فصلنامه پژوهشی خون

چکیده
سابقه و هدف
متیلاسیون DNA در ناحیه پروموتر ژن‏های سرکوبگر تومور از جمله P15 ، به عنوان یکی از مهمترین مکانیسم‏های ایجاد بدخیمی‏های خونی مطرح است .هارمالین یکی از آلکالوئیدهای مشتق شده از گیاه اسپند است که دارای خاصیت آنتی‏پرولیفراتیو بر روی رده‌های سلولی لوسمیک می‏باشد. در این مقاله تاثیر هارمالین بر کاهش بیان ژنDnmt1  و هیپومتیلاسیون ناحیه پروموتر ژن P15 در رده سلولی NB4 مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روش‌ها
در این مطالعه تجربی با استفاده از روش MTT ، تاثیرات سیتوتوکسیک بر رده سلولی NB4  تا 72 ساعت بررسی شد. جهت بررسی چرخه سلولی پس از تیمار با هارمالین، از روش فلوسیتومتری استفاده شد. وضعیت متیلاسیون پروموتور ژن P15 با استفاده از روش Methylation specific PCR بررسی شد. با استفاده از روش Real-time PCR ، میزان بیان ژن‌های Dnmt1 و P15 بررسی گردید.
یافته‌ها
نتایج نشان داد که داروی هارمالین از غلظت µg/mL 15 به بالا، پس از 48 ساعت به صورت وابسته به دوز و زمان دارای خاصیت آنتی‌پرولیفراتیو بر روی رده سلولی NB4 می‌باشد. آنالیز چرخه‌ سلولی نشان‌دهنده ایست سلول‌ها در فاز G0G1 است. هارمالین در غلظت ‌ µg/mL15 موجب کاهش بیان ژن Dnmt1 ، هیپومتیلاسیون پروموتور ژن‌P15  و افزایش مجدد بیان ژنP15  در رده سلولی  NB4می‎شود.
نتیجه گیری
با توجه به اثر بخشی داروی هارمالین بر کاهش بیان ژن Dnmt1 و هیپومتیلاسیون پروموتور و افزایش بیان ژن P15 در این رده سلولی، می‌توان چنین پیشنهاد کرد که این دارو می‌تواند به عنوان یک راه‌کار درمانی مناسب به صورت‌ منوتراپی و یا داروی مکمل همراه با دارو‌های متداول لوسمی پرومیلوسیتیک حاد مورد استفاده قرار گیرد.