fa اثر مهارگر اختصاصی p110 در سلول‌های لوسمی لنفوبلاستیک حاد هماتولوژي Hematology پژوهشي Research <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;">چکیده</p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>سابقه و هدف </em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong>اختلال در مسیر </strong><strong><span dir="LTR">PI3K</span></strong><strong> در لوسمی لنفوبلاستیک حاد(</strong><strong><span dir="LTR">ALL</span></strong><strong>) همراه با نقش مهم آن در ایجاد مقاومت به داروهای شیمی درمانی، باعث شده است که استفاده از مهارگران </strong><strong><span dir="LTR">PI3K</span></strong><strong> در درمان </strong><strong><span dir="LTR">ALL</span></strong><strong> اهمیت به سزایی پیدا کند. بر این اساس، بر آن شدیم تا اثر مهارگر اختصاصی ایزوفرم </strong><strong><span dir="LTR">p110&delta;</span></strong><strong> (</strong><strong><span dir="LTR">GS-1101</span></strong><strong>) را در سلول&shy;های لوسمی لنفوبلاستیک حاد </strong><strong><span dir="LTR">Nalm-6</span></strong><strong> بررسی کنیم.</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.85pt;"><strong><em>مواد و روش‌ها</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong>در یک مطالعه تجربی، به&shy; منظور بررسی اثرات سایتوتوکسیک و آنتی&shy;پرو&shy;لیفراتیو </strong><strong><span dir="LTR">GS-1101</span></strong><strong>، پس از تیمار سلول&shy;های </strong><strong><span dir="LTR">Nalm-6</span></strong><strong> با غلظت‌های مختلف این مهارکننده، فعالیت متابولیک، تعداد و توزیع سلول&shy;ها در چرخه سلولی توسط آزمون&shy;های&shy; </strong><strong><span dir="LTR">&nbsp;MTT</span></strong><strong>، تریپان‌بلو و فلوسایتومتری بررسی گردید. در نهایت، جهت ارزیابی میزان تغییر در بیان ژن&shy;های کنترل کننده چرخه سلولی، پروآپوپتوتیک و آنتی&shy;آپوپتوتیک، آزمایش </strong><strong><span dir="LTR">Rq-PCR</span></strong><strong> انجام شد.</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>یافته‌ها</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.85pt;"><strong>نتایج نشان دادند که </strong><strong><span dir="LTR">GS-1101</span></strong><strong> نه تنها می&shy;تواند تعداد سلول&shy;های </strong><strong><span dir="LTR">Nalm-6</span></strong><strong> را کاهش دهد(از 10⁵ * 24 عدد سلول در گروه کنترل در زمان 48 ساعت به 10³ * 986 عدد در گروه تیمار شده با دوز 50 میکرومولار از مهارکننده)&shy;؛ بلکه قادر است فعالیت متابولیک این سلول&shy;ها را نیز مهار نماید. هم چنین احتمالاً این دارو از طریق افزایش بیان </strong><strong><span dir="LTR">mRNA</span></strong><strong> ژن </strong><strong><em><span dir="LTR">p21</span></em></strong><strong> ، از پیشرفت چرخه سلولی در مرحله </strong><strong><span dir="LTR">G1</span></strong><strong> جلوگیری می&shy;نماید. از سوی دیگر، افزایش بیان ژن پروآپوپتوتیک </strong><strong><em><span dir="LTR">Bax</span></em></strong><strong> و تجمع سلول&shy;ها در مرحله </strong><strong><span dir="LTR">sub-G1</span></strong><strong> متعاقب تیمار با این دارو، نشانگر القای آپوپتوز در سلول&shy;های </strong><strong><span dir="LTR">Nalm-6</span></strong><strong> می&shy;باشد. </strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><em>نتیجه گیری</em></strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.25pt;"><strong><span dir="LTR">GS-1101</span></strong><strong> دارای اثرات آپوپتوتیک و آنتی‌پرولیفراتیو در سلول&shy;های </strong><strong><span dir="LTR">Nalm-6</span></strong><strong> است و این اثرات به &shy;واسطه توقف چرخه&shy; سلولی، افزایش&shy; بیان ژن&shy;های </strong><strong><em><span dir="LTR">p21</span></em></strong><strong> و پروآپوپتوتیک اعمال می&shy;شود.</strong></p> <p dir="RTL" style="margin-right:36.85pt;"><strong>&nbsp;</strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong>Abstract</strong></p> <p style="margin-left:35.1pt;"><strong><em>Background and Objectives</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">The frequency of deregulated PI3K in acute lymphoblastic leukemia (ALL) coupled with the critical role of this signaling pathway in the acquisition of chemo-resistant phenotype lend compelling weight to the application of PI3K inhibitors for the treatment of ALL. In this study we aimed to evaluate the effect of selective p110&delta; inhibitor, GS-1101 on acute lymphoblastic leukemia Nalm-6 cells.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Materials and Methods</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">Nalm-6 cells were treated with different concentrations of GS-1101. In order to determine the cytotoxic and anti-proliferative effects of the drug, MTT and trypan blue exclusion assays were performed, respectively. Afterwards the effect of GS-1101 on cell cycle progression was evaluated using flowcytometry. Finally, Rq-PCR was applied to evaluate the mRNA expression level of cell cycle- and apoptotic-related genes in GS-1101-treated cells.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Results </em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">Our results showed that GS-1101 not only reduced the number of viable cells but also hampered the metabolic activity of inhibitor-treated Nalm-6 cells both in dose- and time-dependent manner. Moreover, we found that the anti-proliferative effect of GS-1101 is mediated, at least partially, through the induction of G1 arrest as a result of up-regulated p21 expression level and accumulation of cells in sub-G1 phase of cell cycle. The results of Rq-PCR also demonstrated that GS-1101 exerts an inductive effect on the mRNA expression level of Bax, as the most important pro-apoptotic gene.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p> <p style="margin-left:34.85pt;"><strong><em>Conclusions</em></strong></p> <p style="margin-left:34.85pt;">p110&delta; isoform inhibitor, GS-1101 shows both apoptotic and anti-proliferative effect on Nalm-6 cells through inducing cell-cycle arrest via up-regulation of cycline-dependent kinase inhibitor, p21 and upregulation of pro-apoptotic-related gene.</p> <p style="margin-left:34.85pt;"></p><p style="margin-left:34.85pt;"></p> کلمات کلیدی: لوسمی لنفوبلاستیک حاد, آپوپتوزیس, چرخه سلولی Key words: Acute Lymphoid Leukemia, Apoptosis, Cell Cycle 43 52 http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1119-1&slc_lang=fa&sid=1 P. Sadreazami پریسا صدراعظمی p.sadreazami@gmail.com 9100319475328460018523 9100319475328460018523 No دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی A. Safar-Oughlou Azar آوا صفراوغلی آذر ava_azari@yahoo.com 9100319475328460018524 9100319475328460018524 No دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی D. Bashash داوود بشاش d.bashash@sbmu.ac.ir 9100319475328460018525 9100319475328460018525 Yes استادیار دانشکده پیراپزشکی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی ـ گروه هماتولوژی