[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: آرشيو مقالات :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 8، شماره 2 - ( تابستان 1390 ) ::
جلد 8 شماره 2 صفحات 96-103 برگشت به فهرست نسخه ها
کلون‌سازی و مطالعه بیان فاکتور بافتی نوترکیب در سلول‌های یوکاریوتیک CHO
مونا خورشیدفر، دکتر ناصر امیری‌زاده* ، دکتر مهریار حبیبی رودکنار
PhD هماتولوژی و بانک خون استادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون
چکیده:   (15394 مشاهده)

  چکید ه

  سابقه و هدف

  فاکتور بافتی( TF )، اصلی‌ترین آغازکننده آبشار انعقادی است. برای بررسی مسیر خارجی انعقاد، اندازه‌گیری زمان پروترومبین بهترین روش است که در این روش با توجه به TF به کار گرفته شده، نوساناتی در نتیجه آزمایش دیده می‌شود. در این مطالعه با هدف دستیابی به نتایجی با تکرارپذیری بیشتر، از TF نوترکیب استفاده شده است.

  مواد و روش‌ها

  مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. cDNA فاکتور بافتی در پلاسمید pcDNA3.1 کلون و به سلول‌های CHO منتقل گردید. پروتئین‌های سلول‌های CHO ترانسفکت شده استخراج و پس از جداسازی با روش SDS-PAGE با وسترن بلات آنالیز شدند. سلول‌های CHO که TF را بیان می‌کردند در حضور کلروکلسیم به پلاسمای سیتراته افزوده شدند و زمان لخته شدن پلاسما ثبت گردید. فعال‌سازی فاکتور VII در پلاسما با روش الایزا مورد بررسی قرار گرفت.

  یافته‌ها

  در آنالیز پروتئین‌های جدا شده از سلول های ترانسفکت شده با روش SDS-PAGE ، باندی حدود 40 کیلودالتون مشاهده شد که با آنتی‌بادی مونوکلونال TF در آنالیز وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت. زمان انعقاد پلاسما در مقایسه با سلول‌های CHO ترانسفکت نشده, از 3 دقیقه به 3 ± 21 ثانیه کاهش یافت. هم چنین اضافه کردن غشای این سلول‌ها به پلاسما در حضور کلرور کلسیم، موجب فعال‌سازی فاکتور VII به میزان ng/ml 35 ±810 شد.

  نتیجه گیری

  TF نوترکیب بیان شده در سلول‌های CHO ، قادر به لخته کردن پلاسمای سیتراته و فعال سازی فاکتور VII بود.

 

واژه‌های کلیدی: سلول‌های CHO، فاکتور VII، زمان پروترومبین
متن کامل [PDF 279 kb]   (1499 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: بيوتكنولوژي
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

کد امنیتی را در کادر بنویسید >


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Khorshidfar M, Amirizadeh N, Habibi Roudkenar M. Cloning and expression of recombinant tissuefactor in CHO cells. Sci J Iran Blood Transfus Organ. 2011; 8 (2) :96-103
URL: http://bloodjournal.ir/article-1-483-fa.html

خورشیدفر مونا، امیری‌زاده ناصر، حبیبی رودکنار مهریار. کلون‌سازی و مطالعه بیان فاکتور بافتی نوترکیب در سلول‌های یوکاریوتیک CHO. فصلنامه پژوهشی خون . 1390; 8 (2) :96-103

URL: http://bloodjournal.ir/article-1-483-fa.html



جلد 8، شماره 2 - ( تابستان 1390 ) برگشت به فهرست نسخه ها
فصلنامه پژوهشی خون Scientific Journal of Iran Blood Transfus Organ
The Scientific Journal of Iranian Blood Transfusion Organization - Copyright 2006 by IBTO
Persian site map - English site map - Created in 0.09 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 3705