The Scientific Journal of Iranian Blood Transfusion Organization
فصلنامه پژوهشی خون
Sci J Iran Blood Transfus Organ
Medical Sciences
http://bloodjournal.ir
91
journal91
1027-9520
1735-8248
fa
jalali
1391
12
1
gregorian
2013
3
1
10
1
online
1
fulltext
fa
توانایی تمایز سلول CD133+ خون بند ناف به سلولهای ترشحکننده انسولین
Differentiation of human cord blood CD133+ cells into insulin secreting cells in vitro
سلولهاي بنيادي
Stem cells
پژوهشي
Research
<p align="right"> چکید ه </p><p align="right"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="right"> <strong> تولید سلولهای اندوکرینی و جزایر انسولینساز، از جمله اهداف درمان دیابت میباشد. مشخص شده است که سلولهای </strong><strong>CD133<sup>+</sup> </strong><strong>خون بند ناف قادر به بیان فاکتورهای رونویسی جنینی هم چون <i>4-</i> </strong><strong><i>SSEA </i></strong><strong>و <i>4</i> </strong><strong><i>OCT </i></strong><strong>هستند و لذا میتوانند کاندید مناسبی برای درمان دیابت محسوب شوند. در این مطالعه سلولهای </strong><strong>CD133<sup>+</sup> </strong><strong>خون بند ناف به منظور تمایز به سلولهای ترشحکننده انسولین مورد بررسی قرار گرفتند. </strong></p><p align="right"> <strong><i> مواد و روشها </i></strong></p><p align="right"> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. سلولهای </strong><strong>CD133<sup>+</sup> </strong><strong>خون بند ناف با استفاده از روش </strong><strong>MACS </strong><strong>جدا شدند و در محیط کشت تمایزی(حاوی </strong><strong>DMEM/F12 </strong><strong>، </strong><strong>Nicotinamid </strong><strong>، </strong><strong>bFGF </strong><strong>، </strong><strong>N2 supplement B27 </strong><strong>) به مدت 9 روز قرار گرفتند. از روش ایمونوسیتوشیمی، برای بررسی بیان پروتئینهای انسولین و پپتید- </strong><strong>C </strong><strong>، از </strong><strong>RT-PCR </strong><strong>برای بررسی بیان ژنهای انسولین، گلوکاگون، 1 </strong><strong><i>PDX </i></strong><strong>و <i>1/6</i> </strong><strong><i>NKX </i></strong><strong>و از الایزا برای تعیین عملکرد سلولهای تمایز یافته استفاده شد. </strong></p><p align="right"> <strong><i> یافتهها </i></strong></p><p align="right"> <strong> سلولهای </strong><strong>CD133<sup>+</sup> </strong><strong>مشتق از خون بند ناف در انتهای مرحله تمایزی، پروتئین انسولین و پپتید- </strong><strong>C </strong><strong>را بیان کردند. سلولهای تمایز یافته، قادر به بیان ژنهای <i>1/6</i> </strong><strong><i>NKX </i></strong><strong>، <i>1</i> </strong><strong><i>PDX </i></strong><strong>، انسولین و گلوکاگون نبودند و هم چنین توانایی پاسخ به تیمارهای مختلف گلوکز(5 و 27 میلی مولار) را نداشتند. </strong></p><p align="right"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="right"> <strong> سلولهای </strong><strong>CD 133<sup>+</sup> </strong><strong>قادر به تمایز به سلولهای انسولینساز در محیط آزمایشگاه میباشند اما توانایی لازم برای ترشح انسولین را نداشته و نیازمند سیگنالهای مناسب از محیط زنده هستند. </strong></p><p align="right"> </p>
<p> <strong></strong></p><p> <strong>Abstract</strong> </p><p> <i><strong>Background and Objectives</strong></i></p><p> The production of a sufficient number of pancreatic endocrine cells that function similarly to primary islets is one of the methods in treatment of diabetes. The CD133<sup>+</sup> cells derived from cord blood (UCB-CD133) express some embryo specific markers such as SSEA-4 and OCT4 and so it can be a candidate for differentiation into insulin secreting cells. Therefore, here we attempt to determine the differentiation potential of UCB-CD133<sup>+</sup> cells into insulin secreting cells <i>in vitro</i>.</p><p> </p><p> <i><strong>Materials and Methods</strong></i></p><p> UCB-CD133+ cells were isolated by MACS and differentiated into insulin secreting cells using the medium containing DMEM/F12, bFGF, Nicotinamid, and supplement B27 N2 for 9 days. The expression of insulin and c-peptide protein was detected by immonocytochemistry. The expression of insulin, Nkx6.1, Pdx1, and Glocagon genes was analyzed by RT-PCR ELISA was performed to analysis the function of differentiated cells in different glucose concentrations (5 and 27 mM). </p><p> </p><p> <i><strong>Results</strong></i></p><p> Our results determined that UCB-CD133<sup>+</sup> cells expressed insulin and c-peptide at protein level after 9 days of culture. However, the insulin, Nkx6.1, Pdx1, and Glocagon genes were not detected in differentiated cells and they could not respond to different concentrations of glucose. </p><p> </p><p> <i><strong>Conclusions</strong></i></p><p> We suggested that UCB-CD133<sup>+</sup> cells can differentiate into insulin secreting cells <i>in vitro</i> however, they are not functional and need to receive more signals <i>in vivo</i>. </p><p> </p><p> </p>
کلمات کلیدی : خون بند ناف, سلولهای ترشحکننده انسولین, دیابت قندی تیپ I
Key words: Umbilical Cord Blood, Insulin-Secreting Cells, Diabetes Mellitus , Type 1
53
64
http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-283&slc_lang=fa&sid=1
F.
Sahraneshin
فاضل
صحرانشین
910031947532846009486
910031947532846009486
No
پژوهشکده زیستشناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان
M.
Ebrahimi
مرضیه
ابراهیمی
mebrahimi@royaninstitute.org
910031947532846009487
910031947532846009487
Yes
پژوهشکده زیستشناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان
T.
Zandiyh
طاهره
زندیه
910031947532846009488
910031947532846009488
No
پژوهشکده زیستشناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی
M.
Mohammad
منیره
محمد
910031947532846009489
910031947532846009489
No
پژوهشگاه رویان
N.
Aghdami
ناصر
اقدمی
910031947532846009490
910031947532846009490
No
پژوهشگاه رویان
H.
Baharvand
حسین
بهاروند
910031947532846009491
910031947532846009491
No
پژوهشکده زیستشناسی و فناوری سلولهای بنیادی جهاد دانشگاهی ـ مرکز تحقیقات علوم سلولی ـ پژوهشگاه رویان