plasma, Purification, Intravenous immunoglobulin, Cohn fraction II</p><p>  </p> پلاسما, تخلیص, ایمونوگلوبولین داخل وریدی , فراکشن II کوهن Plasma, Purification, Intravenous immunoglobulin, Cohn fraction II 81 88 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-174&slc_lang=fa&sid=1 A. Aghaie افسانه آقایی Aghaie_a@yahoo.com 9100319475328460010441 9100319475328460010441 Yes A.A. Pourfathollah علی‌اکبر پورفتح‌اله 9100319475328460010442 9100319475328460010442 No S.Z. Bathaie سیده زهرا بطحایی 9100319475328460010443 9100319475328460010443 No S.M. Moazzeni سیدمحمد موذنی 9100319475328460010444 9100319475328460010444 No H. Khorsand Mohammad Pour هاشم خرسند محمدپور 9100319475328460010445 9100319475328460010445 No