Journal of Iranian Blood Transfusion
فصلنامه پژوهشی خون
bloodj
Medical Sciences
http://bloodjournal.ir
91
journal91
1027-9520
1735-8248
10.61882/bloodj
fa
jalali
1401
9
1
gregorian
2022
12
1
19
4
online
1
fulltext
fa
عوامل مؤثر در بهینگی ایمونیزاسیون جهت دستیابی به آنتی بادی علیه آنتیژن RhD در محیط کشت
Evaluation of effective factors in the optimization of immunization to achieve antibodies against RhD antigen in culture medium
ايمونوهماتولوژي
Imunohematology
پژوهشي
Research
<div><span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="font-weight:bold"><span lang="FA" style="line-height:80%"><span style="font-family:Jadid"><span style="font-weight:normal">چکید</span></span></span><span lang="AR-SA" style="line-height:80%"><span style="font-family:Jadid"><span style="font-weight:normal">ه</span></span></span><span lang="FA" style="line-height:80%"><span style="font-family:Jadid"><span style="font-weight:normal"></span></span></span></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:Titr">سابقه و هدف </span></span></span></i></b></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:">آنتیبادی علیه آنتیژن </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">RhD</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> در طب انتقال خون و بالین از اهمیت ویژهای برخوردار میباشد. لذا در این مطالعه به بررسی عوامل مؤثر در بهینگی ایمونیزاسیون جهت دستیابی به لنفوسیت ایمونیزه شده تولیدکننده آنتیبادی پرداخته شده تا در محیط آزمایشگاهی به آنتیبادی علیه آنتیژن </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">RhD</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> دست یافته شود. </span></span></span></b><b><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:Titr"></span></span></span></i></b></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:Titr">مواد و روشها</span></span></span></i></b></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:10%"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:">در یک مطالعه تجربی، لنفوسیتهای خون محیطی به روش فایکول از کیسههای خون کامل </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">O</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> منفی جداسازی شدند. سپس این لنفوسیتها با اللوسین متیل استر تیمار شده و در پلیت کشت سلولی با آنتیژن محلول و ذرهای </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">RhD</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> ، اینترفرون گاما، اینترلوکین4 و </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">CpGODN</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> به مدت یک هفته در دمای 37 درجه سانتیگراد مواجه شدند. پس از این مدت انکوباسیون به منظور ارزیابی تولید آنتیبادی از لنفوسیتها بر روی سوپرناتانت حاصل از محیط کشت مواجه سلولی با روش الایزا انجام شد. </span></span></span></b></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:Titr">یافتهها</span></span></span></i></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:">استفاده از اینترفرون گاما، ترکیب آن با اینترلوکین-4 و </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">CpGODN</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> به عنوان عوامل بهینهکننده جهت تولید آنتیبادی از لنفوسیتهای جدا شده به روش فایکول در ایمونیزاسیون آزمایشگاهی شناخته شدند(به ترتیب با تولید آنتیبادی با غلظتهای ۸۳۱/۳۶ ± ۸۵۱/۷۵ ، ۲۹۳/۳۱ ± ۱۹۵/۸۲ و۸۱۴/۲۴ ± ۱۳۴/۶۶ نانوگرم در میلیلیتر در ۱۰ مواجه صورت گرفته). </span></span></span></b></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:Titr">نتیجه گیری</span></span></span></i></b></span></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:">استفاده از عوامل بهینه کننده ایمونیزاسیون نقش مؤثری بر تولید آنتیبادی علیه آنتیژن </span></span></span></b><b><span dir="LTR" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%">RhD</span></span></b><b><span lang="FA" style="font-size:11.0pt"><span style="line-height:80%"><span 2="" lotus="" style="font-family:"> در محیط آزمایشگاهی دارند.</span></span></span></b></span></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="line-height:80%"><span style="direction:rtl"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><i><span lang="FA" style="font-size:9.0pt"><span style="line-height:80%"><span style="font-family:"2 Lotus""></span></span></span></i></span></span></span></span></span></span></div>
<div dir="rtl" style="text-align: left;"><span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><span style="font-size:12.0pt">Abstract</span></b><b><span style="font-size:12.0pt"></span></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i>Background and Objectives</i></b></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">Antibody against RhD antigen is important in blood transfusion and clinical medicine. Therefore, in this study, the effective factors in the optimization of in vitro immunization to achieve immunized lymphocytes that produce antibodies were evaluated to obtain antibodies against RhD antigen in the culture medium.</span></span></span></span></span><br>
<br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i>Materials and Methods</i></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">In an experimental study peripheral blood mononuclear cells were isolated from O-Negative whole blood bags using the Ficoll method. These cells were treated with L-leucyl-L-leucine methyl ester (LLME) and were exposed to soluble and particulate RhD antigen, interferon-gamma (IFN-γ), interleukin-4 (IL-4) and CpGODN in a culture plate at 37°C for one week. After this period of incubation, in order to evaluate the production of antibodies from lymphocytes on the supernatant obtained from the culture medium, ELISA assay was performed.</span></span></span></span></span><br>
<br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i>Results</i></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:inter-ideograph"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The use of IFN-γ, IFN-γ + IL-4 and IFN-γ + CpGODN was identified as the most optimal factors for the production of antibodies in an in vitro immunization (by producing antibodies with concentrations of 75.851 ± 36.831, 82.195 ± 31.293, and 66.134 ± 24.814 <m:omath><m:f><m:fpr><span cambria="" math="" style="font-family:"><m:ctrlpr></m:ctrlpr></span></m:fpr><m:num><span cambria="" math="" style="font-family:"><m:r><m:rpr><m:scr m:val="roman"><m:sty m:val="p"></m:sty></m:scr></m:rpr>ngr</m:r></span></m:num><m:den><span cambria="" math="" style="font-family:"><m:r><m:rpr><m:scr m:val="roman"><m:sty m:val="p"></m:sty></m:scr></m:rpr>ml</m:r></span></m:den></m:f></m:omath><span style="font-size:10.0pt"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><span style="position:relative"><span style="top:5.5pt"> </span></span></span></span> in 10 exposures).</span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i></i></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times=""><b><i>Conclusions </i></b></span></span></span></span></span><br>
<span style="font-size:10pt"><span style="text-justify:kashida"><span style="text-kashida:0%"><span style="unicode-bidi:embed"><span new="" roman="" style="font-family:" times="">The use of immunization optimization agents, has an effective role in the production of antibodies against RhD antigen in the <i>in vitro</i> culture.</span></span></span></span></span><br>
</div>
<div style="text-align: justify;"></div>
کلمات کلیدی: ایمنیزایی, تکنیک درون آزمایشگاهی, آنتیبادیها
Key words: Immunization, In Vitro Techniques, Antibodies
257
269
http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1519-1&slc_lang=fa&sid=1
M.
Amrovani
مهران
امروانی
9100319475328460023322
9100319475328460023322
No
مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
F.
Yari
فاطمه
یاری
f.yari@ibto.ir
9100319475328460023323
9100319475328460023323
Yes
استاد مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
S.
Milani
سعیده
میلانی
9100319475328460023324
9100319475328460023324
No
استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
B.
Amoohossein
بهناز
عموحسین
9100319475328460023325
9100319475328460023325
No
مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون