The Scientific Journal of Iranian Blood Transfusion Organization
فصلنامه پژوهشی خون
Sci J Iran Blood Transfus Organ
Medical Sciences
http://bloodjournal.ir
91
journal91
1027-9520
1735-8248
fa
jalali
1386
6
1
gregorian
2007
9
1
4
3
online
1
fulltext
fa
آیا سلولهای CD45RA+/RO+ و CD4+/CD8+ خون بند ناف پره ترم، خصوصیات عملکردی متفاوتی را در مقایسه با سلولهای مشابه در خون بند ناف ترم نشان میدهند؟
Do preterm cord blood CD4+/CD8+, CD45RA+/RO+ cells demonstrate distinct functional properties compared with their term cord blood counterparts?
سلولهاي بنيادي
Stem cells
پژوهشي
Research
<strong><p align="justify"> چکید ه </p><p align="justify"> <strong><i> سابقه و هدف </i></strong></p><p align="justify"> <strong> گزارشهای مختلف نشان میدهند که سلولهای خونساز خون بند ناف نوزادان پره ترم، توانایی تکثیر و خصوصیت خود تجدید شونده بالایی را در مقایسه با مغز استخوان و خون بند ناف نوزادان ترم نشان میدهند. در این تحقیق، وضعیت سلولهای ایمنی خون بند ناف پره ترم به عنوان مرحلهای از مراحل تکاملی و هم از جنبه بررسی وضعیت بیتجربه بودن، با سلولهای مشابه در خون بند ناف ترم مقایسه شدند. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> مواد وروشها </i></strong></p><p align="justify"> <strong> مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. پس از جداسازی سلولهای تک هستهای از خون بند ناف ترم(بالای 37 هفته) و پره ترم(کمتر از 37 هفته) در محیط کشت کامل و حاوی 50 نانوگرم در میلیلیتر </strong><strong>PMA </strong><strong>و 1 میکروگرم در میلیلیتر یونومایسین در حضور مونن زین کشت داده شد. سپس با استفاده از ساپونین 1/0 درصد نفوذ پذیر شده، جهت بررسی میزان فعال شدن سلولها پس از تحریک با </strong><strong>PMA </strong><strong>و یونومایسین، با منوکلونال آنتیبادی </strong><strong>Anti-CD69 </strong><strong>و برای ارزیابی تولید سایتوکاین با آنتیبادیهای اختصاصی کونژوگه </strong><strong>IL-2 </strong><strong>، </strong><strong>IL-4 </strong><strong>، </strong><strong>IFN- </strong><strong>g </strong><strong>و </strong><strong>IL-10 </strong><strong>رنگ آمیزی شد. میانگین درصد فراوانی سلولهای تولید کننده سایتوکاین و میزان بیان سایتوکاین در فنوتیپ سلولی </strong><strong>CD4<sup>+</sup>/CD8<sup>+</sup> </strong><strong>، CD45RA<sup>+</sup>/RO </strong><strong>با استفاده از دستگاه کولتر Epics-XL </strong><strong>و با استفاده از نرمافزار </strong><strong>Immuno-4 </strong><strong>آنالیز شد. جهت تحلیل آماری نتایج از آزمونهای کولموگروف ـ اسمیرنوف و </strong><strong>t(student's t-test) </strong><strong>با سطح معنیداری 05/0 </strong><strong>p< </strong><strong>استفاده شد. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> یافتهها </i></strong></p><p align="justify"> <strong> مطالعه فنوتیپ سلولی نشان داد که در میانگین درصد سلولهای </strong><strong>CD4<sup>+</sup>CD45RA<sup>+</sup> </strong><strong><sup />، CD4<sup>+</sup>CD45RO<sup>+</sup> </strong><strong>و CD8<sup>+</sup>CD45RO<sup>+</sup> </strong><strong>خون بند ناف ترم و پره ترم تفاوت معنیداری دیده نمیشود. مقایسه میانگین درصد سلولهای CD3<sup>+</sup> </strong><strong>، CD4<sup>+</sup> </strong><strong>، CD8<sup>+</sup> </strong><strong>، CD3<sup>+</sup>HLA-DR </strong><strong>، CD4<sup>+</sup> HLA-DR<sup>+</sup> </strong><strong>و CD25<sup>+</sup> </strong><strong>در خون بند ناف ترم افزایش معنیداری در مقایسه با خون بند ناف پره ترم نشان میدهد. علاوه بر این، مقایسه میانگین درصد سلولهای تولید کننده سایتوکاینهای IL-2 </strong><strong>، IFN- g </strong><strong>، </strong><strong>IL-4 </strong><strong>، </strong><strong>IL-10 </strong><strong>و میزان بیان آنها تفاوت معنیداری را بین دو نوع سلول نشان نداد. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> نتیجه گیری </i></strong></p><p align="justify"> <strong> از آنجایی که سلولهای ایمنی خون بند ناف پره ترم در مقایسه با خون بند ناف ترم از نظر عملکردی تفاوت معنیداری را نشان نمیدهند، پیوند سلولهای بنیادی از این منبع سلولی نه تنها دارای رفتار ایمونولوژیک یکسان با خون بند ناف ترم به خصوص از نقطه نظر </strong><strong>GVHD </strong><strong>میباشد، بلکه با توجه به فراوانی و توانایی تکثیر بالاتر سلولهای بنیادی آن و علاوه بر آن حضور پیشسازهای غیر بالغتر از نظر اُنتوژنی، میتواند احتمالاًَ نسبت به خون بند ناف ترم اولویت داشته در موارد پیوند کاربرد یابد. </strong></p><p align="justify"> <strong><i> کلمات کلیدی </i>: خون بند ناف، CD4<sup>+</sup> T لنفوسیت، CD8<sup>+</sup> T لنفوسیت، سایتوکاین </strong></p></strong>
<p> <strong></strong></p><p> </p><p> <strong> Abstract </strong><strong></strong></p><p> <strong><i>Background and Objectives</i></strong></p><p> The incidence and severity of Graft Versus Host Disease following the use of umbilical cord blood as a source of stem cells for bone marrow reconstitution challenge the scientific findings of the immunocompetence of newborn immune cells. The reports show that self renewal characteristics and the proliferative capacity of primitive hematopoietic progenitors in the preterm cord blood are higher in comparison with term cord blood and bone marrow. In this study, the characteristics of preterm cord blood immune cells were analyzed from a naive point of view especially in comparison with its counterparts in term cord blood. </p><p> </p><p> <strong><i>Materials and Methods</i></strong></p><p> Term and pretem MNCs were isolated and cultivated in complete media containing PMA (50 ng/ml) and Ionomycine (1µg/ml) at the presence of monensin they were then permeabilized with %0.1 saponin. After cell stimulation with PMA and Ionomycine, staining was performed with Moab anti-CD69 antibody to estimate the level of activation and was also conjugated with anti- IL-10, IFN-γ, IL-4, IL-2 antibody to evaluate the production of cytokine. Mean percentage frequency of cytokine producing cells and the level of cytokine expression in CD4+/CD8+, CD45RA+/RO+ cells were analyzed by Epics-XL and IMMUNO-4 software. Statistical analysis was carried out using Kolmogrov-Smirnov and Student's t-test .</p><p> </p><p> <strong><i>Results</i></strong></p><p> Cellular phenotypic analysis showed no significant differences in CD4<sup> + </sup>CD45RA<sup>+</sup>, CD8<sup>+</sup>CD45RO<sup>+</sup> and CD4<sup>+</sup>CD45RO<sup>+</sup> cells in term and preterm cord blood (p< 0.05). Mean percentage of CD3<sup>+</sup> , CD4<sup>+</sup> , CD8<sup>+</sup>, HLA-DR+CD3<sup>+</sup>, DR - HLA<sup>+</sup>CD4<sup>+ </sup>and CD25<sup>+</sup> cells had significant increment in term cord blood. No statistically significant differences in the level of expression and the frequency of cytokine producing cells were observed in distinct gestational ages.</p><p> </p><p> <strong><i>Conclusions</i></strong></p><p> Considering the lack of any significant functional differences between term and preterm cord blood immune cells, hematopoietic stem cells of preterm cord blood not only have the same immunological behavior, especially with respect to GVHD, but also have the higher frequency and proliferative capacity. The presence of immature progenitor cells may have priority to term cord blood and be applied in transplantation settings.</p><p> <strong>�</strong></p><p> <strong><i>Key words:</i></strong><strong><i>�</i></strong><strong></strong>Cord blood, CD4 positive T lymphocyte , CD8 positive T lymphocyte, Cytokine </p><p> </p>
بند ناف, پره ترم, CD4+ T لنفوسیت, CD8+ T لنفوسیت, سایتوکاین
Cord blood, CD4 positive T lymphocyte , CD8 positive T lymphocyte, Cytokine
189
197
http://bloodjournal.ir/browse.php?a_code=A-10-1-141&slc_lang=fa&sid=1
M.
Kheirandish
مریم
خیراندیش
kheira_m2001@yahoo.co.uk
9100319475328460010625
9100319475328460010625
Yes
سازمان انتقال خون ایران
M.
Ebtekar
معصومه
ابتکار
9100319475328460010626
9100319475328460010626
No
A.A.
Pourfathollah
علیاکبر
پورفتحاله
9100319475328460010627
9100319475328460010627
No
Z.
Mohammad hassan
زهیر
محمدحسن
9100319475328460010628
9100319475328460010628
No
S.D.
Siadat
سید داور
سیادت
9100319475328460010629
9100319475328460010629
No
A.
Kazem Nejad
اردشیر
کاظمنژاد
9100319475328460010630
9100319475328460010630
No