مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
چکیده: (1260 مشاهده)
چکیده
سابقه و هدف
فاکتور سلول بنیادی، یک سیتوکاین خونی است که از طریق تأثیر بر روی سلولهای خونساز در تمایز سلولهای پیشساز خونی، بقا، تکثیر و تمایز ماستسل و همچنین افزایش تکثیر و تهاجم سلولهای توموری نقش ایفا میکند. زیپ لوسین به صورت نوترکیب یا طبیعی با تشکیل همودایمر در ساختار خود، باعث همو و یا هترو دایمریزاسیون انواع بسیاری از پروتئینهای متصل به خود شده و میتواند اثری مطلوب در عملکرد یا پایداری آنها داشته باشد. مطالعه انجام شده سعی در دایمریزاسیون فاکتور سلولهای بنیادی نوترکیب و زیپلوسین و بیان آن دارد.
مواد و روشها
مطالعه حاضر از نوع تجربی بود. شامل بخش طراحی پروتئین نوترکیب توسط نرمافزارهای بیوانفورماتیک و بخش آزمایشگاهی میباشد. شاخصهای مورد توجه در بخش طراحی از جمله ساختارهای پروتئینی توسط نرمافزارهای مختلف شامل PSIpred وChimera و پایداری پروتئین نوترکیب توسط RAMPAGE بررسی شد. پس از تعیین جایگاههای برش آنزیمی توسط NEBcutter و بهینهسازی برای باکتری اریگامی توسط Optimizer ، ساخت توالی انجام شد. در ادامه کلون آن در باکتری TOP10 و بیان پروتئین در باکتری اریگامی انجام گرفت.
یافتهها
نتایج حاصل از مطالعههای بیوانفورماتیک روی پروتئین نوترکیب Leucine Zipper / SCF، در برگیرنده شاخصهای لازم جهت ساختار صحیح پروتئین و دارای امتیازی بالا از لحاظ پایداری در سلول زنده بود و در ادامه نتایج حاصل از بخش تجربی نشان از کلون و بیان موفق آن داشت.
نتیجه گیری
نتایج این مطالعه، همسانهسازی و بیان موفق پروتئین نوترکیب Leucine Zipper/SCF در میزبان اریگامی را تائید نمود.
نوع مطالعه:
پژوهشي |
موضوع مقاله:
بيوتكنولوژي انتشار: 1400/10/10