جلد 23، شماره 1 - ( بهار 1405 )
جلد 23 شماره 1 صفحات 52-45 |
برگشت به فهرست نسخه ها
Ethics code: IR.TMI.REC.1395.016
Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
Yari F, Gorzin F. A Dimerized Synthetic RhD Peptide for Rabbit Immunization: Comparison With the Antigen from Human Red Blood Cell Membranes. bloodj 2026; 23 (1) :45-52
URL: http://bloodjournal.ir/article-1-1623-fa.html
URL: http://bloodjournal.ir/article-1-1623-fa.html
یاری فاطمه، گرزین فاطمه. به کارگیری یک پپتید سنتتیک دایمری RhD برای ایمنسازی در خرگوش و مقایسه آن با آنتیژن کامل به دست آمده از غشای گلبول قرمز انسان. فصلنامه پژوهشی خون. 1405; 23 (1) :45-52
استاد مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
چکیده: (127 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف
پروتئینهایRh ، از اهمیت بالایی در انتقال خون برخوردار میباشنـد. در میان آنتیژنهای گروه خونـیRh ، آنتیژن D بسیار ایمونوژن است و تشخیص این آنتیژن به لحاظ بالینی اهمیت دارد. هدف این مطالعه، ایجاد آنتیبادیهای اختصاصی ضد آنتیژن D در حیوان خرگوش با به کارگیری آنتیژن کامل و دایمری از یک پپتید سنتتیک ویژه آنتیژن D بود. در نهایت، بررسی کارآیی آنتیبادیهای حاصل در آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت.
مواد و روشها
در این مطالعه تجربی، آنتیبادی ضد RhD در حیوانات خرگوش ایجاد شد. خرگوشهای 1 و 2، آنتیژن کامل RhD را دریافت نمودند که از غشای گلبولهای قرمز به روش کروماتوگرافی تمایلی خالص گردیده بود. به موازات، خرگوش 3 با یک پپتید اختصاصی که با روش O-PDM دایمر شده بود ایمونیزه شد. مولکولهای IgG از آنتیسرمهای خرگوشی خالص شدند. ویژگی آنتیژن خالص شده RhD و همچنین آنتیسرمهای ایجاد شده در خرگوشها با روش ELISA ارزیابی شد. به علاوه عملکرد آنتیسرمها از طریق آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت.
یافتهها
ویژگی آنتیژن RhD خالص شده با به کارگیری یک آنتیبادی تجاری به وسیله روش ELISA نشان داده شد. تشکیل آنتیبادیهای ضد RhD در سرم حیوانات خرگوش پس از اتمام مراحل تزریق، با به کارگیری روش ELISA تایید گردید. آنتیبادیهای پلیکلونال به دست آمده از حیوانات ایمیون، توانایی آگلوتیناسیون گلبول های قرمز O+ را در روش دو مرحلهای و حضور یک آنتیبادی ثانویه دارا بودند (3=n). در این رابطه، آنتیسرمهای مربوط به تزریق آنتیژن کامل و پپتید دایمر نتایج مشابهی نشان دادند. آنتیبادیهای به دست آمده تنها قادر به آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز +O از طریق روش دو مرحلهای بودند. استفاده از پپتید سنتتیک مرتبط با انتهای آمینو آنتیژن RhD، در شکل دایمر آن ویژگی ایمونولوژیک مشابهی را در مقایسه با آنتیژن کامل نشان داد.
نتیجه گیری
بر اساس یافتههای این مطالعه، آنتیسرم حاصل از تزریق پپتید سنتتیک دایمری، از نظر قدرت ایمنیزایی، نتایج مشابهی با آنتیژن کامل RhD در تست آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز واجد RhD نشان داد. بنابراین، به نظر میرسد برای ایمنسازی مؤثر با یک پپتید، میتوان از فرم دایمری مناسب آن پپتید به عنوان جایگزینی برای پپتید کونژوگه و پروتئین حامل استفاده کرد.
سابقه و هدف
پروتئینهایRh ، از اهمیت بالایی در انتقال خون برخوردار میباشنـد. در میان آنتیژنهای گروه خونـیRh ، آنتیژن D بسیار ایمونوژن است و تشخیص این آنتیژن به لحاظ بالینی اهمیت دارد. هدف این مطالعه، ایجاد آنتیبادیهای اختصاصی ضد آنتیژن D در حیوان خرگوش با به کارگیری آنتیژن کامل و دایمری از یک پپتید سنتتیک ویژه آنتیژن D بود. در نهایت، بررسی کارآیی آنتیبادیهای حاصل در آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت.
مواد و روشها
در این مطالعه تجربی، آنتیبادی ضد RhD در حیوانات خرگوش ایجاد شد. خرگوشهای 1 و 2، آنتیژن کامل RhD را دریافت نمودند که از غشای گلبولهای قرمز به روش کروماتوگرافی تمایلی خالص گردیده بود. به موازات، خرگوش 3 با یک پپتید اختصاصی که با روش O-PDM دایمر شده بود ایمونیزه شد. مولکولهای IgG از آنتیسرمهای خرگوشی خالص شدند. ویژگی آنتیژن خالص شده RhD و همچنین آنتیسرمهای ایجاد شده در خرگوشها با روش ELISA ارزیابی شد. به علاوه عملکرد آنتیسرمها از طریق آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز انسانی مورد مطالعه قرار گرفت.
یافتهها
ویژگی آنتیژن RhD خالص شده با به کارگیری یک آنتیبادی تجاری به وسیله روش ELISA نشان داده شد. تشکیل آنتیبادیهای ضد RhD در سرم حیوانات خرگوش پس از اتمام مراحل تزریق، با به کارگیری روش ELISA تایید گردید. آنتیبادیهای پلیکلونال به دست آمده از حیوانات ایمیون، توانایی آگلوتیناسیون گلبول های قرمز O+ را در روش دو مرحلهای و حضور یک آنتیبادی ثانویه دارا بودند (3=n). در این رابطه، آنتیسرمهای مربوط به تزریق آنتیژن کامل و پپتید دایمر نتایج مشابهی نشان دادند. آنتیبادیهای به دست آمده تنها قادر به آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز +O از طریق روش دو مرحلهای بودند. استفاده از پپتید سنتتیک مرتبط با انتهای آمینو آنتیژن RhD، در شکل دایمر آن ویژگی ایمونولوژیک مشابهی را در مقایسه با آنتیژن کامل نشان داد.
نتیجه گیری
بر اساس یافتههای این مطالعه، آنتیسرم حاصل از تزریق پپتید سنتتیک دایمری، از نظر قدرت ایمنیزایی، نتایج مشابهی با آنتیژن کامل RhD در تست آگلوتیناسیون گلبولهای قرمز واجد RhD نشان داد. بنابراین، به نظر میرسد برای ایمنسازی مؤثر با یک پپتید، میتوان از فرم دایمری مناسب آن پپتید به عنوان جایگزینی برای پپتید کونژوگه و پروتئین حامل استفاده کرد.
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
ايمونولوژي
فهرست منابع
1. Avent ND, Reid ME. The Rh blood group system: a review. Blood. 2000; 95(2): 375-87. [DOI:10.1182/blood.V95.2.375] [PMID]
2. Westhoff CM. The structure and function of the Rh antigen complex. Semin Hematol. 2007; 44(1): 42-50. [DOI:10.1053/j.seminhematol.2006.09.010] [PMID] []
3. Nadarajan VS. Serological analysis of Rh antigens: how far can we go? Annals of Blood. 2023; 8. [DOI:10.21037/aob-23-30]
4. 4. Li HY, Guo K. Blood Group Testing. Front Med (Lausanne). 2022; 9: 827619. [DOI:10.3389/fmed.2022.827619] [PMID] []
5. Wu H, Li R, Wei H, Zhu W, Xing Y. Clinical Characteristics and Prognosis of Hemolytic Disease of the Newborn Caused by Irregular Antibodies: A 13-Year Retrospective Analysis. Children (Basel). 2024;11(12): 1409. [DOI:10.3390/children11121409] [PMID] []
6. Grant GA. Synthetic Peptides for Production of Antibodies that Recognize Intact Proteins. Curr Protoc Immunol. 2003; 55(1): 9.2: 1-9. [DOI:10.1002/0471142735.im0902s55] [PMID]
7. Tamura T, Tomimatsu K, Katakura Y, Yamashita M, Matsumoto SE, Aiba Y, et al. Anti-peptide antibody production elicited by in vitro immunization of human peripheral blood mononuclear cells. Biosci Biotechnol Biochem. 2007; 71(12): 2871-5. [DOI:10.1271/bbb.60460] [PMID]
8. Lee BS, Huang JS, Jayathilaka LP, Lee J, Gupta S. Antibody Production with Synthetic Peptides. Methods Mol Biol. 2016; 1474: 25-47. [DOI:10.1007/978-1-4939-6352-2_2] [PMID]
9. Millard AL, Ittelet D, Schooneman F, Bernard J. Dendritic cell KLH loading requirements for efficient CD4+ T-cell priming and help to peptide-specific cytotoxic T-cell response, in view of potential use in cancer vaccines. Vaccine. 2003; 21(9-10): 869-76. [DOI:10.1016/S0264-410X(02)00534-0] [PMID]
10. Cochet S, Blancher A, Roubinet F , Hattab C , Cartron JP, Bertrand O. Immunopurification of the blood group RhD protein from human erythrocyte membranes. J Chromatogr B Biomed Sci Appl. 1999 10; 735(2):207-17. [DOI:10.1016/S0378-4347(99)00424-7] [PMID]
11. Rezaeeyan H , Yari F, Milani S. The Blood Group Rhc Protein from Human Erythrocyte Membranes as an Immunogen for Producing Antibodies in Mice. Iran J Ped Hematol Oncol. 2024; 14( 1): 44-52. [DOI:10.18502/ijpho.v14i1.14663]
12. Greg T. Hermanson, editor: Bioconjugation. 3rd ed. UK: Pierce Biotechnology, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL; 2013: Chapter 13
13. Johnstone A and Thorpe R, editors: Immunochemistry in Practice. 3rd ed. London: Blackwell Science; 1996: Chapter 2
14. Walker RY, Andrew S, Kumpel BM, Austin EB. Murine monoclonal antibodies reactive with a human monoclonal anti-RhD antibody (BRAD-5). Transfus Med. 2000; 10(3): 225-31. [DOI:10.1046/j.1365-3148.2000.00258.x] [PMID]
15. Miescher S, Zahn-Zabal M, De Jesus M, Moudry R, Fisch I, Vogel M, et al. CHO expression of a novel human recombinant IgG1 anti-RhD antibody isolated by phage display. Br J Haematol. 2000;111(1): 157-66.
https://doi.org/10.1111/j.1365-2141.2000.02322.x [DOI:10.1046/j.1365-2141.2000.02322.x]
16. Hermand P, Mouro I, Huet M, Bloy C, Suyama K, Goldstein J, et al. Immunochemical characterization of rhesus proteins with antibodies raised against synthetic peptides. Blood. 1993 ;82(2): 669-76.
https://doi.org/10.1182/blood.V82.2.669.bloodjournal822669 [DOI:10.1182/blood.V82.2.669.669]
ارسال پیام به نویسنده مسئول
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
