fa مقایسه تاثیر دوزهای مختلف (BMP4)Bone Morphogenetic Protein 4 و اریتروپویتین(EPO) بر تمایز سلول‌های بنیادی جنینی موش به کلنی‌های اریتروئیدی عمومى General پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> تمایز سلول‌های بنیادی جنینی در شرایط کشت، سیستم آزمایشی را برای بررسی اثرات فرضی فاکتورهای رشد فراهم می‌کند. امروزه پیدا کردن فاکتورهای رشد و عوامل محیطی مورد نیاز برای خون‌سازی اهمیت دارد. هدف از این مطالعه مشخص کردن اثر دوزهای مختلف </strong><strong>EPO </strong><strong>و </strong><strong>BMP4 </strong><strong>بر تمایز سلول‌های بنیادی جنینی و ارزیابی تعداد و اندازه کل کلنی‌ها و تعداد کلنی‌های اریتروئیدی بود. </strong></p><p> <strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. در این مطالعه از سلول‌های اجسام شبه جنینی 4 روزه با منشا سلول‌های بنیادی جنینی رده </strong><strong>CCE </strong><strong>استفاده شد. سلول‌ها به وسیله </strong><strong>EDTA-Trypsin </strong><strong>از هم جدا شدند و در دو گروه آزمایشی حاوی دوزهای مختلف( </strong><strong>ng/ml </strong><strong>80، 40، 20، 10، 5، 0) </strong><strong>BMP4 </strong><strong>و ( </strong><strong>ng/ml </strong><strong>160، 80، 40، 20، 10، 0) </strong><strong>EPO </strong><strong>در محیط نیمه جامد حاوی متیل سلولز کشت داده شدند. پس از گذشت 10 روز، دو گروه از لحاظ اندازه کلنی‌ها، تعداد و درصد کلنی‌های بنزیدین مثبت مورد ارزیابی قرار گرفتند. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> پس از جمع آوری اطلاعات، مشخص شد تمام دوزهای </strong><strong>BMP4 </strong><strong>و </strong><strong>EPO </strong><strong>از لحاظ آماری به طور معنی‌داری باعث افزایش اندازه کلنی‌ها شده بودند. مقایسه دوزهای مختلف </strong><strong>BMP4 </strong><strong>نشان داد که با افزایش دوز، تعداد کل کلنی کاهش می‌یابد و با گروه کنترل اختلاف معنی‌داری دارد(05/0 </strong><strong>p< </strong><strong>). گرچه دوز </strong><strong>ng/ml </strong><strong>20 از </strong><strong>BMP4 </strong><strong>، کلنی‌های اریتروئیدی بیشتری داشت، اما از نظر درصد و تعداد کلنی‌های بنزیدین مثبت در مقایسه با گروه کنترل تفاوتی نداشت. هم‌چنین مقایسه دوزهای مختلف </strong><strong>EPO </strong><strong>نشان داد که تعداد و درصد کلنی‌های بنزیدین مثبت در مقایسه با گروه کنترل افزایش داشت و از میان دوزهای به کار گرفته شده، دوز </strong><strong>ng/ml </strong><strong>20 نسبت به بقیه دوزها، تعداد کلنی بنزیدین مثبت بیشتری داشت(05/0 </strong><strong>p< </strong><strong>). </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> در مجموع به نظر می‌رسد که از بین دو فاکتور بررسی شده، </strong><strong>EPO </strong><strong>در تحریک سلول‌های بنیادی جنینی و تمایز آن‌ها به سمت کلنی‌های اریتروئیدی مناسب‌تر است و دوز </strong><strong>ng/ml </strong><strong>20 </strong><strong>EPO </strong><strong>نسبت به بقیه دوزها بهترین تاثیر را دارد. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i>: سلول‌های بنیادی جنینی، Bone Morphogenetic Protein 4 ، اریتروپویتین </strong></p> <p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> <i>In-vitro</i> differentiation of embryonic stem cells to different cell types provides a valuable tool to study the interaction between these cells and growth factor. Recent investigation showed that recognition of the factors and their influence on the hematopoiesis is important. The aim of this research was to study the effect of different dose of EPO and BMP4 on the differentiation of embryonic stem cells the number and size of total colonies and benzidine positive colonies were also evaluated.</p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> 4-day-old EBs were trypsinized and dissociated to single cells. These cells were cultured on the semisolid medium in two groups with different doses of EPO (10, 20, 40, 80, 160 ng/ml) and BMP4 (5, 10, 20, 40, 80, 160 ng/ml). The colonies were evaluated after 10 days and stained with benzidine and giemsa. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> The size of colonies in all concentrations of EPO and BMP4 faced an increase showing a significant difference with the control group (P ≤ 0.05). Total number of colonies had a negative correlation with the dose of BMP4 but there was not any significant difference between benzidine positive colonies with the control group. The number and percentage of benzidine positive colonies had significant difference with the control group in all doses of EPO. 20ng/ml of EPO contrary to other concentrations of EPO caused increase in benzidine positive colonies. </p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Our results showed that EPO had better effect on ES cells erythroid colony differentiation than BMP4. It also indicated that 20 ng/ml of EPO was the best concentration. </p><p> <strong>�</strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong><strong></strong>Embryonic stem cell, Bone Morphogenetic Protein4, Erythropoietin </p><p>  </p> سلول‌های بنیادی جنینی, Bone Morphogenetic Protein 4 , اریتروپویتین Embryonic stem cell, Bone Morphogenetic Protein4, Erythropoietin 333 342 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-109&slc_lang=fa&sid=1 Mandana Beighi Boroujeni ماندانا بیگی بروجنی 9100319475328460010928 9100319475328460010928 No Mozhdeh Salehnia مژده صالح‌نیا mogdeh@dr.com 9100319475328460010929 9100319475328460010929 Yes Mojtaba Rezazadeh Valojerdi مجتبی رضازاده ولوجردی 9100319475328460010930 9100319475328460010930 No Mehdi Forouzandeh مهدی فروزنده 9100319475328460010931 9100319475328460010931 No Seied Javad Mowla سید جواد مولی 9100319475328460010932 9100319475328460010932 No Ebrahim Hajizadeh ابراهیم حاجی‌زاده 9100319475328460010933 9100319475328460010933 No