fa مقایسه دو روش MTT و تریپان بلو در تعیین بقای رده سلولی Vero در آلودگی با HSV-1 ويروس شناسي Virology پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;">چکید</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;">ه</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;"></span></span><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف </span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">ارزیابی بقای سلولی در مطالعه‌های سـلولی مهـم است و</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">نتیجه حاصله برای کاربرد ماده مورد آزمایش تعیین‌کننده است. امروزه از روش‌های مختلفی برای ارزیابی بقای سلولی استفاده می‌گردد و وجـود</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">همبستگی بین روش‌ها دارای اهمیت است. در این مطالعه، از سل لاین</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Vero </span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;برای بررسی اثرات ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HSV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بر بقای سلولی استفاده شد. بقای سلولی پس از آلودگی با </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HSV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با استفاده از روش‌هـای</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">حساس رنگ‌سـنجی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و تریپان‌بلو بر روی سل لاین </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Vero</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> مورد بررسی قرار گرفت.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">مطالعه کیفی انجام پذیرفته بر روی رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Vero</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> آلوده به ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HSV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با رقت های لگاریتمی طی مدت 24 سـاعت در محیط</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"> DMEM </span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">حاوی 2% سرم جنین گاوی انجام گرفت و سپس زنده‌مانی سلولی توسط روش‌های رنگ سنجی</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT </span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;و تریپان بلو در رقت های ^1-10 تا ^5-10 و فواصل زمانی 0و 4 و8 و 18 و 24 ساعت بررسی شد و درصـد بقا جهت رسم منحنی بقای سنجش استفاده گردید</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">.</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">یافته‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">رقت‌های مختلف ویروسی جهت تعیین دوز 50 درصد آلودگی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">TCID50</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> سلول با ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HSV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با میکروسکوپ اینورت انجام شد. هم چنین داروی آسیکلویر با غلظت 50 میلی‌گرم بر میلی‌لیتر به عنوان کنترل با روش‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و تریپان‌بلو، مقایسه شد. نتایج تحلیل رگرسیون بقای سلولی، نشان داد؛ همبستگی خطی، مثبت و معنادار بین روش‌ها مشاهده شده است یعنی بین روش‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و تریپان‌بلو همبستگی وجود داشت (001/0 </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">p<</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، 9/0 </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">r=</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">).</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه گیری</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج نشان دادند، هر دو روش بـرای تعیـین بقای سـلولی قابل استفاده بـوده و نتایج روش تریپان‌بلو</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">قابل تایید با روش </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> می‌باشد</span></span></strong><span dir="LTR"><span style="font-size:14.0pt;">.</span></span><span style="font-family:B Nazanin;"><span style="font-size:14.0pt;"></span></span><br> &nbsp;</div> <div dir="rtl" style="text-align: left;"><strong>Abstract</strong><br> <strong><em>Background and Objectives</em></strong><br> Evaluation of cell survival is important in cellular studies and the result is decisive for the application of the test substance. Different methods are used to evaluate cell survival and the correlation between methods is important<span dir="RTL">.</span> Here, Vero cell line was used to evaluate the effects of HSV-1 virus on cell survival. Cell survival after HSV-1 infection using sensitive colorimetric methods of 3-, 4-, 5-dimethylthiazole-2-yl, -2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT), and Trypan Blue on Vero cell line was examined<span dir="RTL">.</span><br> &nbsp;<br> <strong><em>Materials and Methods</em></strong><br> A qualitative study was performed on Vero cell line infected with HSV-1 virus with logarithmic dilutions10^-1 to 10^-5 dilutions and time intervals of 0, 4, 8, 18 and 24 hours and the s in DMEM containing 2% Fetal bovine serum (FBS). Then cell viability by MTT and Trypan tests was examined . The survival percentage was used to plot the survival curve of the assays<span dir="RTL">.</span><br> &nbsp;<br> <strong><em>Results</em></strong><br> Different viral dilutions were used to determine the infectious dose of 50% (TCID50) of HSV-1virus with invert microscope. Acyclovir at a concentration of 50 mg/mL was compared as drug control for MTT and Trypan Blue. The results of regression analysis showed cell survival. Linear, positive and significant correlation was observed between the methods that showed a correlation between MTT and Trypan Blue methods (p< 0.001, r = 0.9<span dir="RTL">(</span><br> &nbsp;<br> <strong><em>Conclusions&nbsp; </em></strong><br> The results showed that both methods can be used to determine cell survival and the results of MTT can be confirmed by Trypan Blue method<span dir="RTL">.</span><br> &nbsp;<br> &nbsp;</div> <span dir="RTL"></span> کلمات کلیدی: HSV-1 , تریپان بلو, بقا Key words: HSV-1, Trypan Blue, Survival 18 26 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1434-1&slc_lang=fa&sid=1 M. Zamanian مهسا زمانیان Mahsa_emad@yahoo.com 9100319475328460023572 9100319475328460023572 No گروه زیست شناسی واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی Z. Noormohammadi زهرا نور محمدی marjannm@yahoo.com 9100319475328460023573 9100319475328460023573 No استاد گروه زیست شناسی واحد علوم و تحقیقات دانشگاه آزاد اسلامی T. Akbarzadeh تهمینه اکبرزاده 9100319475328460023574 9100319475328460023574 Yes استاد گروه شیمی دارویی دانشکده داروسازی دانشگاه علوم پزشکی تهران F. Bineshian فرحناز بینشیان 9100319475328460023575 9100319475328460023575 No استادیار گروه انگل شناسی و قارچ شناسی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی سمنان Z. Sharifi زهره شریفی sharifiz@yahoo.com 9100319475328460023576 9100319475328460023576 No استاد مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون