fa اثر مهارکننده تلومراز MST-312 بر آپوپتوز رده سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد (NALM-6) هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <div style="text-align: justify;"><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;">چکید</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;">ه</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;"></span></span><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف </span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">در حالی که تلومراز در 90%-85% سرطان‌ها از جمله در لوسمی لنفوبلاستیک حاد بیان می‌شود، در سلول‌های طبیعی بیان ناچیزی داشته و مهار آن می‌تواند یک رویکرد درمانی هدفمند برای درمان سرطان باشد. هدف از این مطالعه، بررسی اثر مهارکننده تلومراز </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MST-312</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بر آپوپتوز سلول‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">NALM-6</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بود. </span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">در این مطالعه تجربی، سلول‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">NALM-6</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با غلظت‌های مختلف </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MST-312</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> تیمار شدند. سپس در زمان‌های مختلف زنده مانی سلولی با آزمون تریپان‌بلو، فعالیت متابولیک سلولی با روش رنگ سنجی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MTT</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، آپوپتوز سلولی به روش فلوسیتومتری با استفاده از اتصال به آنکسین </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">7AAD/V-</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و آپوپتوز در سطح ژن با بررسی بیان ژن‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Bax</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Bcl-2</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp; مورد بررسی قرار گرفت.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">یافته‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">بیش از 50% کاهش در زنده‌مانی سلول‌های تیمار شده با غلظت 8 میکرومولار </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&nbsp;MST-312</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">به مدت 48 ساعت مشاهده شد. مقادیر میانگین و انحراف معیار درصد زنده‌مانی در زمان‌های صفر و 72 ساعت به ترتیب 100% و 5/2% </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&plusmn;</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> 5/93% به دست آمد. فعالیت متابولیک سلولی پس از تیمار 48 ساعته در غلظت‌های 2، 4 و 8 میکرومولار به ترتیب 6%، 69/19% و 9/56% کاهش یافت. مواجهه 48 ساعته سلول‌های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">NALM-6</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با غلظت 4 میکرومولار </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MST-312</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، منجر به افزایش20% در آپوپتوز سلولی، افزایش 11/2 برابری بیان ژن </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Bax</span></span></em></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و کاهش61/0 برابری بیان ژن </span></span></strong><strong><em><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">Bcl-2</span></span></em></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> گردید.</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;"></span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه گیری</span></span></em></strong><br> <strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">MST-312 </span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">&nbsp;با مهار تلومراز و القای آپوپتوز در رده سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">NALM-6</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">، می‌تواند به عنوان کاندیدی جدید برای درمان لوسمی لنفوبلاستیک حاد پیشنهاد شود. </span></span></strong><br> <br> &nbsp;</div> <div dir="rtl" style="text-align: left;"><strong>Abstract</strong><br> <strong><em>Background and Objectives</em></strong><br> There have been continuous efforts in telomerase-targeted therapy for cancer treatment because telomerase expression is significantly increased in about 85- 90% of human cancers while its expression is usually silenced in normal cells.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Materials and Methods</em></strong><br> Throughout this experimental study, NALM-6 cells were treated with different concentrations of telomerase inhibitor, MST-312 at different times. Then, cell viability and metabolic activity were evaluated by trypan blue and MTT assays; cell apoptosis was also evaluated by flow cytometry using Annexin V Apoptosis Detection Kit. In addition, the expression of BAX and BCL2 genes was evaluated in the treated cells using Quantitative Real-time PCR.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Results</em></strong><br> A dose-and time-dependent decrease was observed in the viability of NALM-6 cells after exposure with different concentration of MST-312. Over 50% decrease was observed in the viability of the cells treated with 8 &mu;M of MST-312 after 48 h. The cytotoxic effect of MST-312 was dose- dependent, with approximately 6, 19.69 and 56.9% reduction in metabolic activity of NALM-6 cells after 48 h exposure with 2, 4, and 8 &mu;M of MST-312, respectively. Approximately 20% apoptosis was observed in NALM-6 cells treated with 4&mu;M of MST-312 after 48 h.&nbsp; Gene expression analysis also showed that 4&mu;M of MST-312 led to upregulation of BAX and downregulation of Bcl-2 genes<span dir="RTL">.</span><br> &nbsp;<br> <strong><em>Conclusions&nbsp; </em></strong><br> Inhibition of telomerase activity by MST-312 can be proposed as a new candidate for the treatment of acute lymphoblastic leukemia<span dir="RTL">.</span><br> &nbsp;<br> <br> &nbsp;</div> کلمات کلیدی: تلومراز, آپوپتوز, لوسمی لنفوبلاستیک حاد Key words: Telomerase, Apoptosis, Acute Lymphoid Leukemia 120 132 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1242-1&slc_lang=fa&sid=1 N. Ghasemimehr نرگس قاسمی مهر nargesghasemimehr2012@gmail.com 9100319475328460023984 9100319475328460023984 No دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان Z. Yazdani زینت یزدانی yazdani_zinat@yahoo.com 9100319475328460023985 9100319475328460023985 No دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان A.R. Farsinejad علیرضا فارسی نژاد farsinezhad239@yahoo.com 9100319475328460023986 9100319475328460023986 No استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان R. Mirzaee Khalilabadi روح الله میرزایی خلیل آبادی mirhem1360@gmail.com 9100319475328460023987 9100319475328460023987 No استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان A. Fatemi احمد فاطمی ahmad.fatemi2@gmail.com 9100319475328460023988 9100319475328460023988 Yes استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی کرمان