fa تاثیر سلول‌های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان رت بر میزان آپوپتوز و بیان نشانگرهای سطح سلولی CD33 و CD34 جهت رهیافت درمانی لوسمی میلوئیدی مزمن سلولهاي بنيادي Stem cells پژوهشي Research <span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;">چکید</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;">ه</span></span><span style="font-weight:normal;"><span style="font-family:jadid;"></span></span><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">سابقه و هدف </span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">مقاومت دارویی در لوسمی میلوئیدی مزمن، یکی از چالش&shy;ها در درمان این بیماری می&shy;باشد. در این مطالعه با هدف القای آپوپتوز در سلول&shy;های رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> (لوسمی میلوئیدی مزمن) و سلول&shy;های بنیادی مزانشیمی مشتق از مغز استخوان رت (</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">rBMSCs</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">) جهت بررسی مارکر&shy;های سطح سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD33</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD34</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و هم چنین درصد آپوپتوز صورت گرفته، هم &shy;کشتی این دو رده سلولی انجام شد.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">مواد و روش‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">در یک مطالعه تجربی، پس از جداسازی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">rBMSCs</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، این سلول</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&shy;</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">ها به لحاظ تمایز به استخوان، چربی و غضروف شناسایی و هم چنین از نظر بیان مارکر&shy;های سطحی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD90</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD105</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> ، </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD45</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong>&nbsp;<strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD56</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">تعیین ماهیت شدند. سپس سلول&shy;های </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> جهت بررسی مارکر&shy;های سطح سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD33</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD34</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و آپوپتوز با استفاده از روش فلوسیتومتری جمع&shy;آوری گردیدند.</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">یافته‌ها</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">نتایج حاصل از ایمنوفنوتایپینگ سلول&shy;ها حاکی از بیان مثبت </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD90</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD105</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و بیان منفی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD45</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD56</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> بوده و بیان مارکر&shy;های سطح سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD33</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD34</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> در رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> در حضور </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">rBMSCs</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> به ترتیب به میزان 2/45% و 5/76% افزایش یافت. القای آپوپتوز در رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> به طور معنادار و به میزان 6/56% در مقایسه با گروه کنترل افزایش نشان داد(05/0 </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">p<</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">).</span></span></strong><br> <strong><em><span style="font-family:titr;"><span style="font-size:9.0pt;">نتیجه گیری</span></span></em></strong><br> <strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">مطالعه حاضر نشان داد، هم</span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">&shy;</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;">کشتی رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> با </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">rBMSCs</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> سبب افزایش معنادار در میزان بیان مارکر&shy;های سطح سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD33</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">CD34</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> و القای آپوپتوز در رده سلولی </span></span></strong><strong><span dir="LTR"><span style="font-size:9.0pt;">K562</span></span></strong><strong><span style="font-family:2 lotus;"><span style="font-size:11.0pt;"> می&shy;شود. این تاثیر می‌تواند از طریق فاکتور&shy;ها و سیتوکاین&shy;های مترشحه از سلول&shy;های بنیادی مزانشیمی باشد. هر چند که ارزیابی بهتر این سیتوکاین&shy;ها از نظر نوع آن&shy;ها در مطالعه‌های آینده توصیه می&shy;شود. </span></span></strong><br> <br> &nbsp; <div dir="rtl" style="text-align: left;"><strong>Abstract</strong><br> <strong><em>Background and Objectives</em></strong><br> Drug resistance is one of the main challenges in the treatment of chronic myeloid leukemia (CML). In this study, with the aim of inducing apoptosis in K562 cell line (CML), this cell line was co-cultured with rat bone marrow mesenchymal stem cells (rBMSCs). Then, the rate of apoptosis as well as cell surface markers expression of CD33 and CD34 in the K562 cells line was evaluated.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Materials and Methods</em></strong><br> In this experimental study, after isolating rBMSCs, the multilineag differentiation capacity of rBMSCs as well as the mesenchymal stemness of these cells was identified by evaluation of CD90, CD105, CD45, and CD56 cell surface. Then, the K562 cells were subjected for evaluation of CD33 and CD34 cell surface markers and apoptosis using a flow cytometry technique.<br> &nbsp;<br> <strong><em>Results</em></strong><br> Immunophenotyping of the cells indicated positive expression of CD90 and CD105 and negative expression of CD45 and CD56. The expression of CD33 and CD34 cell markers in the K562 cell line was increased 45.2% and 76.5%, respectively. Also, induction of apoptosis in the K562 cell line significantly increased (56.6%) compared to the control (p < 0.05).<br> &nbsp;<br> <strong><em>Conclusions&nbsp; </em></strong><br> Briefly, this study showed that the co-culturing of the K562 cells line with rBMSCs causes significant increase in the expression of CD33 and CD34 cell surface markers as well as induction of apoptosis in the K562 cells (p < 0.05). This effect can be through the secreted factors and cytokines of rBMSCs; however, better evaluation in terms of type of cytokines is recommended in the future studies.<br> &nbsp;<br> <br> &nbsp;</div> کلمات کلیدی: لوسمی میلوئیدی مزمن, سلول­های بنیادی مزانشیمی مغز استخوان, آپوپتوز, هم‌کشتی Key words: Myeloid Leukemia‘Chronic, Bone Marrow Stromal Cells, Apoptosis, Co-culture 210 225 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1204-2&slc_lang=fa&sid=1 Davood Najafi داود نجفی najafi@gmail.com 9100319475328460023962 9100319475328460023962 No دانشکده دامپزشکی دانشگاه تبریز Ezzatollah Fathi عزت اله فتحی ez.fathi@tabrizu.ac.ir 9100319475328460023963 9100319475328460023963 Yes گروه علوم درمانگاهی ـ داشنیار دانشکده دامپزشکی دانشگاه تبریز Raheleh Farahzadi راحله فرحزادی farahzadir@tbzmed.ac.ir 9100319475328460023964 9100319475328460023964 No استادیار مرکز تحقیقات هماتولوژی و انکولوژی دانشگاه علوم پزشکی تبریز