fa مقایسه آزمایش‌های الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلات و PCR برای تائید ویروس HTLV-1 در داوطلبان اهدای خون ويروس شناسي Virology پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;">چکید</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;">ه</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:Jadid;"></span></span><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف </span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">ویروس لنفوتروپیک سلول </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">T</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> انسانی نوع</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">I </span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;، با دو بیماری در انسان یعنی لوکمی/لنفوم </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">T</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بزرگسالان و پاراپارسیس اسپاستیک گرمسیری مرتبط است. حدود 5 تا 10 میلیون نفر با </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HTLV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> در سراسر جهان آلوده شده‌اند. به منظور افزایش سلامت خون در گیرندگان و جلوگیری از نتایج کاذب در داوطلبان اهدای خون،&nbsp; نیاز است روش‌های شناسایی</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">عوامل عفونی،</span></span></strong> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">از حساسیت و اختصاصیت بالا برخوردار باشند. هدف از این مطالعه؛ مقایسه آزمایش‌هـای الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلاتینگ و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، برای تائید ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HTLV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بود.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">این مطالعه تجربی در سال 1397 بر روی&nbsp; تعداد 66 نمونه(62 مرد و 4 زن) که با کیت الایزا دارای آنتی‌بادی علیه ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&nbsp;HTLV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">بودند و با روش‌های الکتروکمی لومینسانس و وسترن بلات آزمایش شدند، انجام شد. هم‌چنین جهت تشخیص ویروس با روش </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، اهداکنندگان خون مجدد فراخوان شدند و نمونه جدید از آنان اخذ شد. پس از استخراج </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">DNA</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، آزمایش </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Nested PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> &nbsp;با آغازگرهای هر دو ناحیه </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">TAX</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">LTR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> انجام شد. </span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">یافته‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">در این مطالعه تعداد 8 (1/12%) نمونه از 66 نمونه که با آزمایش الایزا، مجدداً واکنش نشان داده بودند، انتخاب شدند. تعداد 4 (6%) نمونه با روش الکتروکمی لومینسانس، حاوی آنتی‌بادی علیه </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HTLV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بودند. در بررسی با روش‌های وسترن بلات و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Nested PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> نیز، همان 4 (6%) نمونه مجدد مثبت شدند.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:Titr;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه گیری</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">استفاده از آزمایش‌های الکتروکمی لومینسانس، وسترن بلات و روش </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&nbsp;PCR</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">که در این مطالعه نتایج مشابهی داشتند، برای تایید ویروس </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">HTLV-1</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> مناسب می‌باشند.</span></span></strong><br> <strong><span style="font-family:2 Lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"></span></span></strong></div> <div dir="rtl" style="text-align: left;"><strong>Abstract</strong><br> <strong><em>Background and Objectives</em></strong><br> Human T-cell lymphotropic virus type I (HTLV-I) has been associated with two diseases in humans such as adult T-cell leukemia/lymphoma (ATLL) and HTLV-associated myelopathy/tropical spastic Para paresis (HAM/TSP). About 5 to 10 million people are infected with HTLV-1 worldwide. In order to improve the blood safety and to prevent false positive results in blood donors, methods for identifying infectious agents need to be highly sensitive and specific. The purpose of this study was to compare the electrochemical luminescence, western blotting, and PCR assays to confirm HTLV-1 virus.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Materials and Methods</em></strong><br> This exprimental study was carried out in 2018 on 66 samples (62 males and 4 females) which had antibody against HTLV-1 virus.&nbsp; All retested samples with the same ELISA kit were examined by electrochemical luminescence and western blotting. For virus detection by PCR method, blood donors were recalled for new samples. After DNA extraction, nested PCR was performed with primers in both TAX and LTR regions.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Results</em></strong><br> In this study 8 (%12/1) samples from 66 samples were reacted with ELISA test. Also 4 (%6) samples had antibody against HTLV-1 by electrochemiluminescence test. Finally, four samples were confirmed by Western blotting and Nested PCR.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Conclusions&nbsp; </em></strong><br> The use of the electrochemical luminescence, western blotting and PCR assays, which had similar results in this study, is suitable for detection and confirmation of HTLV-1 virus.<br> &nbsp;</div> کلمات کلیدی: وسترن بلات, کمی لومینسانس, Nested PCR , HTLV-1 Key words: Western Blotting, Chemiluminescence, Nested PCR, HTLV-1 200 209 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1368-1&slc_lang=fa&sid=1 H. Mehrabi Habibabadi حسین مهرابی حبیب آبادی h.mehrabi@student.iautmu.ac.ir 9100319475328460023648 9100319475328460023648 No گروه میکروبیولوژی، دانشکده علوم و فناوری های نوین، علوم پزشکی تهران ـ دانشگاه آزاد اسلامی Z. Sharifi زهره شریفی z.sharifi@ibto.ir 9100319475328460023649 9100319475328460023649 Yes استاد مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون M. Parsania مسعود پارسانیا masoud_parsania@yahoo.com 9100319475328460023650 9100319475328460023650 No دانشیار گروه میکروبیولوژی دانشکده پزشکی، علوم پزشکی تهران ـ دانشگاه آزاد اسلامی A.A. Pourfathollah علی اکبر پورفتح الله pourfa@yahoo.com 9100319475328460023651 9100319475328460023651 No استاد گروه ایمونولوژی دانشکده علوم پزشکی دانشگاه تربیت مدرس S. Haghighat ستاره حقیقت setareh_haghighat@yahoo.com 9100319475328460023652 9100319475328460023652 No استادیار گروه میکروبیولوژی دانشکده علوم و فناوری های نوین علوم پزشکی تهران ـ دانشگاه آزاد اسلامی