fa کارایی اکسی توسین در تمایز سلول‌های بنیادی P19cl6 به سلول‌های قلبی ضربان‌دار عمومى General پژوهشي Research <p>  چکید ه </p><p> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p> <strong> سلول‌های </strong><strong>P19cl6 </strong><strong>یکی از ساب کلون‌های سلول‌های </strong><strong>P19 </strong><strong>است که اخیراًَ جدا سازی شده است. این سلول‌ها بیشتر ویژگی مزودرمی دارند و قادرند بدون تشکیل جسم شبه رویانی به سلول‌های قلبی تمایز یابند. پژوهش حاضر به منظور بررسی کارایی اکسی توسین در تمایز سلول‌های </strong><strong>P19cl6 </strong><strong>به سلول‌های قلبی در دو حالت تک لایه(مونولایر) و جسم شبه رویانی و نیز تولید سلول‌های قلبی ضربان‌دار و نشاندار شده با پروتئین فلورسنت انجام شد. </strong></p><p> <strong><i> مواد وروش‌ها </i></strong></p><p> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. ابتدا سلول‌ها به دو شکل مونولایر و جسم شبه رویانی تحت تاثیر اکسی توسین با غلظت ^7-10× 1 مول و در گروه کنترل مثبت تحت تاثیر </strong><strong>DMSO </strong><strong>با غلظت 1 درصد قرار گرفتند. سپس روند القای تمایز سلول‌ها به سلول‌های قلبی با انجام ارزیابی‌های مورفولوژیک و ایمونوسیتوشیمی بررسی شد. در ادامه پژوهش، پلاسمید </strong><strong>pEGFP-C1 </strong><strong>با استفاده از الکتروپوریشن به داخل سلول‌‌های بنیادی </strong><strong>P19cl6 </strong><strong>ترانسفکت شده و از اکسی توسین جهت تمایز سلول‌های نشاندار شده به سلول‌های قلبی استفاده شد. </strong></p><p> <strong><i> یافته‌ها </i></strong></p><p> <strong> مشاهدات انجام شده در این تحقیق نشان داد در گروه آزمایش، اجسام شبه رویانی تهیه شده از سلول‌ها تحت تاثیر اکسی توسین به سلول‌های قلبی تمایز پیدا کردند در حالی که سلول‌های کشت داده شده به صورت مونولایر قادر به تمایز به سلول‌های قلبی نبودند. در گروه کنترل سلول‌ها به هر دو شکل مونولایر و جسم شبه رویانی تحت تاثیر </strong><strong>DMSO </strong><strong>به سلول‌های قلبی تمایز یافتند. در بخش دوم پژوهش، سلول‌های </strong><strong>P19cl6 </strong><strong>به کمک الکتروپوریشن با کارایی بالا با ژن پروتئین فلورسنت سبز تحت تاثیر اکسی‌توسین ترانسفکت شده به سلول‌های قلبی ضربان‌دار تمایز پیدا کردند. ارزیابی‌های مورفولوژیک و ایمونوسیتوشیمی به عمل آمده ماهیت سلول‌های قلبی را تایید کرد. </strong></p><p> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p> <strong> آن چه از این پژوهش می‌توان نتیجه گرفت این است که هنگام به کارگیری اکسی توسین، تشکیل جسم شبه رویانی جهت تمایز سلول‌های </strong><strong>P19cl6 </strong><strong>به سلول‌های قلبی ضروری است و نیز این سلول‌ها پس از ترانسفکت شدن با ژن پروتئین فلورسنت سبز، قادرند به سلول‌های قلبی ضربان‌دار تمایز یابند. لذا این سلول‌ها مدل مناسبی جهت مطالعات مبتنی بر پیوند سلولی در مدل‌های آزمایشگاهی بیماری قلبی می‌باشند. </strong></p><p> <strong><i> کلمات کلیدی </i></strong><strong>: </strong><strong></strong><strong>تمایز سلولی، سلول‌های قلبی، اکسی توسین، سلول‌های بنیادی، </strong><strong>P19 </strong></p><p>  </p> <p> <strong> Oxytocin efficiency in differentiation of P19c16 stem cells into cardiomyocytes </strong><strong></strong></p><p>  </p><p>  </p><p> <strong><i>Fathi F.¹(PhD), Bagheban Eslami M.R.²(PhD), Ahsan B.¹(MD), Alasvand M.¹(MS),</i></strong></p><p> <strong><i> Rezaei M.J.¹(PhD), Pirmoradi L.¹(MS), Asahara T.³(MD)</i></strong><i /></p><p>  </p><p> <i>¹</i><i>School of Medicine, Kordestan University of Medical Sciences </i></p><p> <i>²</i><i><sup /></i><i>Royan Research Center, Stem Cells Research Group </i></p><p> <i>³</i><i>Riken Institute, CDB, Japan </i></p><p>  </p><p> <strong>�</strong></p><p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> Recently, P19c16 has been cloned from P19 cells. This stem cell line has mesodermal traits and can be differentiated into cardiomyocytes without embryoid body formation. The present study was designed to investigate the oxytocin effect on differentiation of P19c16 into cardiomyocytes and production of GFP-labeled cardiomyocytes. </p><p>  </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> At first, the P19c16 cells were cultured as monolayer and embryoid body then oxytocin with 1 × 10^-7 M concentration was added to culture media as the inducer agent. DMSO was used as an inducer agent in positive control under the same conditions. Differentiated cells underwent morphological and immunocytochemical evaluation. The research in its continuation pursued the transfection of pEGFP-C1 plasmid with P19c16 cells by electroporation method then, stably expressed GFP cells were differentiated into cardiomyocytes by oxytocin. </p><p>  </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> The obtained data indicated that in the experimental group EBs from P19c16 cells could be differentiated into cardiomyocytes whereas monolayer cells could not. In the control group, both EBs and monolayer cells could be differentiated into cardiomyocytes by DMSO. In second part of this study, P19c16 cells were efficiently transfected with GFP, and GFP expressed cells were differentiated into beating cardiomyocytes by oxytocin. The results of morphological and immunocytochemical evaluation confirmed that differentiated cells were cardiomyocytes. </p><p>  </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Our results showed that the embryoid body formation is necessary for differentiation of P19c16 cells into cardiomyocytes and these cells after stable transfection with GFP could be differentiated into beating cardiomyocytes. It can be concluded that probably P19c16 line is a good stem cell line for cell transplantation in the experimental model of cardiac disease. </p><p> <strong>�</strong></p><p> <strong><i>Key words</i></strong><strong><i> : </i></strong><strong></strong>Cell differentiation, Cardiomyocytes, Oxytocin, Stem cells<strong> , </strong>P19<strong></strong> </p> تمایز سلولی, سلول‌های قلبی, اکسی توسین, سلول‌های بنیادی, P19 Cell differentiation, Cardiomyocytes, Oxytocin, Stem cells, P19 281 290 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-103&slc_lang=fa&sid=1 Fardin Fathi فردین فتحی farfath@yahoo.com 9100319475328460010893 9100319475328460010893 Yes Mohammad Reza Bagheban Eslami محمدرضا باغبان اسلامی‌نژاد 9100319475328460010894 9100319475328460010894 No Behzad Ahsan بهزاد احسن 9100319475328460010895 9100319475328460010895 No Masood Alasvand مسعود علاسوند 9100319475328460010896 9100319475328460010896 No Mohammad Jafar Rezaei محمد جعفر رضایی 9100319475328460010897 9100319475328460010897 No Leyla Pirmoradi لیلا پیر مرادی 9100319475328460010898 9100319475328460010898 No Takayoki Asahara تاکا یوکی آساهارا 9100319475328460010899 9100319475328460010899 No