استاد مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پزوهشی طب انتقال خون
چکیده: (2866 مشاهده)
چکیده سابقه و هدف استان خراسان در ایران برای ویروسHTLV-1 اندمیک است. با توجه به ناکارآمد بودن آزمایش‌های سرولوژیکی در شناسایی ویروس‌ها در دوره کمون، تایید جواب‌های نامشخص وسترن بلات و خطر انتقال ویروس HTLV-1 از راه خون و فرآوردههای خونی، آزمایش Real – Time PCR به روش سایبرگرین راه‌اندازی شد. نمونههای مورد آزمایش، مربوط به اهداکنندگان خون آلوده به این ویروس در پایگاه انتقال خون استان خراسان رضوی در سال 1396 بودند. مواد و روش‌ها در یک مطالعه تجربی، با استفاده از روش کلونینگ و رسم منحنی استاندارد، آزمایش Real - Time PCR برای تعیین پرووایرال لود راه‌اندازی شد. ابتدا DNAژنومی از سلول‌های تک هسته‌ای خون محیطی استخراج شد. سپس محصول PCR ژنTax،در یک وکتور کلونینگ قرار داده شد و با رقت‌سازی، منحنی استاندارد رسم و آزمایش Real – Time PCR با روش سایبرگرین راه‌اندازی شد. یافته‌ها با استفاده از محصول PCR برای ژن Tax، وکتور pTZ57/T و باکتریE.Coli (سوش TG1) کلونینگ انجام شد.صحت کلونینگ با Colony PCR و تعیین سکانس تایید شد. محصول کلونینگ به عنوان استاندارد آزمایش Real –Time PCR استفاده شد و با رقت‌سازی، منحنی استاندارد رسم شد. شیب خط منحنی استاندارد 3/3 slope= و 99/0 = 2R بوده که نشاندهنده خطی بودن و کارآیی واکنش آزمایش می‌باشد. نتیجه گیری روش Real –Time PCR جهت تعیین پرووایرال لود ویروس HTLV-1 مناسب است.
Ghasemzadegan H, Shahabi M, Rezaei N, Sharifi Z. Design a Real Time PCR with SYBR Green for quantification of HTLV-1 proviral load for blood donors. Sci J Iran Blood Transfus Organ 2019; 16 (3) :194-200 URL: http://bloodjournal.ir/article-1-1248-fa.html
قاسم زادگان حمیده، شهابی مجید، رضایی نگار، شریفی زهره. راه‌اندازی روش Real-Time PCR جهت تعیین بار پرووایرال ویروس لنفوتروپیک T انسانی نوع I به روش سایبرگرین جهت نمونههای اهداکنندگان خون. فصلنامه پژوهشی خون. 1398; 16 (3) :194-200
