:: جلد 9، شماره 3 و بخش 2 - ( ويژه‌نامه سلول‌هاي بنيادي پاييز 1391 ) ::
جلد 9 شماره 3 و بخش 2 صفحات 225-214 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و بیان موقت ژن محافظت‌کننده سلولی، HO-1 ، در سلول‌های بنیادی مزانشیمال از طریق سیستم بیانی آدنوویروس بر مبنای تکنولوژی Gateway
پژمان حامدی اصل ، راحله حلبیان ، محمد محمدزاده ، مهشید محمدی‌پور ، زهرا بخشنده ، داریوش حامدی اصل ، علی‌اصغر کیانی ، محمد علی جلیلی ، ناصر امیری زاده ، مهریار حبیبی رودکنار
دانشیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون ـ تهران ـ ایران ـ
چکیده:   (20556 مشاهده)

 

  چکید ه

  سابقه و هدف

  HO-1 (هِم‌اکسیژناز-1) یکی از عوامل قدرتمند محافظت کننده سلولی می‌باشد. هدف از این مطالعه، کلونینگ و بیان موقت ژن HO-1 انسانی در سلول‌های بنیادی مزانشیمال( MSC ها) با استفاده از سیستم بیانی آدنوویروسی برمبنای تکنولوژی Gateway بود.

  مواد و روش‌ها

  در یک مطالعه تجربی، به منظور القای HO-1 ، رده سلولی 549 A به مدت 1 ساعت با اشعه UV مواجه گردید. cDNA توتال HO-1 جداسازی شد و از طریق واکنش کلونینگ TOPO به وکتور pENTR TOPO/D کلون گردید. برای ایجاد کلون بیانی، واکنش نوترکیبی LR بین کلون اولیه و وکتور مقصد( pAd/CMV/V5-DEST ) به انجام رسید. ویروس نوترکیب در رده سلولی یوکاریوتی مناسب تشکیل شد. MSC ها به وسیله ویروس نوترکیب بیان‌کننده HO-1 آلوده‌سازی شدند.

  یافته‌ها

  نتایج نشان داد که HO-1 انسانی نوترکیب با موفقیت کلون شده و صحت و قرار گرفتن ژن در قالب صحیح درون وکتور به وسیله تعیین توالی DNA تایید شد. بیان HO-1 در MSC ها به وسیله آنالیز RT-PCR و وسترن بلات تایید گردید. این نتایج حاکی از این بود که بیان HO-1 موقت است.

  نتیجه گیری

  بیان موقت ژن HO-1 انسانی در MSC ها با استفاده از سیستم بیانی آدنوویروسی، ممکن است یک استراتژی انتقال ژنی کارآمد در راستای ارتقای سلول درمانی فراهم نماید.

  

واژه‌های کلیدی: کلمات کلیدی : سلول‌های بنیادی مزانشیمال، هم‌اکسیژناز-1، مهندسی ژنتیک، آدنوویروس‌ها
متن کامل [PDF 550 kb]   (3170 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: سلولهاي بنيادي
انتشار: 1392/6/5


XML   English Abstract   Print



بازنشر اطلاعات
Creative Commons License این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است.
جلد 9، شماره 3 و بخش 2 - ( ويژه‌نامه سلول‌هاي بنيادي پاييز 1391 ) برگشت به فهرست نسخه ها